tag:blogger.com,1999:blog-20308665446491819772024-03-13T14:26:40.852+07:00E L _ FAHRYBIMANTARAMEMBENAMKAN _ T A N D A _ TANYAThailand aik aikhttp://www.blogger.com/profile/10964108109700651247noreply@blogger.comBlogger131125tag:blogger.com,1999:blog-2030866544649181977.post-61020155563999796662015-04-18T12:13:00.001+07:002015-04-18T12:13:44.066+07:00DARKNESS<br /><b>Lord Byron (George Gordon Byron, Inggris abad ke-19 tahun 1816).</b><br /><br /> <br /><br /><div style="text-align: center;">
<a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEhU_2yH2fktFbhK8w9z02hKidOHL5BDaHITZyuBASJobTY_k6OdkgmhwHflH2A3DWb8U2iFPCLJtVvXQFLjyJJspGY4dox_7evDJhyeQ35Ol48fta_nAExplll0M4C4PkELou8so0-Rea0/s1600/letusan-gunung-tambora1.jpg"><img border="0" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEhU_2yH2fktFbhK8w9z02hKidOHL5BDaHITZyuBASJobTY_k6OdkgmhwHflH2A3DWb8U2iFPCLJtVvXQFLjyJJspGY4dox_7evDJhyeQ35Ol48fta_nAExplll0M4C4PkELou8so0-Rea0/s1600/letusan-gunung-tambora1.jpg" /></a></div>
<br /> <br />And war, which was a moment was no more, did glut himself again. A meal was bought, with blood, and each state sullenly apart gorging himself in gloom. No love was left.”<br /> ( perang, yang saat ini sudah berhenti, muncul kembali untuk memuaskan diri. Santapan bergelimang darah yang memuaskan muka yang cemberut berkeping-keping. Tak ada rasa yang tersisa )<br /><br /> “I had a dream which was not all a dream.”<br /> (Saya punya mimpi yang tak sepenuhnya mimpi).<br /> <br />
<span class="fullpost">
<br /> “The bright sun was extinguished, and the stars did wander darkling in the eternal space. Rayless, and pathless, and the icy earth swung blind and blackening in the moonless air. Morn came and went—and came, and brought no day.”<br /> (Matahari yang terang itu padam, dan bintang-bintang menggelap di angkasa yang abadi. Tanpa cahaya, tanpa jalan, dan Bumi yang beku membuta dan menghitam dalam langit tak berbulan. Pagi datang dan pergi—dan datang lagi, tanpa membawa hari).<br /><br /> All Earth was but one thought, and that was death. Immediate and inglorious. And the pang of famine fed upon all entrails, men died, and their bones were tombless as their flesh.”<br /> (Seluruh Bumi cuma punya satu pikiran, dan itu adalah kematian. Tiba-tiba dan begitu hina. Dan kelaparan yang menyapa perut, orang-orang mati, dan tulangnya tak berpusara seperti halnya daging mereka).<br /><br /> <br />Nb :<br /> PUISI INI menceritakan dahsyatnya dampak letusan Gunung Tambora Indonesia dua abad lalu di Eropa.<br /><br /> <br /><br /> <br /><br />
</span>
<!-- Blogger automated replacement: "https://images-blogger-opensocial.googleusercontent.com/gadgets/proxy?url=http%3A%2F%2F1.bp.blogspot.com%2F-x0gUmIFCA7Y%2FVTHmL8TWXlI%2FAAAAAAAAB-4%2FIrHUB4RonsE%2Fs1600%2Fletusan-gunung-tambora1.jpg&container=blogger&gadget=a&rewriteMime=image%2F*" with "https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEhU_2yH2fktFbhK8w9z02hKidOHL5BDaHITZyuBASJobTY_k6OdkgmhwHflH2A3DWb8U2iFPCLJtVvXQFLjyJJspGY4dox_7evDJhyeQ35Ol48fta_nAExplll0M4C4PkELou8so0-Rea0/s1600/letusan-gunung-tambora1.jpg" --><div class="blogger-post-footer">MEMUSNAHKAN TANDA TANYA ANDA. THANKS BRO !</div>Thailand aik aikhttp://www.blogger.com/profile/10964108109700651247noreply@blogger.com0tag:blogger.com,1999:blog-2030866544649181977.post-78620948846960984732014-09-03T17:26:00.002+07:002015-04-18T12:16:51.820+07:00SELAMAT DATANG KAMPUS NEGERI DI TANAH BIMA<span class="fullpost">
</span>
<br />
<div class="separator" style="clear: both; text-align: center;">
<span class="fullpost"><a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEhZZrYWyJZkIktsxY7f05MDKVeplSAu2fIq69S8zR6yaoDeUuKQ5BwZ6XeMIcwUC2gADw5NC6rNxeKr9undbLvYcylKyr728Hecle93chkO0mgJ0J6IIjNGxkd7A-VjCb_8Yy8lg5g6h4A/s1600/Good+Momentum+In+Life+(2).JPG" imageanchor="1" style="clear: left; float: left; margin-bottom: 1em; margin-right: 1em;"><img border="0" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEhZZrYWyJZkIktsxY7f05MDKVeplSAu2fIq69S8zR6yaoDeUuKQ5BwZ6XeMIcwUC2gADw5NC6rNxeKr9undbLvYcylKyr728Hecle93chkO0mgJ0J6IIjNGxkd7A-VjCb_8Yy8lg5g6h4A/s1600/Good+Momentum+In+Life+(2).JPG" height="162" width="200" /></a></span></div>
<br />
<b>Oleh : Muhammad Fahri, SPi. MP**)</b><br />
* Pemerhati Pendidikan Vokasi<br />
** Staf Pengajar SMKN 1 Bima<br />
<br />
Sumber Daya Manusia (SDM) merupakan kunci utama dalam menggerakkan akselarasi pembangunan sebuah daerah maupun dalam skala nasional. Upaya penggalian keunggulan dan potensi strategis sebuah daerah akan ditentukan oleh taraf kualitas sumberdaya manusia didaerah tersebut. Sehingga, upaya peningkatan kualitas sumberdaya manusia menjadi kemestian dalam memacu perkembangan wilayah kearah yang lebih maju, modern dan sejahtera. Pendidikan menjadi vital ketika tema kemajuan menjadi topik pembahasannya. Pendidikan diharapkan akan melahirkan tenaga-tenaga terampil yang menguasai ilmu pengetahuan dan teknologi terapan terkait dengan potensi keunggulan yang dimiliki oleh sebuah daerah. <br />
<br />
“Tanah Bima” ( merujuk pada naluri kesukuan terdiri dari 3 daerah otonom yaitu Kabupaten Bima, Kota Bima dan Kabupaten Dompu ), memiliki potensi unggulan dibidang pertanian, peternakan, budidaya perairan, penangkapan ikan, kehutanan, pertambangan, dan kepariwisataan. Merujuk pada potensi tersebut, masih belum tergarap dengan optimal dikarenakan masih minimnya kualitas sumberdaya manusia yang berkiprah dibidang tersebut. Alhasil, pengelolaan potensi-potensi tersebut masih belum memberikan konstribusi yang maksimal bagi sumber pendapatan di masing-masing daerah tersebut. <br />
<br />
<span class="fullpost">
Keberadaan lembaga pendidikan tinggi di Tanah Bima meskipun secara kuantitas relatif banyak untuk ukuran sebuah daerah, namun belum ada satupun yang bergerak pada disiplin keilmuan berbasis potensi lokal daerah seperti yang disebutkan diatas. Sebuah realitas yang kontraproduktif jika kita ingin berharap untuk mengoptimalkan potensi wilayah. Kaum muda Bima harus merantau jauh ke daerah lain untuk belajar disiplin keilmuan yang terkait dengan potensi daerahnya. Sebuah usaha yang memerlukan kegigihan tersendiri. Kehadiran lembaga pendidikan tinggi yang berbasis potensi lokal sudah lama menjadi impian masyarakat Bima. Berbagai upaya dari pemerintah daerah telah dilakukan untuk menghadirkan lembaga pendidikan tinggi negeri di Tanah Bima. Ide awal dicetus oleh Almarhum Nur Latif, Walikota Bima saat itu, namun tidak dapat dituntaskan karena sang Walikota dijemput Sang Khalik. <br />
<br />
Letak geografis Tanah Bima yang sangat strategis sebagai penghubung antara wilayah Indonesia barat dan timur menjadikan daerah ini memiliki posisi yang vital untuk mendukung upaya pemerataan pembangunan nasional. Dalam Master Plan Percepatan dan Perluasan Pembangunan Ekonomi Indonesia (MP3EI) Tahun 2011-2025, Propinsi NTB dikukuhkan sebagai “Pintu Gerbang Pariwisata dan Pendukung Ketahanan Pangan Nasional” merupakan tantangan yang harus dijawab dengan kesungguhan. Oleh karenanya, kehadiran lembaga pendidikan tinggi dengan disiplin keilmuan berbasis potensi wilayah menjadi wadah akselarator bagi upaya optimalisasi pemanfaatan sumberdaya alam yang dimiliki. <br />
<br />
Pemeritah Kabupaten Bima bekerjasama dengan Universitas Mataram telah melakukan kajian dan usaha yang lebih maju dengan menginisiasi pendirian Pendidikan Vokasi Kejuruan setingkat Diploma 3 dibawah pengelolaan Universitas Mataram untuk Kampus di Bima, lokasi kampus tepatnya di Sondosia Kecamatan Bolo Kabupaten Bima. Dalam hal ini, Pemeritah Kabupaten Bima telah menyediakan lahan seluas lebih kurang 3 Ha dan direncanakan akan diperluas sampai 10 Ha. Saat ini, Pemkab Bima juga telah menyediakan ruang perkuliahan sebanyak 9 ruangan dan akan terus dilengkapi dengan berbagai sarana dan prasarana pendukung lainnya. Proses perkuliahan akan dimulai pada Tahun Ajaran baru 2014/2015 ini dengan 3 program studi awal dari 6 yang telah diusulkan yaitu : D3 Produksi Ternak dan kesehatan Hewan, D3 Budidaya Perairan dan D3 Agroindustri. <br />
<br />
Berdasarkan studi kelayakan (feasibility study) bahwa sektor unggulan primadona dan dapat memberikan sumbangan cukup besar bagi perekonomian daerah NTB berdasarkan Produk Domestik Regional Bruto (PDRB) adalah sektor pertambangan, pariwisata, pertanian, peternakan, perikanan dan kelautan. Pengembangan sektor unggulan berdampak positif bagi peluang kesempatan kerja bagi masyarakat melalui “employment multiplier effect” sehingga dalam waktu yang relatif tidak lama diperkirakan indistri garmen, tekstil, mesin, dan produk-produk kimia lainnya akan tumbuh dengan pesat. Terkait dengan perkembangan inilah maka sangat diperlukan kehadiran lembaga pendidikan vokasi yang akan menghasilkan tenaga tenaga terampil sesuai dengan sektor unggulan tersebut. <br />
<br />
Data statistik Dikpora Propinsi NTB menunjukkan bahwa jumlah siswa lulusan pendidikan menengah (SMA/MA/SMK) tahun 2012/2013 tercatat 61.546 orang, sedangkan daya tampung perguruan tinggi negeri/swasta hanya 35 % dari lulusan pendidikan menengah. Inilah tantangan sekaligus peluang bagi pendirian pendidikan vokasi dalam upaya penyiapan sumberdaya manusia terampil, berkualitas dan menguasai Iptek di daerah ini. Lebih lanjut, gambaran kenyataan bahwa penduduk yang bekerja menurut tingkat pendidikan menunjukan ketidakseimbangan antara lulusan perguruan tinggi (S1) dengan lulusan pendidikan diploma. Terlihat bahwa setiap tahunnya lulusan pendidikan S1 lebih banyak dibanding lulusan diploma. Rasio lulusan S1:D3 sebesar 3:1. Menurut Suhendro (1996), rasio ideal bagi lulusan S1 dengan D3 adalah 1:1. Sehingga, kehadiran pendidikan vokasi diploma ini menjadi penyeimbang bagi kesenjangan rasio lulusan S1 dengan D3. <br />
<br />
<b>Cikal Bakal Politeknik Negeri Bima </b><br />
<br />
Pendidikan Vokasi Universitas Mataram Kampus Bima ini, dalam jangka panjangnya, direncanakan akan bermetamorfosis menjadi Kampus Politeknik Negeri Bima (PNB) dan menjadi Kampus Negeri pertama di Tanah Bima. Dengan demikian, akan menjawab kerinduan panjang masyarakat Tanah Bima untuk kehadiran kampus negeri di negeri Dana Mbojo. Sehingga, kehadiran program pendidikan vokasi Universitas Mataram Kampus Bima ini semestinya mendapat dukungan dan partisipasi semua pihak di Tanah Bima guna peningkatan kualitas sumberdaya manusia yang akan terlibat dalam mengelola sumber daya alam dan potensi daerah yang besar tersebut sesuai dengan kebutuhan pembangunan daerah. <br />
<br />
Kedepannya, ruang lingkup cakupan pendidikan vokasi Universitas Mataram Kampus Bima ini akan menjadi wadah pengembangan sumberdaya manusia tidak hanya didaerah Tanah Bima namun dapat diperluas sebagai pusat pendidikan vokasi ternama bagi wilayah Indonesia timur. Masyarakat Propinsi NTT terutama Pulau Flores dan Sumba akan meliriknya mengingat akses yang lebih mudah secara geografis dengan Bima. <br />
<br />
Rencana pembentukan Propinsi Pulau Sumbawa (PPS) jika terlaksana dalam waktu dekat juga akan menjadikan program vokasi ini sebagai cikal bakal pendirian kampus negeri di Propinsi baru ini, layaknya Universitas Mataram saat ini bagi Propinsi NTB. <br />
<br />
Harapannya, program vokasi Universitas Mataram Kampus Bima ini dapat menjadi katalisator percepatan perkembangan daerah menuju masyarakat yang maju, modern dan sejahtera. Selamat Datang Kampus Negeri Di Tanah Bima. Bagaimana pendapat anda ? <br />
<br />
<br />
</span><div class="blogger-post-footer">MEMUSNAHKAN TANDA TANYA ANDA. THANKS BRO !</div>Thailand aik aikhttp://www.blogger.com/profile/10964108109700651247noreply@blogger.com0tag:blogger.com,1999:blog-2030866544649181977.post-10774378515486559052013-06-11T14:42:00.001+07:002013-06-11T14:45:13.658+07:00Memahami Dunia Sebagai Suaka<div style="text-align: center;">
<a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEhbxuCuaQznbXjHQ7RfZ3gEqsQPPL5tLKvtQR2EatnujL6B9HUy7MvRNyJeBUoVZjD5z5gTPoYRZ0C4N1tdxh2yysZAdmeLcWsQk2xSFUWKDjGrY8Vf9K4Fb65dcy8m1pvXXuC721weYqY/s1600/IMG_8424.JPG" imageanchor="1"><img border="0" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEhbxuCuaQznbXjHQ7RfZ3gEqsQPPL5tLKvtQR2EatnujL6B9HUy7MvRNyJeBUoVZjD5z5gTPoYRZ0C4N1tdxh2yysZAdmeLcWsQk2xSFUWKDjGrY8Vf9K4Fb65dcy8m1pvXXuC721weYqY/s320/IMG_8424.JPG" /></a> </div>
<br />
Oleh : BRIGITTA ISWORO LAKSMI. (Sumber : kompas.com)<br />
<br />
Observasi kecil. Kita berjalan mengamati sepanjang lantai di dinding pinggir sebuah pesta perkawinan sesaat setelah acara makan prasmanan berlangsung. Tak pelak, kita akan menemukan bergunung-gunung nasi dengan beragam lauk-pauk teronggok di piring-piring yang (juga) teronggok di lantai. Miris.<br />
<br />
Mengonsumsi makanan secara bebas telah menjadi upacara pemenuhan nafsu mengonsumsi yang dipicu dari indra penglihatan dan penciuman. Tamu berdesakan, berlomba mengambil makanan. Sebanyak-banyaknya. Jika makanan yang diambil dimakan habis, mungkin petani dan tukang masak akan tersenyum puas. Lain cerita jika makanan itu dibuang dan bakal menjadi sampah.<br />
<br />
Kebanyakan dari kita tidak mampu melihat keterkaitan antara sumber daya alam dan berbagai benda yang kita konsumsi, termasuk makanan. Keterpecahan dalam melihat realitas lingkungan dan ekosistem di balik barang konsumsi tidak berdiri sendiri.<br />
<br />
Fritjof Capra dalam The Turning Point secara gamblang menguraikan bagaimana pemikiran Cartesian (Descartes) telah mendorong cara pandang yang mekanistik, yang mengotak-kotakkan realitas dalam kehidupan kita. Integritas dan keseimbangan antara organisme dan lingkungan pun menghilang.<br />
<br />
Bersamaan dengan berakhirnya Perang Dunia II yang memiskinkan negara-negara kuat dunia, paradigma pertumbuhan ekonomi dipandang tepat sebagai jalan keluar. Teknologi menjadi sarana meningkatkan produktivitas. Sumber daya alam dibongkar, berbagai benda konsumsi diciptakan menggunakan teknologi. Sementara proses ekologis dan keberlanjutan lingkungan pun hancur.<br />
<span class="fullpost"><br /></span>
<span class="fullpost"><b>Keterkaitan </b></span><br />
<span class="fullpost"><br /></span>
<span class="fullpost">Ketika ide Cartesian mengotak-kotakkan berbagai hal, sebenarnya semua sistem justru dalam keterkaitan satu dengan yang lain. Thomas M Kostigen (You Are Here, 2008) menuturkan hal itu setelah berjalan memutari bola dunia untuk mengalami fakta keterkaitan antarsistem dan antarmakhluk.</span><br />
<span class="fullpost"><br /></span>
<span class="fullpost">Dia melacak jejak kerusakan akibat praktik pembangunan yang menekankan pertumbuhan ekonomi dengan indikator produk domestik bruto. Saat kerusakan berlangsung masif, respons terhadap kerusakan demikian tidak memadai. Perusakan jauh lebih cepat dibandingkan dengan pemulihan. Penggundulan hutan menggunakan mesin berat berhektar-hektar sehari. Upaya memulihkan hutan membutuhkan puluhan tahun. Ekosistem dan keanekaragaman hayati tidak mungkin dikembalikan pada kondisi awalnya. </span><br />
<span class="fullpost"><br /></span>
<span class="fullpost">Kostigen berjalan dari Jerusalem (Israel), menjelajah ke Mumbai (India), Borneo (Kalimantan, Asia Tenggara), Kota Linfen (China), Shishmaref Village (Alaska), rimba Amazon (Amerika Latin), tempat pembuangan sampah Fresh Kills Landfill (New York, AS), Samudra Pasifik, Great Lakes, Duluth (Minnesota, AS), dan pulang ke kotanya Santa Monica (California, AS). Dia berpikir. </span><br />
<span class="fullpost"><br /></span>
<span class="fullpost">Menjalani keseharian, Kostigen menunjukkan, penghematan energi listrik dapat dilakukan dengan mengubah jam. Dengan memundurkan waktu satu jam, orang akan berada di luar rumah satu jam lebih lama. Dia tidak menyalakan lampu rumah sehingga konsumsi energi—yang sebagian besar masih digerakkan batubara—berkurang. </span><br />
<span class="fullpost"><br /></span>
<span class="fullpost">Saat menyaksikan penggundulan rimba Amazon, Kostigen tersadar akan cara-cara manusia mengonsumsi kertas. Mungkin hanya dalam hitungan menit, kertas kita remas dan kita buang. Sebagai catatan, penggunaan kertas per kapita di AS mencapai 1.400 lembar per minggu. Hal itu berarti sekitar 73.000 lembar setahun, ekuivalen hampir sembilan batang pohon per orang (!). Bisa kita hitung, cara kita mengonsumsi kertas. </span><br />
<span class="fullpost"><br /></span>
<span class="fullpost"><b>" Inter-being "</b> </span><br />
<span class="fullpost"><br /></span>
<span class="fullpost">Barang konsumsi, termasuk makanan, tersedia setelah melalui rantai proses produksi yang panjang dan kompleks. Menurut Sudrijanta SJ, setiap benda adalah inter-being. Setiap benda merepresentasikan keberadaan (benda) lainnya.
</span><br />
<span class="fullpost"><br /></span>
<span class="fullpost">Saat kita menyia-nyiakan makanan, itu sama artinya dengan menyia-nyiakan segala sumber daya alam yang turut andil dalam proses produksi makanan itu. Juga sama artinya dengan menyia-nyiakan kerja manusia yang ambil bagian dalam rantai produksi, serta memuat ketidakadilan terhadap makhluk lain yang tidak berkesempatan mendapat makanan. </span><br />
<span class="fullpost"><br /></span>
<span class="fullpost">Menurut catatan Program Lingkungan Perserikatan Bangsa-Bangsa (UNEP), untuk memproduksi 1 liter susu dibutuhkan 1.000 liter air, dan sekitar 16.000 liter air (sekitar 100 tong minyak tanah) untuk membesarkan sapi sebelum dagingnya tersaji dalam satu buah hamburger. Selain itu, transportasi dalam proses produksi sapi, daging, dan roti mengemisikan gas rumah kaca (GRK) penyebab pemanasan global yang mengakibatkan anomali cuaca dan perubahan iklim. </span><br />
<span class="fullpost"><br /></span>
<span class="fullpost">Fakta lain, produksi makanan secara global menguasai 25 persen lahan yang bisa didiami manusia, membutuhkan 70 persen air bersih, 80 persen deforestasi, dan 30 persen emisi GRK. Proses produksi makanan global menjadi pendorong utama perubahan fungsi lahan dan hilangnya keanekaragaman hayati. </span><br />
<span class="fullpost"><br /></span>
<span class="fullpost">Menurut Organisasi Pangan dan Pertanian PBB (FAO), setiap tahun 1,3 miliar ton makanan terbuang sia-sia. Di sisi lain, setiap hari satu dari tujuh orang di dunia tidur dengan perut lapar, dan lebih dari 20.000 anak-anak balita meninggal akibat kelaparan. </span><br />
<span class="fullpost"><br /></span>
<span class="fullpost">Tahun ini, UNEP menetapkan tema ”Think.Eat.Save World Environment” sebagai peringatan Hari Lingkungan Sedunia pada hari ini. Pertanyaannya, masihkah kita bertahan dengan gaya hidup tak seimbang dan tak adil itu, yang menghancurkan lingkungan hidup? Kita ditantang mengubah gaya kita mengonsumsi makanan. Kita digugah untuk membuat keputusan tepat guna mengurangi jejak karbon. Dunia, lebih dari sekadar korban eksploitasi, adalah suaka kemanusiaan dan kehidupan seperti diungkapkan filosof lingkungan, Henryk Skolimowski.</span><br />
<span class="fullpost"><br /></span><div class="blogger-post-footer">MEMUSNAHKAN TANDA TANYA ANDA. THANKS BRO !</div>Thailand aik aikhttp://www.blogger.com/profile/10964108109700651247noreply@blogger.com0tag:blogger.com,1999:blog-2030866544649181977.post-7386953172670983122012-12-29T12:29:00.002+07:002015-04-18T12:23:36.115+07:00MERENCANAKAN MODAL USAHA BUDIDAYA RUMPUT LAUT<div class="" style="clear: both; text-align: left;">
<b style="text-align: justify;">Muhammad Fahri, MP*)</b></div>
<div style="text-align: justify;">
Perkembangan kesadaran masyarakat terhadap keutamaan derajat kesehatan makin meningkat seiring dengan meningkatnya taraf hidup dan pendapatannya. Keadaan ini mendorong kebiasaan masyarakat untuk semakin selektif dalam mengkonsumsi produk-produk yang memberikan dampak pada kondisi kesehatan. Peralihan pola konsumsi semakin mengarah pada meningkatnya permintaan produk yang memiliki nilai gizi (nutrisi) tinggi dan harga terjangkau serta dihasilkan dari lingkungan yang ramah lingkungan. </div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
<b>Ide Bisnis dan Produk </b></div>
<div style="text-align: justify;">
Produk pangan yang dihasilkan dari lingkungan laut (sea food basic) kian menempati ruang penerimaan konsumen yang semakin luas. Seiring dengan manfaat dan dampak produk-produk pangan hasil laut memiliki kandungan yang mendukung bagi kesehatan yang lebih baik. Jenis hasil laut yang terus mengalami peningkatan permintaan salah satunya yaitu : rumput laut (sea grass). </div>
<span class="fullpost">
<div style="text-align: justify;">
Rumput laut memiliki banyak manfaat kegunaan dan kandungan nutrisi sehingga menjadi komoditas penting bagi berbagai produk olahan. Kandungan rumput laut umumnya adalah mineral esensial (besi, iodin, aluminum, mangan, calsium, nitrogen dapat larut, phosphor, sulfur, chlor. silicon, rubidium, strontium, barium, titanium, cobalt, boron, copper, kalium, dan unsur-unsur lainnya), asam nukleat, asam amino, protein, mineral, trace elements, tepung, gula dan vitamin A, D, C, D E, dan K. </div>
<div style="text-align: justify;">
Manfaat rumput telah digunakan diberbagai industry, yaitu Sebagai Bahan obat-obatan (anticoagulant, antibiotics, antihehmethes, antihypertensive agent, pengurang cholesterol, dilatory agent, dan insektisida. Karena kandungan gizinya yang tinggi, maka mampu meningkatkan sistem kerja hormonal, limfatik, dan juga saraf. Meningkatkan fungsi pertahanan tubuh, memperbaiki sistem kerja jantung dan peredaran darah, serta sistem pencernaan. Sebagai Obat tradisional untuk batuk, asma, bronkhitis, TBC, cacingan, sakit perut, demam, rematik, bahkan dipercaya dapat meningkatkan daya seksual. Kandungan yodiumnya diperlukan tubuh untuk mencegah penyakit gondok. Kandungan klorofil rumput laut bersifat antikarsinogenik, kandungan serat, selenium dan seng yang tinggi pada rumput laut dapat mereduksi estrogen. Disinyalir level estrogen yang terlalu tinggi dapat mendorong timbulnya kanker, sehingga konsumsi rumput laut memperkecil resiko kanker bahkan mengobatinya. </div>
<div style="text-align: justify;">
Kandungan vitamin C dan antioksidan rumut laut dapat melawan radikal bebas. Kaya akan kandungan serat yang dapat mencegah kanker usus besar, melancarkan pencernaan, meningkatkan kadar air dalam feses. Membantu metabolisme lemak, sehingga menurunkan kadar kolesterol darah dan gula darah. Rumput laut juga membantu pengobatan tukak lambung, radang usus besar, susah buang air besar dan gangguan pencernaan lainnya. Dapat membantu penyerapan kelebihan garam pada tubuh. Baik untuk diet, mengurangi resiko obesitas, serat pada rumput laut bersifat mengenyangkan dan kandungan karbohidratnya sukar dicerna sehingga akan menyebabkan rasa kenyang lebih lama. Anti oksidan yang berperan dalam penyembuhan dan peremajaan kulit. Vitamin A (beta carotene) dan vitamin C nya bekerja dalam memelihara kolagen, sedangkan kandungan protein dari rumput laut penting untuk membentuk jaringan baru pada kulit. Sehingga Mencegah penuaan dini. Mengandung kalsium sepuluh kali lebih tinggi dibandingkan dengan susu, sehingga rumput laut sangat tepat dikonsumsi untuk mengurangi dan mencegah gejala osteoporosis. </div>
<div style="text-align: justify;">
<a name='more'></a><br /></div>
<div style="text-align: justify;">
Indonesia memiliki potensi areal budidaya rumput laut seluas 1,2 juta Ha, dengan potensi produksi rumput laut kering rata-rata 16 ton per Ha. Apabila seluruh lahan bisa dimanfaatkan maka akan dapat dicapai 17.774.400 ton per tahun dengan harga Rp. 4,5 juta per ton. Dengan kisaran jumlah produksi dan tingkat harga tersebut, akan diperoleh nilai Rp.79,984 triliun. Namun dari potensi area yang sangat luas ini, Indonesia saat ini hanya mampu mengusahakan 3% dari potensi lahan yang ada (BEI News Maret-April, 2005). </div>
<div style="text-align: justify;">
Berdasar data yang dikemukakan di atas, masih terbuka lebar peluang usaha budidaya dan investasi pemrosesan rumput laut. Peluang usaha itu semakin besar sejalan dengan perkembangan permintaan rumput laut dunia yang meningkat rata-rata 5-10% per tahun. Dewasa ini permintaan rumput laut yang ditujukan kepada eksportir Indonesia diindikasikan sudah mencapai 48.000 ton rumput laut kering per tahun (World Bank Report, 2006). </div>
<div style="text-align: justify;">
Potensi usaha budidaya rumput laut ini akan terus berkembang sejalan makin luasnya pemanfaatan rumput laut sebagai bahan makanan, polimer maupun bahan dasar kertas dan industri lainnya. Untuk memanfaatkan peluang pasar, maka usaha-usaha di bidang rumput laut yang sangat potensial untuk dikembangkan adalah: </div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
1. Pembukaan usaha budidaya rumput laut, atau pengembangan perluasan usaha dengan perluasan areal budidaya. </div>
<div style="text-align: justify;">
2. Pengolahan pasca panen untuk memperoleh nilai tambah </div>
<div style="text-align: justify;">
3. Industri pemroses rumput laut untuk produk makanan siap saji, Semi Refined Carrageenan (SRC) dan Alkali Treated Carrageenan (ATC). </div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
Hampir seluruh daerah di Indanesia memiliki lahan yang cocok untuk budidaya rumput laut, antara lain di Sulawesi, Bali, NTB dan NTT, serta Papua. Di NTB rumput laut banyak dibudidayakan di Pulau Bali, Pulau Sumbawa dan Pulau Lombok. Mengingat besarnya permintaan pasar terhadap bahan baku rumput laut tersebut dibidang industri baik makanan, bahan baku kosmetika, dunia medis, dan industri maka diperlukan usaha penyediaan bahan baku yang memiliki kualifikasi yang dapat diterima. Dengan produksi yang tinggi maka ketersediaan bahan baku menjadi tersedia dan menentukan keberlangsungan usaha lanjutan bidang ini. </div>
<div style="text-align: justify;">
Berdasarkan peluang usaha yang dianalisa maka prospek usaha yang menguntungkan dibidang rumput laut ini maka dipilih usaha budidaya dan pemrosesan rumput laut bahan baku industri dalam skala yang lebih besar. Bentuk produk yang akan diproduksi adalah rumput laut jenis Euchema cottoni dengan pola usaha budidaya metode tali lepas dasar.</div>
<div class="separator" style="clear: both; text-align: center;">
<a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEhLwBK9Mb7iQXQGIogh61rKL6c94_yMvYqceLOFdbkYihFks5AGll1dYJ_FDDKM-Cs_uVKCs2YcY1TQMlaxFqpH2K_TVtU5UhxshftZpvszuCEpjo-NO53zZHHDOzJbjaohhB4XFWAo40o/s1600/rl+tali+lepas.jpg" imageanchor="1" style="margin-left: 1em; margin-right: 1em;"><img border="0" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEhLwBK9Mb7iQXQGIogh61rKL6c94_yMvYqceLOFdbkYihFks5AGll1dYJ_FDDKM-Cs_uVKCs2YcY1TQMlaxFqpH2K_TVtU5UhxshftZpvszuCEpjo-NO53zZHHDOzJbjaohhB4XFWAo40o/s1600/rl+tali+lepas.jpg" /></a></div>
<div class="MsoListParagraph" style="margin-left: 20.25pt; text-align: center;">
<o:p> </o:p>Gambar 1. Rumput laut jenis <i>Euchema
cottoni</i></div>
<div class="MsoListParagraph" style="mso-line-height-alt: 5.0pt; text-align: justify;">
<b>Investasi </b></div>
<div style="text-align: justify;">
Investasi yang dibutuhkan untuk usaha budidaya dan pemrosesan rumput laut sebesar Rp. 200.000.000.- (dua ratus juta rupiah). Untuk mendapatkan pendanaan (investasi) yang dibutuhkan tersebut dapat dilakukan penawaran pinjaman modal dari pihak pemodal (investor) melalu pengajuan proposal usaha. Calon investor diharapkan dari lembaga perbankan dengan kredit usaha yang memiliki bunga rendah. Sehingga sangat memudahkan dalam upaya pengembalian modal dan memberikan keuntungan yang lebih baik. </div>
<div style="text-align: justify;">
Kebutuhan dana investasi budidaya dan pemrosesan rumput laut sebagai bahan industri sebagian besar diperuntukkan sebagai budidaya dan biaya penanganan (penampungan) yang melibatkan banyak tenaga kerja. Produksi rumput laut yang tidak mengenal musim (produksi terus menerus) membutuhkan ketersediaan dana yang besar. Dengan demikian kebutuhan dana yang besar diharapkan dapat meningkatkan produksi dan memberikan keuntungan yang tinggi pula. Untuk keperluan pendanaan usaha budidaya, diperoleh informasi bahwa pihak perbankan siap mendanai usaha budidaya rumput laut sesuai dengan skim kredit yang ada dan memenuhi kelayakan perbankan. Berbagai bank memiliki skim kredit untuk berbagai usaha kecil dan menengah. Skim kredit ini ditujukan untuk pemenuhan dana modal kerja maupun investasi. </div>
<div style="text-align: justify;">
Pembiayaan usaha budidaya dapat berasal dari modal sendiri maupun dari pinjaman atau kredit. Pembiayaan yang berasal dari pinjaman bank berupa kredit investasi dan atau kredit modal kerja. Pembiayaan ini diperlukan untuk berbagai tujuan antara lain untuk : </div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div>
<div style="text-align: justify;">
1. Pembelian alat-alat dan infrastruktur budidaya, pembelian bibit dan pembayaran tenaga kerja. </div>
<div style="text-align: justify;">
2. Pembelian mesin untuk pengeringan, sortir dan pengepakan rumput laut. </div>
<div style="text-align: justify;">
3. Pendirian usaha pengolahan rumput laut untuk kebutuhan industri. </div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
Modal usaha yang diperoleh pembudidaya dipergunakan untuk membeli bahan-bahan infrastruktur budidaya (tali, pasak, pelampung, jangkar pemberat), bibit rumput laut dan pembayaran biaya operasional. Pengembalian dilakukan dengan angsuran selama periode budidaya (6 bulan 4 kali siklus panen). Berdasarkan hasil survey pembudidaya membutuhkan tambahan pagu pinjaman guna membeli/membuat para-para jemur rumput laut. Penggunaan para-para saat penjemuran rumput laut memberikan hasil rumput laut kering yang lebih baik mutunya jika bandingkan dengan cara penjemuran asalan (tanpa alas). Dengan para-para rumput laut tidak tercampur dengan kotoran waktu penjemuran dan hasil kering lebih merata. </div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<b><div style="text-align: justify;">
<b>Sumber Pendanaan </b></div>
</b><div style="text-align: justify;">
Dari kebutuhan modal yang diperlukan untuk usaha pengolahan rumput ini yaitu sebesar Rp. 200.000.000. (dua ratus juta rupiah) diperlukan analisa untuk menetapkan sumber pendanaan yang akan dipilih. Analisa Return On Equity ( ROE ) untuk sumber pendanaan dilakukan untuk memilih alternatif pendanaan yang paling menguntungkan dari sisi usaha yang dijalankan. </div>
<div style="text-align: justify;">
Sebagai sebuah kasus, sumber pendanaan akan dipilih dari tiga alternatif yaitu 100 % modal sendiri atau 75% modal sendiri atau 50% modal sendiri. Asumsi keuntungan yang diperoleh sebesar 30% dari nilai investasi. Bunga pinjaman sebesar 20% pertahun. Pajak Penghasilan 15% dari keuntungan sampai dengan 10 juta, 25% dari keuntungan diatas 10 juta. Analisa ROE untuk usaha budidaya metode tali lepas dasar dan pemrosesan rumput laut pasca panen berupa produk rumput laut kering bersih jenis Euchema cottoni sebagai bahan baku industri adalah sebagai berikut : </div>
<div class="MsoListParagraph">
<br /></div>
<div class="MsoListParagraph" style="mso-line-height-alt: 5.0pt; text-align: justify;">
<b>Alternatif
1. <o:p></o:p></b></div>
<div class="MsoListParagraph" style="margin-left: .5in; mso-line-height-alt: 5.0pt; mso-list: l2 level1 lfo3; tab-stops: list .5in; text-align: justify; text-indent: -.25in;">
<!--[if !supportLists]--><span style="font-family: Symbol; mso-bidi-font-family: Symbol; mso-fareast-font-family: Symbol;">-<span style="font-family: 'Times New Roman'; font-size: 7pt;">
</span></span><!--[endif]-->Modal sendiri Rp.
200.000.000. </div>
<div class="MsoListParagraph" style="margin-left: .5in; mso-line-height-alt: 5.0pt; mso-list: l3 level1 lfo4; tab-stops: list .5in; text-align: justify; text-indent: -.25in;">
<!--[if !supportLists]--><span style="font-family: Symbol; mso-bidi-font-family: Symbol; mso-fareast-font-family: Symbol;">-<span style="font-family: 'Times New Roman'; font-size: 7pt;">
</span></span><!--[endif]-->Laba sebelum bunga dan pajak (30%) Rp. 60.000.000.</div>
<div class="MsoListParagraph" style="margin-left: .5in; mso-line-height-alt: 5.0pt; mso-list: l3 level1 lfo4; tab-stops: list .5in; text-align: justify; text-indent: -.25in;">
<!--[if !supportLists]--><span style="font-family: Symbol; mso-bidi-font-family: Symbol; mso-fareast-font-family: Symbol;">-<span style="font-family: 'Times New Roman'; font-size: 7pt;">
</span></span><!--[endif]-->Bunga Pinjaman Rp. 0.-</div>
<div class="MsoListParagraph" style="margin-left: .5in; mso-line-height-alt: 5.0pt; mso-list: l3 level1 lfo4; tab-stops: list .5in; text-align: justify; text-indent: -.25in;">
<!--[if !supportLists]--><span style="font-family: Symbol; mso-bidi-font-family: Symbol; mso-fareast-font-family: Symbol;">-<span style="font-family: 'Times New Roman'; font-size: 7pt;">
</span></span><!--[endif]-->Pajak Penghasilan : 15% X 10.000.000 Rp. 1.500.000</div>
<div class="MsoListParagraph" style="mso-line-height-alt: 5.0pt; text-align: justify;">
25% X 50.000.000 Rp. 12.500.000</div>
<div class="MsoListParagraph" style="margin-left: .5in; mso-line-height-alt: 5.0pt; mso-list: l3 level1 lfo4; tab-stops: list .5in; text-align: justify; text-indent: -.25in;">
<!--[if !supportLists]--><span style="font-family: Symbol; mso-bidi-font-family: Symbol; mso-fareast-font-family: Symbol;">-<span style="font-family: 'Times New Roman'; font-size: 7pt;">
</span></span><!--[endif]-->Laba Bersih Rp. 60.000.000 – Rp. 14.000.000 Rp.
46.000.000</div>
<div class="MsoListParagraph" style="mso-line-height-alt: 5.0pt; text-align: justify;">
<br /></div>
<div class="MsoListParagraph" style="mso-line-height-alt: 5.0pt; text-align: justify;">
<b>ROE</b> =
<u>46.000.000 </u> X 100% = <b>23 %<o:p></o:p></b></div>
<div class="MsoListParagraph" style="mso-line-height-alt: 5.0pt; text-align: justify;">
200.000.000</div>
<div class="MsoListParagraph" style="mso-line-height-alt: 5.0pt; text-align: justify;">
<br /></div>
<div class="MsoListParagraph" style="mso-line-height-alt: 5.0pt; text-align: justify;">
<b>Alternatif
2.</b> </div>
<div class="MsoListParagraph" style="margin-left: .5in; mso-line-height-alt: 5.0pt; mso-list: l2 level1 lfo3; tab-stops: list .5in; text-align: justify; text-indent: -.25in;">
<!--[if !supportLists]--><span style="font-family: Symbol; mso-bidi-font-family: Symbol; mso-fareast-font-family: Symbol;">-<span style="font-family: 'Times New Roman'; font-size: 7pt;">
</span></span><!--[endif]-->Modal sendiri 75% X Rp. 200.000.000. Rp. 150.000.000</div>
<div class="MsoListParagraph" style="margin-left: .5in; mso-line-height-alt: 5.0pt; mso-list: l2 level1 lfo3; tab-stops: list .5in; text-align: justify; text-indent: -.25in;">
<!--[if !supportLists]--><span style="font-family: Symbol; mso-bidi-font-family: Symbol; mso-fareast-font-family: Symbol;">-<span style="font-family: 'Times New Roman'; font-size: 7pt;">
</span></span><!--[endif]-->Modal Pinjaman 25% X Rp.200.000.000. Rp. 50.000.000</div>
<div class="MsoListParagraph" style="mso-line-height-alt: 5.0pt; text-align: justify;">
<br /></div>
<div class="MsoListParagraph" style="margin-left: .5in; mso-line-height-alt: 5.0pt; mso-list: l4 level1 lfo5; tab-stops: list .5in; text-align: justify; text-indent: -.25in;">
<!--[if !supportLists]--><span style="font-family: Symbol; mso-bidi-font-family: Symbol; mso-fareast-font-family: Symbol;">-<span style="font-family: 'Times New Roman'; font-size: 7pt;">
</span></span><!--[endif]-->Laba sebelum bunga dan pajak (30%) Rp. 60.000.000</div>
<div class="MsoListParagraph" style="margin-left: .5in; mso-line-height-alt: 5.0pt; mso-list: l4 level1 lfo5; tab-stops: list .5in; text-align: justify; text-indent: -.25in;">
<!--[if !supportLists]--><span style="font-family: Symbol; mso-bidi-font-family: Symbol; mso-fareast-font-family: Symbol;">-<span style="font-family: 'Times New Roman'; font-size: 7pt;">
</span></span><!--[endif]-->Bunga Pinjaman 20% X Rp.50.000.000. Rp. 10.000.000</div>
<div class="MsoListParagraph" style="margin-left: .5in; mso-line-height-alt: 5.0pt; mso-list: l4 level1 lfo5; tab-stops: list .5in; text-align: justify; text-indent: -.25in;">
<!--[if !supportLists]--><span style="font-family: Symbol; mso-bidi-font-family: Symbol; mso-fareast-font-family: Symbol;">-<span style="font-family: 'Times New Roman'; font-size: 7pt;">
</span></span><!--[endif]-->Laba sebelum Pajak Rp. 50.000.000</div>
<div class="MsoListParagraph" style="margin-left: .5in; mso-line-height-alt: 5.0pt; mso-list: l4 level1 lfo5; tab-stops: list .5in; text-align: justify; text-indent: -.25in;">
<!--[if !supportLists]--><span style="font-family: Symbol; mso-bidi-font-family: Symbol; mso-fareast-font-family: Symbol;">-<span style="font-family: 'Times New Roman'; font-size: 7pt;">
</span></span><!--[endif]-->Pajak Penghasilan : 15% X 10.000.000 Rp. 1.500.000</div>
<div class="MsoListParagraph" style="mso-line-height-alt: 5.0pt; text-align: justify;">
25% X 40.000.000 Rp. 10.000.000</div>
<div class="MsoListParagraph" style="margin-left: .5in; mso-line-height-alt: 5.0pt; mso-list: l4 level1 lfo5; tab-stops: list .5in; text-align: justify; text-indent: -.25in;">
<!--[if !supportLists]--><span style="font-family: Symbol; mso-bidi-font-family: Symbol; mso-fareast-font-family: Symbol;">-<span style="font-family: 'Times New Roman'; font-size: 7pt;">
</span></span><!--[endif]-->Laba Bersih Rp. 50.000.000 – Rp. 11.500.000 Rp.
38.500.000</div>
<div class="MsoListParagraph" style="mso-line-height-alt: 5.0pt; text-align: justify;">
<br /></div>
<div class="MsoListParagraph" style="mso-line-height-alt: 5.0pt; text-align: justify;">
<b>ROE</b> =
<u>38. 500.000 </u> X 100% = <b>25.6 %<o:p></o:p></b></div>
<div class="MsoListParagraph" style="mso-line-height-alt: 5.0pt; text-align: justify;">
150.000.000</div>
<div class="MsoListParagraph" style="mso-line-height-alt: 5.0pt; text-align: justify;">
<br /></div>
<div class="MsoListParagraph" style="mso-line-height-alt: 5.0pt; text-align: justify;">
<b>Alternatif
3.</b> </div>
<div class="MsoListParagraph" style="margin-left: .5in; mso-line-height-alt: 5.0pt; mso-list: l2 level1 lfo3; tab-stops: list .5in; text-align: justify; text-indent: -.25in;">
<!--[if !supportLists]--><span style="font-family: Symbol; mso-bidi-font-family: Symbol; mso-fareast-font-family: Symbol;">-<span style="font-family: 'Times New Roman'; font-size: 7pt;">
</span></span><!--[endif]-->Modal Sendiri 50% X Rp.200.000.000. Rp. 100.000.000</div>
<div class="MsoListParagraph" style="margin-left: .5in; mso-line-height-alt: 5.0pt; mso-list: l2 level1 lfo3; tab-stops: list .5in; text-align: justify; text-indent: -.25in;">
<!--[if !supportLists]--><span style="font-family: Symbol; mso-bidi-font-family: Symbol; mso-fareast-font-family: Symbol;">-<span style="font-family: 'Times New Roman'; font-size: 7pt;">
</span></span><!--[endif]-->Modal Pinjaman 50% X Rp.200.000.000. Rp. 100.000.000</div>
<div class="MsoListParagraph" style="mso-line-height-alt: 5.0pt; text-align: justify;">
<br /></div>
<div class="MsoListParagraph" style="margin-left: .5in; mso-line-height-alt: 5.0pt; mso-list: l5 level1 lfo6; tab-stops: list .5in; text-align: justify; text-indent: -.25in;">
<!--[if !supportLists]--><span style="font-family: Symbol; mso-bidi-font-family: Symbol; mso-fareast-font-family: Symbol;">-<span style="font-family: 'Times New Roman'; font-size: 7pt;">
</span></span><!--[endif]-->Laba sebelum bunga dan pajak (30%) Rp. 60.000.000</div>
<div class="MsoListParagraph" style="margin-left: .5in; mso-line-height-alt: 5.0pt; mso-list: l5 level1 lfo6; tab-stops: list .5in; text-align: justify; text-indent: -.25in;">
<!--[if !supportLists]--><span style="font-family: Symbol; mso-bidi-font-family: Symbol; mso-fareast-font-family: Symbol;">-<span style="font-family: 'Times New Roman'; font-size: 7pt;">
</span></span><!--[endif]-->Bunga Pinjaman 20% X Rp.100.000.000. Rp. 20.000.000</div>
<div class="MsoListParagraph" style="margin-left: .5in; mso-line-height-alt: 5.0pt; mso-list: l5 level1 lfo6; tab-stops: list .5in; text-align: justify; text-indent: -.25in;">
<!--[if !supportLists]--><span style="font-family: Symbol; mso-bidi-font-family: Symbol; mso-fareast-font-family: Symbol;">-<span style="font-family: 'Times New Roman'; font-size: 7pt;">
</span></span><!--[endif]-->Laba sebelum Pajak Rp. 40.000.000</div>
<div class="MsoListParagraph" style="margin-left: .5in; mso-line-height-alt: 5.0pt; mso-list: l5 level1 lfo6; tab-stops: list .5in; text-align: justify; text-indent: -.25in;">
<!--[if !supportLists]--><span style="font-family: Symbol; mso-bidi-font-family: Symbol; mso-fareast-font-family: Symbol;">-<span style="font-family: 'Times New Roman'; font-size: 7pt;">
</span></span><!--[endif]-->Pajak Penghasilan : 15% X 10.000.000 Rp. 1.500.000</div>
<div class="MsoListParagraph" style="mso-line-height-alt: 5.0pt; text-align: justify;">
25% X 30.000.000 Rp. 7.500.000</div>
<div class="MsoListParagraph" style="margin-left: .5in; mso-line-height-alt: 5.0pt; mso-list: l5 level1 lfo6; tab-stops: list .5in; text-align: justify; text-indent: -.25in;">
<!--[if !supportLists]--><span style="font-family: Symbol; mso-bidi-font-family: Symbol; mso-fareast-font-family: Symbol;">-<span style="font-family: 'Times New Roman'; font-size: 7pt;">
</span></span><!--[endif]-->Laba Bersih Rp. 40.000.000 – Rp. 9.000.000 Rp. 31.000.000</div>
<div class="MsoListParagraph" style="mso-line-height-alt: 5.0pt; text-align: justify;">
<br /></div>
<div class="MsoListParagraph" style="mso-line-height-alt: 5.0pt; text-align: justify;">
<b>ROE</b> =
<u>31.000.000 </u> X 100% = <b>31 %<o:p></o:p></b></div>
<div class="MsoListParagraph" style="mso-line-height-alt: 5.0pt; text-align: justify;">
100.000.000</div>
<div class="MsoNormal" style="mso-line-height-alt: 5.0pt; text-align: justify;">
<br /></div>
<div class="MsoListParagraph" style="mso-line-height-alt: 5.0pt; text-align: justify;">
Dari
ketiga alternatif tersebut, terlihat bahwa alternatif ketiga memberikan laba
bersih paling sedikit (Rp.31.000.000) tetapi memberikan nilai ROE yang
tertinggi. Alternatif ketiga ini baik untuk dipilih jika sisa dana yang sebesar
Rp.100.000.000 Dapat diinvestasikan pada usaha lain sehingga menghasilkan
jumlah pendapatan yang lebih baik dari pada alternatif pertama (semua modal
sendiri). Jadi dalam menentukan komposisi pendanaan harus dipertimbangkan <i>biaya
bunga</i> dan <i>ROE</i> yang dihasilkan.</div>
<div class="MsoListParagraph" style="mso-line-height-alt: 5.0pt; text-align: justify;">
<br /></div>
<div class="MsoListParagraph" style="mso-line-height-alt: 5.0pt; text-align: justify;">
</div>
<div class="MsoListParagraph">
<b>Muhammad
Fahri</b></div>
<div class="MsoListParagraph">
SMKN
1 Bima NTB</div>
<div class="MsoListParagraph">
<i>elfahry.bimami@gmail.com<o:p></o:p></i></div>
<div class="MsoListParagraph">
<i><br /></i></div>
<br />
</span></div>
<div class="blogger-post-footer">MEMUSNAHKAN TANDA TANYA ANDA. THANKS BRO !</div>Thailand aik aikhttp://www.blogger.com/profile/10964108109700651247noreply@blogger.com0tag:blogger.com,1999:blog-2030866544649181977.post-10090509689936779752012-12-29T12:07:00.001+07:002015-04-18T12:41:36.319+07:00PERENCANAAN USAHA BUDIDAYA RUMPUT LAUT<span class="fullpost">
<div style="text-align: justify;">
Oleh ; Muhammad Fahri, MP</div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
Indonesia merupakan negara dengan bentuk kepulauan yang terbesar di dunia. Indonesia terdiri dari 13.000 pulau besar kecil dan memiliki panjang garis pantai 81.000 km. Sebagai negara kepulauan, Indonesia memiliki potensi 26 juta Ha areal perikanan laut dan pantai. Selain sebagai lahan penangkapan ikan, perairan pantai juga dimanfaatkan untuk usaha budidaya perairan (marine aquaculture). Dari areal lahan pantai seluas 26 juta Ha, hanya 680.000 Ha atau kurang dari 3% yang dimanfaatkan untuk produksi (ADB, 2006, Project Number 35183).</div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<b><div style="text-align: justify;">
<b>Menentukkan Ide Bisnis</b></div>
</b><div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
Salah satu bidang aquaculture (budidaya perairan) yang berkembang dewasa ini adalah budidaya rumput laut (seaweed culture) terutama budidaya rumput laut jenis Eucheuma Cottonii. Indonesia memiliki potensi areal budidaya rumput laut seluas 1,2 juta Ha, dengan potensi produksi rumput laut kering rata-rata 16 ton per Ha. Apabila seluruh lahan bisa dimanfaatkan maka akan dapat dicapai 17.774.400 ton per tahun dengan harga Rp.4,5 juta per ton. Dengan kisaran jumlah produksi dan tingkat harga tersebut, akan diperoleh nilai Rp.79,984 triliun. Namun dari potensi area yang sangat luas ini, Indonesia saat ini hanya mampu mengusahakan 3% dari potensi lahan yang ada (BEI News Maret-April, 2005). </div>
<div style="text-align: justify;">
<br />
</div>
<div style="text-align: justify;">
Berdasar data yang dikemukakan di atas, masih terbuka lebar peluang usaha budidaya dan investasi pemrosesan rumput laut. Peluang usaha itu semakin besar sejalan dengan perkembangan permintaan rumput laut dunia yang meningkat rata-rata 5-10% per tahun. Dewasa ini permintaan rumput laut yang ditujukan kepada eksportir Indonesi diindikasikan sudah mencapai 48.000 ton rumput laut kering per tahun(World Bank Report, 2006). </div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
Rumput laut pada waktu ini menjadi salah satu komoditas pertanian penting yang makin banyak dibudidayakan karena permintaan terhadapnya makin meningkat. Disamping karena kandungan agarnya juga ada kandungan karagenan (Carrageenan) yang penggunaannya makin meluas. Rumput laut dengan kandungan bahan untuk agar terutama didapatkan dari spesies Gracilaria dan Gelidium, sedangkan untuk kandungan karagenan banyak dibudidayakan spesies Eucheuma, ialah Eucheuma Cottoni dan Eucheuma. Sebagai karagenan, rumput laut kering diolah menjadi bentuk tepung untuk diekspor dan sebagian untuk memenuhi kebutuhan dalam negeri. Kebutuhan pasar lokal mencapai 22.000 ton per tahun (Ekon. Neraca 2 Juni 1999). </div>
<div style="text-align: justify;">
<div style="text-align: justify;">
<br />
<span class="fullpost">
</div>
<div style="text-align: justify;">
Karagenan merupakan bahan yang unik untuk berbagai industri makanan seperti kemampuan dengan konsentrasi rendah mengikat cokelat ke dalam susu cokelat. Sari karegenan juga dipergunakan untuk pembuatan “dessertgel” semacam agar untuk hidangan penutup makan. Karagenan memiliki derajat panas pencairan yang tinggi, sehingga mudah dipasarkan di daerah tropis atau di tempat yang tidak tersedia lemari pendingin (refrigerator). Agar karagenan juga banyak dipergunakan sebagai bahan penambah (additive) pada berbagai makanan Eropa. </div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
Fungsi karagenan sebagai perekat pasta gigi menyaingi penggunaan sodium carboxymethylcellulose (SCMC), karena keunggulan kualitasnya dan penampilan karagenan dalam pasta gigi. Karagenan juga sangat penting di dalam industri makanan binatang piaraan (Pet Food), penyegar udara (Air Freshener) dan dalam daging hamburger sebagai subsitusi lemak. Penggunaan karagenan rumput laut akan bertambah makin luas dan makin banyak di masa yang akan datang, sehingga permintaan terhadap produksi rumput laut ini akan terus meningkat di masa mendatang. </div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
Potensi usaha budidaya ini akan terus berkembang sejalan makin luasnya pemanfaatan rumput laut sebagai bahan makanan, polimer maupun bahan dasar kertas dan industri lainnya. Untuk memanfaatkan peluang pasar yang masih sangat terbuka ini, maka usaha-usaha di bidang rumput laut yang sangat potensial untuk dikembangkan adalah: </div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
1. Pembukaan usaha budidaya rumput laut, atau pengembangan perluasan usaha dengan perluasan areal budidaya. </div>
<div style="text-align: justify;">
2. Pengolahan paska panen untuk memperoleh nilai tambah </div>
<div style="text-align: justify;">
3. Industri pemroses rumput laut untuk produk makanan siap saji, Semi Refined Carrageenan (SRC) dan Alkali Treated Carrageenan (ATC). </div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
Hampir seluruh daerah di Indanesia dapat dilangsungkan usaha budidaya rumput laut antara lain di Sulawesi, Bali, NTB dan NTT, serta Papua. Di NTB rumput laut banyak dibudidayakan di Pulau Bali, Pulau Sumbawa dan Pulau Lombok. Mengingat besarnya permintaan pasar terhadap bahan baku rumput laut tersebut dibidang industri baik makanan, bahan baku kosmetika, dunia medis, dan industri maka diperlukan usaha penyediaan bahan baku yang memiliki kualifikasi yang dapat diterima. Dengan produksi yang tinggi maka ketersediaan bahan baku menjadi tersedia dan menentukan keberlangsungan usaha lanjutan bidang ini. </div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
Berdasarkan peluang usaha yang dianalisa maka prospek usaha yang menguntungkan dibidang rumput laut ini maka dipilih usaha budidaya dan pemrosesan rumput laut bahan baku industri dalam skala yang lebih besar. Bentuk produk yang akan diproduksi adalah rumput laut jenis Euchema cottoni dengan pola usaha budidaya metode tali letak dasar. </div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: center;">
<a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEgFTEBNfxEDJ4OUKYlvLT8tQuvTKmeE02u-cyTEuVfwJFgM_dqXqXuFTQZs-EUQwiBT8ZUhmHX_JvoJnI4SAYLWzSN1K3hYYhrVcSaV80TJ2G2w7ZGZ_NMZe3og0VnlhFgwIVcgtjYr7_I/s1600/rlaut2.jpg"><img border="0" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEgFTEBNfxEDJ4OUKYlvLT8tQuvTKmeE02u-cyTEuVfwJFgM_dqXqXuFTQZs-EUQwiBT8ZUhmHX_JvoJnI4SAYLWzSN1K3hYYhrVcSaV80TJ2G2w7ZGZ_NMZe3og0VnlhFgwIVcgtjYr7_I/s1600/rlaut2.jpg" /></a></div>
<div style="text-align: center;">
Gambar 1. Rumput laut jenis Euchema cottoni </div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
Pemilihan usaha budiaya rumput laut sebagai ide bisnis ini didasari semakin meningkatnya permintaan pasar lokal, nasional dan bahkan internasional terhadap bahan baku dan makin meluasnya skala pemanfaatan bahan baku rumput laut dalam dunia industri. Kebutuhan yang kian meningkat ini menjadi tantangan untuk dapat dipenuhi terutama dari usaha budidaya dan pemrosesan rumput laut. Sebagai daerah yang didominasi oleh wilayah perairan menjadikan potensi pengembangan rumput laut yang sangat tinggi. Pengembangan rumput laut dilakukan dengan pertimbangan : periode budidaya singkat (30 – 60 hari), transfer teknologi mudah, serta mampu melibatkan partisipasi aktif perempuan secara massal. Selain dipengaruhi oleh kenyataan bahwa komoditas ini belum memiliki kuota, baik di pasar domestik maupun internasional.</div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
<b>Segmentasi Pasar dan Target Pasar</b></div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
Kondisi industri hilir rumput laut di Indonesia saat ini tergolong minim dan penyebarannya masih terkonsentrasi di beberapa kota besar seperti Surabaya, Makassar dan Jakarta. Minimnya industri hilir dalam negeri, secara kalkulasi merugikan, terutama bagi industri hulu yang mayoritas berada di Kawasan Timur Indonesia (KTI). Akselerasi industri hulu yang tinggi tidak diimbangi dengan pengembangan industri hilir, sehingga secara simultan mendorong orientasi pemasaran (domestik/ekspor) dalam bentuk bahan mentah. </div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
Hasil panen produksi budidaya oleh pembudidaya, dijual dalam bentuk rumput laut kering, setelah dijemur selama 3 sampai 4 hari. Rumput Laut Kering dimasukkan ke dalam karung-karung plastik untuk dijual kepada para pedagang pengumpul atau kepada Koperasi yang kemudian menjualnya kepada pengusaha / pabrik pengolahan rumput laut di beberapa kota besar di Indonesia. Para pengumpul membeli rumput laut kering dari nelayan dengan harga sekitar Rp. 3.500 – Rp. 5.000 per kilogram, tergantung pada jenis rumput laut ataupun jarak lokasi budidaya ke perusahaan pengelola. Pemasaran seperti ini bagi pembudidaya memang tidak menguntungkan dari segi harga. </div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: center;">
<a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEjEteBG90fpAZA4wAkuSj4jz4tUpLQMBqTe9q8enftS9VUZxWZ_O3hynX4anW679S01TbRfKoKud5miD94RNgYxXNUqeNune9EAxyHB9-Lfz0_hTViFMXjKE-LoPT2RZBK7pNqHZ1j0iP4/s1600/rlaut4.jpg"><img border="0" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEjEteBG90fpAZA4wAkuSj4jz4tUpLQMBqTe9q8enftS9VUZxWZ_O3hynX4anW679S01TbRfKoKud5miD94RNgYxXNUqeNune9EAxyHB9-Lfz0_hTViFMXjKE-LoPT2RZBK7pNqHZ1j0iP4/s1600/rlaut4.jpg" /></a></div>
<div style="text-align: center;">
Gambar 2. Pengolahan pasca panen rumput laut</div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
<b>Segmentasi Pasar</b> </div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
Permintaan rumput laut dipengaruhi oleh permintaan pengguna rumput laut yaitu industri-industri makanan, obat-obatan dan bahan polimer. Ekspor rumput laut Indonesia secara total selalu meningkat pesat. Perkembangan ekspor itu terjadi pada hampir seluruh negara tujuan ekspor rumput laut Indonesia, Peningkatan ekspor paling pesat terjadi pada negara tujuan ekspor rumput laut Indonesia di Asia yaitu: Cina, Hongkong dan Phillipina. </div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
Proyeksi peluang pasar, ekspor rumput laut Indonesia mengalami perkembangan rata-rata 15% per tahun. Selain ditunjukkan oleh perkembangan ekspor juga dapat dilihat dari selisih antara jumlah permintaan/kebutuhan dunia dan jumlah yang mampu diproduksi. </div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
Kondisi tingkat penawaran rumput laut di tingkat dunia yang belum mampu memenuhi permintaan yang ada. Hal demikian juga terjadi di Indonesia, kemampuan produksi yang ada masih kecil dibanding permintaan. Penawaran suatu produk selalu berada pada posisi sebatas kemampuan kapasitas produksi. Pada tahun 2005 permintaan rumput laut dunia mencapai 260.571.050 ton berat kering sementara Indonesia hanya mampu memenuhi sejumlah 300.000 ton berat kering. Jadi penawaran rumput laut masih jauh dari kebutuhan atau permintaan. </div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
Sebagai gambaran Provinsi Nusa Tenggara Barat (NTB) yang memiliki potensi areal budidaya rumput laut seluas 6.000 Ha dengan potensi produksi 28.100 ton, namun kenyataannya pada tahun 2005 hanya mampu memproduksi 419 ton rumput laut kering, suatu jumlah yang jauh dari potensi yang ada (Sunarpi et.al, April 2006). Hal ini menunjukkan bahwa potensi budidaya rumput laut belum dimanfaatkan secara optimal. </div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
Ekspor rumput laut Indonesia dalam posisi belum menggembirakan, karena mayoritas masih dilakukan dalam bentuk raw seaweed atau rumput laut kering atau raw seaweed, sedangkan ekspor hasil olahan rumput laut (ekstrak) masih kecil porsinya. Pada tahun 2000 jumlah ekspor rumput laut kering 25.000 ton, dan ekspor ekstrak berjumlah kurang lebih 15.000 ton. Pada tahun 2004 ekspor rumput laut kering kurang lebih berjumlah 55.000, ekstrak rumput laut kurang lebih 10.000 ton, dan total ekspor rumput laut sebesar 65.000 (Neish. Ian Charles, 2006). </div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
Dengan berpedoman data produksi dan ekspor maka dapat dinyatakan bahwa : </div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
1. Peluang pasar dan perluasan usaha budidaya rumput laut masih sangat terbuka karena realisasi produksi jauh berada di bawah kapasitas produksi dan permintaan rumput laut kering. </div>
<div style="text-align: justify;">
2. Ekspor rumput laut Indonesia sebagian besar adalah raw seaweed, dengan demikian terdapat peluang yang cukup besar untuk membuka investasi industri pengolahan ekstrakt rumput laut yang memiliki nilai tambah (value added). </div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
Rantai pemasaran rumput laut berawal dari pembeli besar yang biasanya exporter atau pemroses rumput laut (pabrikan). Pabrikan akan mengadakan negosiasi transaksi kepada pedagang besar, tentang harga, spesifikasi produk dan syarat-syarat pembayaran. Dalam proses transaksi ini, biasa terjadi pedagang besar diberi modal atau uang muka untuk pengadaan barang. Selanjutnya pedagang besar aka melakukan kontak kepada pedagang pengumpul. Selanjutnya pedagang kecil inilah yang melakukan pencarian/ pengumpulan rumput laut kering, proses awal (sortir dan pemilihan) dan pembayaran kepada petani pembudidaya. </div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
Biasanya pedagang pengumpul sudah memiliki “anak buah” yaitu pembudidaya yang diberi pinjaman modal dan akan menjual hasil panennya kepada pedagang pengumpul tersebut. Untuk pedagang besar akan mengumpulkan rumput laut kering dari pedagang pengumpul dan juga dari pembudidaya binaannya. </div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
Ditinjau dari aspek transportasi, komunikasi dan ketersediaan produk yang jauh dibawah permintaan maka kendala pemasaran dapat dikatakan tidak ada. Namun demikian tidak dapat dipungkiri bahwa masih ada kendala dalam pemasaran yaitu aspek kualitas. </div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
Kendala utama pemasaran utama dan pertama-tama harus ditangani adalah masalah kepercayaan pada produk yang ditawarkan. Kepercayaan akan terbentuk melalui terpenuhinya standard mutu produk rumput laut (Neish, 2006). Aspek kualitas ini banyak dipengaruhi aspek teknologi dan pengolahan pasca panen (DKP, 2006). Dengan keadaan seperti itu, maka kendala yang ada sebenarnya adalah tantangan pasar dan tuntutan persaingan untuk selalu meningkatkan mutu. Untuk merebut posisi dan kepercayaan pasar, standard mutu produk rumput laut yang diekspor harus memenuhi berbagai kriteria (Neish, 2006): </div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
1. Aspek Produk. </div>
<div style="text-align: justify;">
a. Kadar air atau tingkat kelembaban max 38% </div>
<div style="text-align: justify;">
b. Prosentasi kotoran pada rumput laut maksimum 2% </div>
<div style="text-align: justify;">
c. Umur pemanenan minimum 45 hari. </div>
<div style="text-align: justify;">
d. Kadar garam rumput laut. </div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
2. Aspek standarisasi produk. </div>
<div style="text-align: justify;">
a. Standarisasi produk sesuai dengan kebutuhan pasar. </div>
<div style="text-align: justify;">
b. Prosedur standar menggunakan uji laboratorium </div>
<div style="text-align: justify;">
c. Diterapkan dan dipatuhinya manual mutu dan produksi </div>
<div style="text-align: justify;">
d. Sertifikasi sebagai penjaminan mutu. </div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
Pemakaian karaginan diperkirakan 80% digunakan dibidang industry makanan, farmasi dan kosmetik. Pada industry makanan sebagai stabilizer, thickener, gelling agent, additive atau komponen tambahan dalam pembuatan coklat, milk, pudding, instant milk, makanan kaleng dan bakery. Untuk industry non food antara lain pada industry : </div>
<div style="text-align: justify;">
- farmasi: sebagai suspensi, emulsi, stabilizer dalam pembuatan pasta gigi, obat-obatan, mineral oil. </div>
<div style="text-align: justify;">
- Industri-industri lain : misalnya pada industry keramik, cat dan lain-lain. </div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
Segmentasi pasar rumput laut yang akan digarap dalam usaha budidaya ini dengan memproduksi Euchema cottoni yang bisa diharap pada segmen pasar bahan baku industry pengolahan makanan siap saji maupun Alkali Treated Carrageenan (ATC) dan Semi-refined Carrageenan (SRC). Dengan menggarap segmen pasar ini maka usaha budidaya dan pemrosesan rumput laut ini dapat memproduksi kualitas rumput laut yang sesuai dengan permintaan pasar di segmen pasar ini. </div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
<b>Target Pasar </b></div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
Target pasar dari bisnis budidaya rumput laut E. cottonii adalah para perusahaan pangan dan non pangan yang menggunakan campuran rumput laut sebagai pengolahan produknya. Produk ditawarkan nantinya juga akan sangat memperhatikan peluang pasar baik nasional maupun Internasional. </div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
Posisi daya saing Indonesia dapat ditingkatkan melalui peningkatan mutu produk. Mutu produk dapat ditingkatkan melalui penggunaan strain bibit yang baik, dan pemrosesan paska panen lebih yang baik. Indonesia sudah saatnya meningkatkan posisi dari pengekspor raw seaweed menjadi ekpsortir produk rumput laut, baik dalam bentuk makanan siap saji maupun Alkali Treated Carrageenan (ATC) dan Semi-refined Carrageenan (SRC). </div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
ANALISIS KEKUATAN, KELEMAHAN, PELUANG DAN ANCAMAN (SWOT ANALISYS) : </div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
<table border="1" cellpadding="0" cellspacing="0" class="MsoNormalTable" style="border-collapse: collapse; border: none; margin-left: 12.5pt; mso-border-alt: solid black .5pt; mso-border-insideh: .5pt solid black; mso-border-insidev: .5pt solid black; mso-padding-alt: 0in 5.4pt 0in 5.4pt; mso-yfti-tbllook: 1184;">
<tbody>
<tr>
<td style="border: solid black 1.0pt; mso-border-alt: solid black .5pt; padding: 0in 5.4pt 0in 5.4pt; width: 184.3pt;" valign="top" width="246">
<div align="center" class="MsoNormal" style="text-align: center;">
<b><span style="font-family: "Arial","sans-serif"; font-size: 10.0pt; mso-bidi-font-size: 12.0pt;">Kekuatan<o:p></o:p></span></b></div>
</td>
<td style="border-left: none; border: solid black 1.0pt; mso-border-alt: solid black .5pt; mso-border-left-alt: solid black .5pt; padding: 0in 5.4pt 0in 5.4pt; width: 219.7pt;" valign="top" width="293">
<div align="center" class="MsoNormal" style="text-align: center;">
<b><span style="font-family: "Arial","sans-serif"; font-size: 10.0pt; mso-bidi-font-size: 12.0pt;">Kelemahan<o:p></o:p></span></b></div>
</td>
</tr>
<tr>
<td style="border-top: none; border: solid black 1.0pt; mso-border-alt: solid black .5pt; mso-border-top-alt: solid black .5pt; padding: 0in 5.4pt 0in 5.4pt; width: 184.3pt;" valign="top" width="246">
<div class="MsoNormal">
<span style="font-family: "Arial","sans-serif"; font-size: 10.0pt; mso-bidi-font-size: 12.0pt;">1.Harga Terjangkau <o:p></o:p></span></div>
<div class="MsoNormal">
<span style="font-family: "Arial","sans-serif"; font-size: 10.0pt; mso-bidi-font-size: 12.0pt;">2.Kualitas terjamin<o:p></o:p></span></div>
<div class="MsoNormal">
<span style="font-family: "Arial","sans-serif"; font-size: 10.0pt; mso-bidi-font-size: 12.0pt;">3.Kebersihan Rumput laut terjamin<o:p></o:p></span></div>
<div class="MsoNormal">
<br /></div>
</td>
<td style="border-bottom: solid black 1.0pt; border-left: none; border-right: solid black 1.0pt; border-top: none; mso-border-alt: solid black .5pt; mso-border-left-alt: solid black .5pt; mso-border-top-alt: solid black .5pt; padding: 0in 5.4pt 0in 5.4pt; width: 219.7pt;" valign="top" width="293">
<div class="MsoNormal">
<span style="font-family: "Arial","sans-serif"; font-size: 10.0pt; mso-bidi-font-size: 12.0pt;">1.Manajemen tradisional<o:p></o:p></span></div>
<div class="MsoNormal">
<span style="font-family: "Arial","sans-serif"; font-size: 10.0pt; mso-bidi-font-size: 12.0pt;">2.Sarana dan prasarana sederhana<o:p></o:p></span></div>
<div class="MsoNormal">
<span style="font-family: "Arial","sans-serif"; font-size: 10.0pt; mso-bidi-font-size: 12.0pt;">3.Sumberdaya manusia yang masih rendah pendidikan<o:p></o:p></span></div>
<div class="MsoNormal">
<span style="font-family: "Arial","sans-serif"; font-size: 10.0pt; mso-bidi-font-size: 12.0pt;">4.Pemasaran yang masih terbatas<o:p></o:p></span></div>
</td>
</tr>
<tr>
<td style="border-top: none; border: solid black 1.0pt; mso-border-alt: solid black .5pt; mso-border-top-alt: solid black .5pt; padding: 0in 5.4pt 0in 5.4pt; width: 184.3pt;" valign="top" width="246">
<div align="center" class="MsoNormal" style="text-align: center;">
<b><span style="font-family: "Arial","sans-serif"; font-size: 10.0pt; mso-bidi-font-size: 12.0pt;">Peluang<o:p></o:p></span></b></div>
</td>
<td style="border-bottom: solid black 1.0pt; border-left: none; border-right: solid black 1.0pt; border-top: none; mso-border-alt: solid black .5pt; mso-border-left-alt: solid black .5pt; mso-border-top-alt: solid black .5pt; padding: 0in 5.4pt 0in 5.4pt; width: 219.7pt;" valign="top" width="293">
<div align="center" class="MsoNormal" style="text-align: center;">
<b><span style="font-family: "Arial","sans-serif"; font-size: 10.0pt; mso-bidi-font-size: 12.0pt;">Ancaman<o:p></o:p></span></b></div>
</td>
</tr>
<tr>
<td style="border-top: none; border: solid black 1.0pt; mso-border-alt: solid black .5pt; mso-border-top-alt: solid black .5pt; padding: 0in 5.4pt 0in 5.4pt; width: 184.3pt;" valign="top" width="246">
<div class="MsoNormal">
<span style="font-family: "Arial","sans-serif"; font-size: 10.0pt; mso-bidi-font-size: 12.0pt;">1.Pangsa pasar yang masih luas<o:p></o:p></span></div>
<div class="MsoNormal">
<span style="font-family: "Arial","sans-serif"; font-size: 10.0pt; mso-bidi-font-size: 12.0pt;">2.Bahan baku yang mudah di dapat<o:p></o:p></span></div>
<div class="MsoNormal">
<span style="font-family: "Arial","sans-serif"; font-size: 10.0pt; mso-bidi-font-size: 12.0pt;">3.Pesaing besar relatip terbatas<o:p></o:p></span></div>
<div class="MsoNormal">
<span style="font-family: "Arial","sans-serif"; font-size: 10.0pt; mso-bidi-font-size: 12.0pt;">4.Biaya produksi yang terjangkau<o:p></o:p></span></div>
</td>
<td style="border-bottom: solid black 1.0pt; border-left: none; border-right: solid black 1.0pt; border-top: none; mso-border-alt: solid black .5pt; mso-border-left-alt: solid black .5pt; mso-border-top-alt: solid black .5pt; padding: 0in 5.4pt 0in 5.4pt; width: 219.7pt;" valign="top" width="293">
<div class="MsoNormal">
<span style="font-family: "Arial","sans-serif"; font-size: 10.0pt; mso-bidi-font-size: 12.0pt;">1.Munculnya pesaing baru<o:p></o:p></span></div>
<div class="MsoNormal">
<br /></div>
</td>
</tr>
</tbody></table>
<div class="MsoNormal">
<br /></div>
</div>
<div style="text-align: justify;">
Target pasar rumput laut masih sangat terbuka dengan tingginya marjin permintaan dengan penawaran. Kemampuan produksi untuk memenuhi pangsa pasar masih sangat rendah dibandingkan dengan permintaan produk rumput laut baik skala nasional (domestik) maupun internasional (eksport). Produk yang dihasilkan adalah berupa produk yang seragam maka pencakupan pasar yang diterapkan adalah strategi pemasaran tampa pembedaan. </div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
Sementara level pasar yang terdapat di usaha ini memiliki pasar potensial yang sangat tinggi. Target pasar (target market) bidang usaha ini meliputi sasaran yang merupakan perusahaan/pabrik industry pengolahan makanan siap saji maupun Alkali Treated Carrageenan (ATC) dan Semi-refined Carrageenan (SRC). Usaha budidaya dan pemrosesan rumput laut yang dilakukan diharapkan dapat menyuplai atau memasok kebutuhan bahan baku dari industry hilir (pengolahan) rumput laut dengan kualitas yang sesuai.</div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
<div style="text-align: justify;">
<b>Muhammad Fahri </b></div>
<div style="text-align: justify;">
<b>SMKN 1 Bima NTB </b></div>
<div style="text-align: justify;">
<b>elfahry.bimami@gmail.com</b></div>
<div style="text-align: justify;">
<br /></div>
</span><div class="blogger-post-footer">MEMUSNAHKAN TANDA TANYA ANDA. THANKS BRO !</div>Thailand aik aikhttp://www.blogger.com/profile/10964108109700651247noreply@blogger.com0Bima, Indonesia-8.460566 118.72740199999998-57.0871245 36.110214499999984 40.1659925 -158.65541050000002tag:blogger.com,1999:blog-2030866544649181977.post-61082629255363783542012-12-28T22:18:00.000+07:002012-12-28T22:18:08.243+07:00Pendidikan di Pusaran Kerawanan<span style="background-color: white; color: #333333; font-family: Arial, Helvetica, sans-serif; font-size: 11px;">Jumat, 28 Desember 2012</span><span class="fullpost">
</span><br />
<div>
<span style="background-color: white; color: #333333; font-family: Arial, Helvetica, sans-serif; font-size: 11px;"><br /></span></div>
<div>
<div class="separator" style="clear: both; text-align: center;">
<a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEiAN8q8pWru-jfCP2l50f7O6bcchIhsGY1eGgLWf8HrAMfYSDrQQj88zQVPmFqSNsHESKEXP8-oQU-aK-9P1SYJ1EgG8slf4j_tuhiD4BRXfFb_FgBnxc_0prLs-ePy5frBBq4v1UoXhBQ/s1600/dasar+pendidikan.jpg" imageanchor="1" style="margin-left: 1em; margin-right: 1em;"><img border="0" height="164" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEiAN8q8pWru-jfCP2l50f7O6bcchIhsGY1eGgLWf8HrAMfYSDrQQj88zQVPmFqSNsHESKEXP8-oQU-aK-9P1SYJ1EgG8slf4j_tuhiD4BRXfFb_FgBnxc_0prLs-ePy5frBBq4v1UoXhBQ/s320/dasar+pendidikan.jpg" width="320" /></a></div>
<div style="background-color: white; color: #333333; font-family: arial; font-size: 14px; line-height: 20px;">
<em>Oleh Hafid Abbas<br /></em>Menarik direnungkan apa yang pernah dikemukakan oleh Perdana Menteri Malaysia Abdullah Badawi. Bagi Malaysia, kata Badawi, pendidikan dan pembangunan sumber daya manusia bukan sekadar sesuatu yang mutlak atau sangat vital, melainkan persoalan hidup matinya Malaysia.<br /><br />Jika Indonesia berpandangan sama, bahwa pendidikan adalah persoalan hidup matinya bangsa ini di masa depan, maka sudah waktunya bangsa ini membenahi pendidikan secara sungguh-sungguh pada semua dimensi persoalan pendidikan. Beberapa waktu lalu (27/11/2012) harian ini melaporkan peringkat pendidikan Indonesia pada urutan terendah di dunia. Berdasarkan tabel liga global yang diterbitkan oleh firma pendidikan Pearson, sistem pendidikan Indonesia berada di posisi terbawah bersama Meksiko dan Brasil. Tempat pertama dan kedua diraih Finlandia dan Korea Selatan.<br /><strong><br />Tiga titik rawan</strong><br /><br />Jika wajah pendidikan kita seperti itu, proses perjalanan peradaban modern bangsa ini ke masa depan akan bergerak di atas pelataran yang amat rapuh. Berikut ini titik-titik rawan itu. Pertama, pada 21 Maret 2011, Menteri Pendidikan dan Kebudayaan Mohammad Nuh dalam rapat kerja dengan Komisi X DPR melaporkan, 88,8 persen sekolah di Indonesia, mulai dari SD hingga SMA/SMK, belum melewati mutu standar pelayanan minimal.</div>
<a name='more'></a><br />Berdasarkan data yang ada, 40,31 persen dari 201.557 sekolah di Indonesia berada di bawah standar pelayanan minimal, 48,89 persen pada posisi standar pelayanan minimal, dan 10,15 persen yang memenuhi standar nasional pendidikan. Sekolah-sekolah yang dinilai mampu bersaing dengan mutu pendidikan negara-negara lain, yang disebut rintisan sekolah bertaraf internasional, hanya 0,65 persen.<br /><br />Jika potret suram itu tidak segera berubah, di masa depan pendidikan kita hanya akan menghasilkan bangsa kuli yang tidak mampu bersaing dengan bangsa lain. Lebih mengkhawatirkan lagi, pada 2015 kita akan memasuki satu komunitas masyarakat tunggal ASEAN. Namun, sayang sekali, hingga kini belum terlihat adanya tanda-tanda perubahan secara signifikan pembenahan pendidikan nasional memasuki era baru itu. Dengan mutu pendidikan yang rendah, Indonesia sesungguhnya akan memasuki era kolonialisme baru dari bangsa lain yang kualitas pendidikannya lebih maju. Terdapat sekitar 2,7 juta buruh migran Indonesia bekerja di Malaysia, diperkirakan 60 persen bekerja sebagai pekerja rumah tangga, buruh perkebunan, dan buruh konstruksi.<br /><br />Kerawanan kedua, saat ini tercatat sekitar 3.600 perguruan tinggi swasta dan hanya ada 92 perguruan tinggi negeri. Dari jumlah itu terdapat 6.000 program studi yang belum terakreditasi atau tak legal (Kompas, 18/5/2012), 42 persen dari semua tenaga pengajarnya masih berpendidikan S-1. Hanya 6-7 persen dari semua program studi yang berjumlah 1.7000- 18.000 yang terakreditasi A.<br /><br />Gambaran ini kelihatannya jauh lebih suram jika dibandingkan dengan wajah pendidikan dasar dan menengah. Jika ditambah dengan jumlah akademi komunitas yang akan segera dikembangkan di semua provinsi yang tersebar di 300 kabupaten/kota, Indonesia akan tercatat sebagai negara dengan jumlah perguruan tinggi terbanyak di dunia.<br /><br />Sekadar perbandingan, China dengan penduduk mendekati 1,4 miliar atau sekitar enam kali lebih besar daripada Indonesia hanya memiliki 2.263 perguruan tinggi (Fact about China Education, 2011). Lebih menarik lagi, China menggalakkan kebijakan penggabungan perguruan tinggi yang kecil-kecil menjadi perguruan tinggi besar dengan pengelolaan yang lebih profesional. Pada 2011 terdapat sekitar 900 perguruan tinggi kecil-kecil yang dikelola dengan pendekatan seperti itu.<br /><br />Moratorium pembukaan program studi dan perguruan tinggi baru yang dilakukan Direktorat Jenderal Pendidikan Tinggi bukanlah solusi, bahkan akan menciptakan masalah baru yang lebih rumit. Perguruan tinggi harus terus-menerus berubah dan berkembang seirama dengan tuntutan perkembangan ilmu pengetahuan dan tuntutan dinamika perubahan masyarakat. Sungguh satu kekeliruan jika tuntutan itu harus dihalangi.<br /><br />Kerawanan ketiga, sejak lebih dari satu dekade terakhir terdapat pergeseran kebijakan pengelolaan pendidikan secara keseluruhan—baik di pusat maupun di daerah—dari pendekatan teknis profesional ke kepentingan politik praktis. Padahal, UNESCO dan ILO (1966) telah mengeluarkan rekomendasi tentang pengembangan profesi guru dan jabatan apa saja yang terkait dengan pendidikan. Pada butir 43 rekomendasi tersebut disebutkan, posisi pengawas, kepala dinas pendidikan, inspektur jenderal, direktur jenderal, termasuk menteri pendidikan atau jabatan apa saja yang memerlukan tanggung jawab khusus yang terkait dengan urusan pendidikan, haruslah diprioritaskan pada urutan pertama kepada guru yang sudah berpengalaman.<br /><br />Pada era Presiden Abdurrahman Wahid, urusan pendidikan telah dikavling menjadi jatah politik dari Muhammadiyah dan kementerian agama jatah NU. Akibatnya, kementerian pendidikan telah didominasi oleh mereka yang didukung oleh kepentingan Muhammadiyah, mulai dari menteri hingga jabatan-jabatan lain. Latar belakangan keahlian di jajaran struktural cukup variatif, mulai dari dokter, ahli batuan, ahli rayap, hingga listrik arus lemah. Ironisnya, terabaikan adalah bidang yang disarankan UNESCO, yaitu keguruan dan ilmu pendidikan. Hal ini terus terpelihara hingga sekarang. Pengkavlingan seperti itu hasilnya ternyata adalah keadaan pendidikan Indonesia dinilai terburuk di dunia.<br /><br /><strong>Demi politik pencitraan</strong><br /><br />Keadaan yang lebih rawan lagi terjadi di tingkat provinsi, kabupaten/kota, kecamatan, hingga ke pranata-pranata unit birokrasi pendidikan paling bawah. Dengan otonomi daerah, para bupati/wali kota terpilih dengan bebas menempatkan orang-orang dekatnya yang telah dinilai berjasa atas kemenangannya di proses pilkada untuk mengisi semua pos di dinas pendidikan daerah. Ada daerah yang mempromosikan seseorang yang mengurus urusan pasar ke urusan pendidikan, ada pula yang berasal dari urusan pemakaman ke dinas pendidikan. Pertimbangan-pertimbangan ilmiah seperti saran UNESCO sudah kering di dada elite politik negeri ini.<br /><br />Elite-elite kepemimpinan pendidikan di pusat dan daerah kelihatannya baru mencari bentuk karena umumnya tidak tumbuh di ranah pendidikan dan keguruan. Mereka umumnya mementingkan pencitraan. Misalnya, jika ada 2-3 anak menang di olimpiade sains, misalnya, itulah yang dibesar-besarkan untuk memberikan kesan bahwa mereka telah berhasil luar biasa memajukan pendidikan. Mereka tidak menyadari bahwa mafia penyelenggara olimpiade seperti itu tersebar dan menjamur di berbagai belahan dunia.<br /><br />Dengan kepentingan pencitraan, keputusan strategis pun sering kali diambil tanpa melalui hasil penelitian ilmiah. Ada tawuran antarsiswa, solusinya adalah perubahan kurikulum. Apa benar semua itu disebabkan oleh kurikulum? Menyalahkan kurikulum adalah modus paling aman. Sebab, kalau sang pengambil kebijakan keliru, hasilnya baru diketahui 10-20 tahun kemudian. Lagi pula, satu lembar yang berubah dalam kurikulum dapat melahirkan sekian ribu proyek baru yang dapat memberi lahan baru bagi mitra-mitra luar untuk membantu meningkatkan daya serap anggaran di kementerian pendidikan.<br /><br />Semoga bangsa kita segera terbebas dari belenggu kepentingan politik pencitraan dan bangkit dari keterpurukannya dari posisi yang terendah di dunia, seperti yang dilaporkan oleh Pearson baru-baru ini.<br /><br /><br /><em>Hafid Abbas Guru Besar Fakultas Ilmu Pendidikan Universitas Negeri Jakarta</em><br />
<div style="background-color: white; color: #333333; font-family: arial; font-size: 14px; line-height: 20px;">
<br /></div>
<div class="clearit pt_30" style="background-color: white; clear: both; color: #333333; font-family: arial; font-size: 14px; line-height: 20px; margin: 0px; padding: 30px 0px 0px;">
</div>
<div class="clearit" style="background-color: white; clear: both; color: #333333; font-family: arial; font-size: 14px; line-height: 20px; margin: 0px; padding: 0px;">
</div>
<div class="left" style="background-color: white; color: #333333; float: left; font-family: arial; font-size: 14px; line-height: 20px;">
<div class="left pr_5 pt_5 font11 c_abu" style="color: grey; float: left; font-size: 11px; padding-right: 5px; padding-top: 5px;">
<strong>Sumber :</strong></div>
<div class="left pt_5 c_abu01_kompas2011 font13" style="float: left; font-size: 13px; padding-top: 5px;">
Kompas Cetak</div>
</div>
</div>
<div class="blogger-post-footer">MEMUSNAHKAN TANDA TANYA ANDA. THANKS BRO !</div>Thailand aik aikhttp://www.blogger.com/profile/10964108109700651247noreply@blogger.com0tag:blogger.com,1999:blog-2030866544649181977.post-43413658655805931222012-07-16T22:39:00.001+07:002012-07-16T22:43:09.978+07:00To Manufacturing Hope, Dahlan Iskan( mendukung ide besar sang menteri BUMN, Dahlan Iskan )<br />
Oleh : Muhammad Fahri, SPi. MP
<br />
<br />
<div class="separator" style="clear: both; text-align: center;">
<a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEj1lAzs-CtdH-Vs2iyR8B_zQA_PYXa1bVUWeE0NBEnV3-3j5iTqSHs9K4flMjbSO5wNq9g0Jqi87b-jVWMpIhSGL9FQU4ku3dkgdECYLU1Sc67gf2QoiJaPOBC-cJ6iVBwHV8SGfwTa1p4/s1600/174px-dahlan-iskan.jpg" imageanchor="1" style="clear: right; float: right; margin-bottom: 1em; margin-left: 1em;"><img border="0" height="250" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEj1lAzs-CtdH-Vs2iyR8B_zQA_PYXa1bVUWeE0NBEnV3-3j5iTqSHs9K4flMjbSO5wNq9g0Jqi87b-jVWMpIhSGL9FQU4ku3dkgdECYLU1Sc67gf2QoiJaPOBC-cJ6iVBwHV8SGfwTa1p4/s320/174px-dahlan-iskan.jpg" width="174" /></a></div>
Profil Sang Menteri<br />
<br />
Dahlan Iskan (lahir tanggal 17 Agustus 1951 di Magetan, Jawa Timur, adalah CEO surat kabar Jawa Pos dan Jawa Pos News Network, yang bermarkas di Surabaya. Ia juga adalah Direktur Utama PLN sejak 23 Desember 2009. Pada tanggal 19 Oktober 2011, berkaitan dengan reshuffle Kabinet Indonesia Bersatu II, Dahlan Iskan diangkat sebagai Menteri Negara Badan Usaha Milik Negara menggantikan Mustafa Abubakar yang sedang sakit.<br />
<br />
Dahlan Iskan dibesarkan di lingkungan pedesaan dangan kondisi serba kekurangan. Orangtuanya tidak ingat tanggal berapa Dahlan dilahirkan. Dahlan akhirnya memilih tanggal 17 Agustus dengan alasan mudah diingat karena bertepatan dengan peringatan kemerdekaan Republik Indonesia.
Dahlan Iskan pernah menulis buku berjudul Ganti Hati pada tahun 2008. Buku ini berisi tentang penglaman Dahlan Iskan dalam melakukan operasi cangkok hati di Cina.<br />
<br />
Karir Dahlan Iskan dimulai sebagai calon reporter sebuah surat kabar kecil di Samarinda (Kalimantan Timur) pada tahun 1975. Tahun 1976, ia menjadi wartawan majalah Tempo. Sejak tahun 1982, Dahlan Iskan memimpin surat kabar Jawa Pos hingga sekarang.
Dahlan Iskan adalah sosok yang menjadikan Jawa Pos yang waktu itu hampir mati dengan oplah 6.000 ekslempar, dalam waktu 5 tahun menjadi surat kabar dengan oplah 300.000 eksemplar.
<span class="fullpost">
Lima tahun kemudian terbentuk Jawa Pos News Network (JPNN), salah satu jaringan surat kabar terbesar di Indonesia, dimana memiliki lebih dari 80 surat kabar, tabloid, dan majalah, serta 40 jaringan percetakan di Indonesia. Pada tahun 1997 ia berhasil mendirikan Graha Pena, salah satu gedung pencakar langit di Surabaya, dan kemudian gedung serupa di Jakarta.
Pada tahun 2002, ia mendirikan stasiun televisi lokal JTV di Surabaya, yang kemudian diikutiBatam TV di Batam dan Riau TV di Pekanbaru. </span><br />
<span class="fullpost"><br /></span><br />
<span class="fullpost">Sejak awal 2009, Dahlan adalah sebagai Komisaris PT. Fangbian Iskan Corporindo (FIC)yang akan memulai pembangunan Sambungan Komunikasi Kabel Laut (SKKL) pertengahan tahun ini. SKKL ini akan menghubungkan Surabaya di Indonesia dan Hong Kong. Dengan panjang serat optik 4.300 kilometer
Sejak akhir 2009, Dahlan diangkat menjadi direktur utama PLN menggantikan Fahmi Mochtar yang dikritik karena selama kepemimpinannya banyak terjadi mati lampu di daerah Jakarta. Semenjak memimpin PLN, Dahlan membuat beberapa gebrakan diantaranya bebas byar pet se Indonesia dalam waktu 6 bulan,gerakan sehari sejuta sambungan. Dahlan juga berencana membangun PLTS di 100 pulau pada tahun 2011. Sebelumnya, tahun 2010 PLN telah berhasil membangun PLTS di 5 pulau di Indonesia bagian Timur yaitu Pulau Banda, Bunaken Manado, Derawan Kalimantan Timur, Wakatobi Sulawesi Tenggara, dan Citrawangan. Selain sebagai pemimpin Grup Jawa Pos, Dahlan juga merupakan presiden direktur dari dua perusahaan pembangkit listrik swasta: PT Cahaya Fajar Kaltim di Kalimantan Timur dan PT Prima Electric Power di Surabaya.
Pada tanggal 17 Oktober 2011, Dahlan Iskan ditunjuk sebagai pengganti Menteri BUMN yang menderita sakit. Ia terisak dan terharu begitu dirinya dipanggil menjadi menteri BUMN karena ia berat meninggalkan PLN yang menurutnya sedang pada puncak semangat untuk melakukan reformasi PLN. </span><br />
<span class="fullpost"><br /></span><br />
<span class="fullpost">Gagasan Yang Lahir </span><br />
<span class="fullpost"><br /></span><br />
<span class="fullpost">Membaca catatan Dahlan Iskan, sepertinya kita menemukan banyak solusi bagi kusutnya masalah BUMN. Cerita BUMN yang terus menabur kabar sedih tentang kerugian yang tak pernah berujung. Ada tengarai, bahwa BUMN adalah lahan tersubur bagi para koruptor besar di negeri ini. Belum lagi, bila badan usaha pelat merah ini berafiliasi dengan partai politik, maka cerita kerugian akan terus bertambah panjang. BUMN telah menjadi pundi besar politisi dan partai politik untuk mengeruk dana pembiayaan bagi siklus dan kelangsungan hidup partainya. Alhasil, menuju 70 Tahun kemerdekaan masih saja BUMN terperosok pada utang dan kerugian. </span><br />
<span class="fullpost"><br /></span><br />
<span class="fullpost">Privatisasi BUMN vital telah dilakukan sejak lama, runtuhnya rezim orde baru seakan membuka pandangan bahwa BUMN hendaknya dinobatkan sebagai sumber penggali bagi dana pembangunan demi kemaslahatan umum. Namun, motif mulia itu hanya cerita yang masih maya adanya. Dobrakannya masih lemah dan cerita defisit masih tertera juga. </span><br />
<span class="fullpost"><br /></span><br />
<span class="fullpost">Memulai kepemimpinan dengan kondisi terbatas, Dahlan Iskan merintis ide-ide baru diluar kebiasaan yang berlaku. Jalan Tol yang diharapkan untuk mengurangi atau mengurai kemacetan kota-kota besar Indonesia malah jadi momok dengan memperpanjang antrian pada pintu-pintu masuknya. Kemacetan kerapkali terjadi hanya karena pelayan pintu tol yang tidak profesional. Berita Dahlan Iskan melabrak petugas pintu tol bahkan membanting kursi loket adalah sejarah yang tidak pernah terjadi di Republik ini. Naluri kepemimpinannya yang terasah dengan segera nmenemukan akar masalah. Antrian dipintu tol hanya boleh 5 mobil saja. Kalau lebih harus segera dipecahkan. Jasa Marga telah diajari dengan sebuah tindakan efektif dan efisien. </span><br />
<span class="fullpost"><br /></span><br />
<span class="fullpost">Perusahaan Listrik Negara (PLN) juga telah dijamah dengan mengurangi sifatnya yang byar pett (sering mati kekurangan daya). Dimasa kepemimpinannya sebagai dirut banyak hal yang realisasikan. Akar masalahnya dicermati seksama. Pembangkit dengan berbagai kapasitas terpasang. Meningkatkan penggunaan bahan bakar alternatif seperti batubara, air, panas bumi, tenga surya telah membawa dampak dengan berkurangnya pemadaman secara signifikan. Tangan dingin Dahlan, telah mengisyaratkan upaya pemasangan sejuta pelanggan dalam sehari guna memenuhi menumpuknya antrian pelanggan baru yang membutuhakan energi listrik. Tetesan airmatanya meluap ketika kerjanya di PLN dialihkan ke menteri BUMN karena merasa kerjanya belum tuntas. </span><br />
<span class="fullpost"><br /></span><br />
<span class="fullpost"> Sakit hati Dahlan kian berkecamuk saat mendengar negeri maritim ini masih mengimpor garam untuk menutupi stok garam nasional per tahunnya. Merasa tidak pantas, negeri yang lautnya meluap dan lahan pantainya yang luas sebagai modal pengadaan garam melimpah masih dikerumuni hal yang aneh, kekurangan garam. Tahun ini, Dahlan mencetuskan PT Garam yang tujuannya meningkatkan produksi garam nasional secara besar-besaran. Daerah NTT tepatnya di Sumba segera dibuka 70 ribu HA lahan baru dengan kondisi siap garap untuk garam yang lebih baik secara kualitas dan jumlahnya. Targetnya, Tahun ini kita bisa memenuhi kebutuhan garam nasional bahkan mengekspornya sebagai sumber devisa baru. </span><br />
<span class="fullpost"><br /></span><br />
<span class="fullpost">Masih disekitar Sumba NTT, juga akan dibangun lahan peternakan (ranch) sekala besar untuk mengantisipasi stok daging nasional. Masalah kekurangan daging selalu saja menghantui negeri ini disetiap agenda rutinnya, hari raya. Masalah mendasar di bidang peternakan adalah bibit pejantan yang kurang bermutu sehingga induk betinanya tidak bisa menghasilkan bibit unggul. Perkawinan sapi lokal terjadi antar sesamanya sehingga bibit yang dihasilkan kian waktu semakin mengecil dan tidak bisa menghasilkan kualitas daging yang memadai. Menghindari perkawian incest (sedarah) adalah solusi yang ditawarkannya. </span><br />
<span class="fullpost"><br /></span><br />
<span class="fullpost">Yang tak kalah serunya manajemen Dahlan terhadap penguatan stok gula nasional. Pabrik gula peninggalan Belanda yang telah berumur mendapat sentuhannya. Pabrik gula menjadi penentu kualitas gula yang dihasilkan. Sentuhan kecil perbaikan kondisi pabrik akan mengurangi masalah produksi. Secara prinsip, Dahlan mengemukan bahwa gula bukan hanya diproduksi di pabrik tetapi di perkebunan itu sendiri. Kualitas tebu menjadi faktor utama yang menentukan ketersediaan gula kita. Tebu berkualitas akan menyediakan rendemen yang baik. Rendemen yang baik akan meningkatkan kualitas gula baik kualitas maupun kuantitasnya. Manajemen penanaman tebu memegang kendali dalam carut marut masalah pergulaan nasional. </span><br />
<span class="fullpost"><br /></span><br />
<span class="fullpost"> Perusahaan penerbangan nasional Garuda Indonesian Airways juga telah menunjukkan kerja yang semakin meningkat. Terbukti, dalam tahun terakhir maskapai ini telah mengalami peningkatan peringkatnya sebagai maskapai terbaik di asia mengalahkan MAS malaysia ataupu Thai Airways. Hanya Singapore Airlines yang masih belum bisa ditaklukkan. </span><br />
<span class="fullpost"><br /></span><br />
<span class="fullpost">BatanTek, sebuah BUMN berbasis teknologi nuklir justru mengalami perkembangan pesat dengan menghasilkan radioisotop nuklir rendah yang sangat vital perannya dalam dunia medis. Sebuah inovasi yang mumpuni ditengah kalutnya kondisi BATANTEK yang tidak bisa mandiri dan sulit menghasilkan reaktor nuklir untuk listrik sekalipun. Alhasil, Indonesia menjadi negara yang diperhitungkan dalam penyediaan isotop nuklir demi kepentingan dunia kesehatan. </span><br />
<span class="fullpost"><br /></span><br />
<span class="fullpost">Program unik lainnya adalah Empat Putra Petir. Proyek ini sungguh luar biasa, dimana empat putra terbaik negeri diharuskan untuk menghadirkan moda transportasi berbasis listrik. Mobil Listrik Nasional. Perkembangan terakhir program ini dalam fase uji coba penggunaan mobil tersebut. Kemarin. Dahlan telah mencobanya mengendarai mobnas listrik tersebut rute Depok- Kantor BPPT meskipun mobnas harapan itu masih ngambek akibat kekuatan daya baterei listriknya belum sempurna. Jika progam ini sukses maka misi kita untuk melepas ketergantungan pada BBM akan semakin ringan. </span><br />
<span class="fullpost"><br /></span><br />
<span class="fullpost">Makin banyak solusi yang ditemukan oleh Dahlan dalam memimpin perusahaan negara (BUMN) untuk kembali membawa kejayaan dan keharuman negeri ini. Semoga beliau diberi umur panjang dan dijaga agar tetap istiqomah mengemban amanat demi kehidupan negara besar ini. Selamat dan salut buat seorang menteri yang sahaja, Dahlan Iskan. Bagaimana menurut anda ???
(fahrinotes)
</span><div class="blogger-post-footer">MEMUSNAHKAN TANDA TANYA ANDA. THANKS BRO !</div>Thailand aik aikhttp://www.blogger.com/profile/10964108109700651247noreply@blogger.com0tag:blogger.com,1999:blog-2030866544649181977.post-57587681356643535312010-10-05T02:53:00.003+07:002010-10-05T03:03:46.661+07:00UJI TOKSISITAS EKSTRAK POLAR, SEMIPOLAR DAN NONPOLAR DARI ALGA COKLAT Sargassum cristaefolium<div style="text-align: center;"><span style="font-weight: bold;">Oleh : Muhammad Fahri, S.Pi. M.Pi</span><br /><br /><span style="font-weight: bold;">PENDAHULUAN</span><br /></div><br />Uji Toksisitas (Brine Shrimp Lethality Test)<br /><br />Metode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT) dengan menggunakan larva udang Artemia salina Leach sebagai hewan uji merupakan salah satu metode yang banyak digunakan untuk pencarian senyawa antikanker baru yang berasal dari tanaman. Hasil uji toksisitas dengan metode ini telah terbukti memiliki korelasi dengan daya sitotoksis senyawa antikanker. Selain itu, metode ini juga mudah dikerjakan, murah, cepat dan cukup akurat (Meyer, 1982).<br /><br />Carballo et al. (2002) meneliti kelayakan penggunaan metode BSLT untuk pengujian aktivitas farmakologi produk bahan alam. Hasil penelitian tersebut menunjukkan adanya korelasi positif antara BSLT dan uji sitotoksik (50 % spesies yang aktif dalam BSLT juga aktif dalam uji sitotoksik). Menurut Mc Laughlin & Thompson (1998) dalam Widiastuti, (2004), nilai LC50 untuk sitotoksik umumnya adalah sepersepuluh nilai LC50 yang diperoleh dari BSLT.<br /><br />Artemia salina Leach merupakan komponen dari invertebrata dari fauna pada ekosistem perairan laut. Udang renik ini mempunyai peranan yang penting dalam aliran energi dan rantai makanan. Spesies invertebrata ini umumnya digunakan sebagai organisme sentinel sejati berdasarkan pada penyebaran, fasilitas sampling, dan luasnya karakteristik ekologi dan sensifitasnya terhadap bahan kimia (Calleja dan Persoone, 1992).<br /><span class="fullpost"><br />Dalam waktu 24-36 jam setelah pemasukan telur, biasanya telur-telur itu sudah menetas menjadi larva Artemia yang dinamakan nauplius (Mujiman, 1995). Tahapan proses penetasan Artemia yaitu tahap hidrasi, tahap pecah cangkang, dan tahap payung atau tahap pengeluaran. Untuk mengetahui tahap penetasan dapat dilihat pada Gambar 2.4.<br /><br />Gambar 2.4. Tahapan penetasan Artemia salina Leach (Mujiman, 1995).<br /><br />Pengujian Letalitas telah digunakan dengan sukses untuk isolasi biomonitor dari cytotoxic (Siqueira, et. al., 1998), antimalaria (Perez, et.al., 1997), insektisida (Oberlies, et.al., 1998), dan antifeedent (Labbe, et.al., 1993) campuran dari ektrak tumbuhan. Hasil dari skrining dari air, hydroalcoholic dan ekstrak alkohol dari beberapa tumbuhan obat penting yang digunakan dalam pengobatan tradisional untuk letalitas merujuk pada larva Artemia salina yang diujikan.<br /><br />Menurut Meyer dkk. (1982) tingkat toksisitas dari ekstrak tanaman dapat ditentukan dengan melihat harga LC50-nya. Suatu ekstrak dianggap sangat toksik bila memiliki nilai LC50 di bawah 30 ppm, dianggap toksik bila memiliki nilai LC50 30-1000 ppm dan dianggap tidak toksik bila nilai LC50 di atas 1000 ppm. Tingkat toksisitas tersebut memberi makna terhadap potensi aktivitasnya sebagai antitumor. Semakin kecil harga LC50 semakin toksik suatu senyawa dan semakin berpotensi sebagai senyawa antitumor.<br /><br /></span><div style="text-align: center;"><span class="fullpost"><span style="font-weight: bold;">METODELOGI PENELITIAN</span></span><br /></div><span class="fullpost"><br />Rancangan Uji Toksisitas<br /><br />Uji toksisitas ekstrak senyawa menggunakan hewan uji larva A. salina L umur 48-72 jam setelah penetasan telur untuk mengetahui daya toksisitas ekstrak senyawa dalam menyebabkan kematian pada hewan uji. Uji toksisitas untuk mendapatkan nilai Lethal Concentration 50 (LC50) dari senyawa tersebut. Ekstrak yang bersifat toksik dengan diketahui dari nilai LC50 pada uji toksisitas.. Media kultur penetasan larva A. salina L menggunakan botol plastik transparan ukuran volume 1500 ml dengan perlengkapan aerasi kuat. Media penetasan berupa air laut buatan dengan melarutkan garam dapur sebanyak 38 gram dalam 1000 ml air tawar sehingga salinitas air berkisar 32-35 ppm.<br /><br />Uji toksisitas menggunakan rancangan eksperimental dengan perlakuan perbedaan konsentrasi ekstrak S. cristaefolium terhadap kematian larva Artemia salina L. Konsentrasi ekstrak yang digunakan adalah 0 μg/ml (kontrol), 6,25 μg/ml, 12,5 μg/ml, 25 μg/ml, 50 μg/ml, 100 μg/ml dan masing-masing perlakuan dibuat ulangan 5 kali. Penempatan perlakuan dilakukan secara acak. Parameter yang digunakan adalah jumlah Artemia salina L yang mati dari total larva hewan uji. Kemudian dihitung nilai LC50 dengan menggunakan analisa probit (50% kematian larva hewan uji).<br /><br />Prosedur Uji Toksisitas Ekstrak Metode BSLT<br /><br />Wadah penetasan A. salina L menggunakan botol plastik transparan ukuran volume 1500 ml yang dimodifikasi dengan perlengkapan aerasi kuat. Media penetasan berupa air laut buatan dengan melarutkan garam dapur sebanyak 38 gram dalam 1000 ml air tawar sehingga salinitas air berkisar 32-35 ppm. Salinitas ini sesuai dengan salinitas habitat hidup alami dari A. salina L. Media penetasan ini ditempatkan dengan pencahayaan yang cukup.<br /><br />Sebanyak 1 gram kista A. salina L dimasukan dalam media 1500 ml air laut buatan dengan pemberian aerasi yang cukup. Suhu penetasan adalah ± 25-300C dan pH ± 6-7. Telur akan menetas setelah 18-24 jam dan larvanya disebut nauplii. Nauplii siap untuk uji BSLT setelah larva ini berumur 48 jam (Subyakto, 2003).<br /><br />Botol vial disiapkan untuk pengujian, masing-masing sampel dibuat 5 konsentrasi berbeda yaitu 6,25 μg/mL, 12,5 μg/mL, 25 μg/mL, 50 μg/mL, dan 100 μg/mL dan masing-masing dengan kontrol (0 μg/mL). Ekstrak pekat kloroform, aseton dan metanol ditimbang sebanyak 50 mg dan dilarutkan dengan menggunakan 5 ml pelarutnya masing-masing. Selanjutnya, larutan dipipet masing-masing sebanyak 500 μL, 250 μL, 125 μL, 62,5 μL, dan 31,25 μL, kemudian dimasukkan ke dalam botol vial, pelarutnya diuapkan selama 24 jam. Masing-masing vial dimasukkan 2 mL air laut, 10 μL dimetil sulfoksida (DMSO) sebagai emulsigator, 10 ekor larva udang dan setetes larutan ragi roti, kemudian ditambahkan air laut sampai volumenya menjadi 5 mL, sehingga konsentrasi masing-masing menjadi 100, 50, 25, 12,5 dan 6,25 ppm.<br /><br />Untuk kontrol, ke dalam botol vial dimasukkan 2 mL air laut, 10 μL dimetil sulfoksida, 10 ekor larva A. salina L dan setetes larutan ragi roti, kemudian ditambahkan air laut sampai volumenya menjadi 5 mL. Pengamatan Uji Toksisitas ini untuk mengetahui nilai Lethal Concentration 50 (LC50) dengan menghitung jumlah larva A. salina yang mati setelah perlakuan dengan pemberian ekstrak senyawa dengan konsentrasi berbeda dari S. cristaefolium setelah 24 jam dari perlakuan. Secara singkat prosedur uji BSLT penentuan LC50 ditampilkan dalam Lampiran 2.<br /><br />Analisis Hasil Uji Toksisitas<br /><br />Efek toksisitas dianalisis dari pengamatan dengan persen kematian dengan rumus perhitungan sebagai berikut ini :<br /><br /><br />Dengan mengetahui kematian larva A. salina, kemudian dicari angka probit melalui tabel dan dibuat persamaan garis :<br /><br />Dari persamaan tersebut kemudian dihitung LC50 dengan memasukkan nilai probit (50 % kematian). Apabila pada kontrol ada larva yang mati, maka % kematian ditentukan dengan rumus Abbot (Meyer et al., 1982).<br /><br /></span><div style="text-align: center;"><span class="fullpost"><span style="font-weight: bold;">HASIL DAN PEMBAHASAN</span></span><br /></div><span class="fullpost"><br />Hasil Uji Toksisitas Metode BSLT<br /><br />Hasil pengamatan mortalitas A. salina dalam uji toksisitas dengan metode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT) setelah 24 jam pada ekstrak kasar S. cristaefolium yang larut dalam kloroform, aseton dan metanol disajikan dalam lampiran 3. Dari data hasil pengamatan tersebut diperoleh persentase mortalitas hewan uji dari masing-masing konsentrasi ekstrak yang diujikan. Berdasarkan data tersebut dilakukan perhitungan dan analisa probit dengan program SPSS13 untuk mencari nilai LC50 dari masing-masing ekstrak yang diujikan.<br /><br />A. salina L mempunyai peranan yang penting dalam aliran energi dan rantai makanan. Spesies invertebrata ini umumnya digunakan sebagai organisme sentinel sejati berdasarkan pada penyebaran, fasilitas sampling, dan luasnya karakteristik ekologi dan sensifitasnya terhadap bahan kimia (Calleja and Persoone, 1992).<br /><br />Hasil perhitungan analisa probit ekstrak kloroform, aseton dan metanol dari S. cristaefolium disajikan pada Tabel 5.2 sebagai berikut :<br /><br />Tabel 5.2. Hasil perhitungan uji BSLT ekstrak kloroform, aseton dan metanol dari S. cristaefolium<br /><br />Persentase mortalitas hewan uji larva A. salina pada ekstrak kloroform berkisar antara 72-82 %. Pada konsentrasi 6,25 ppm persentase mortalitas sebesar 72 %, konsentrasi 12,5 ppm mortalitas sebesar 70 %, konsentrasi 25 ppm mortalitas sebesar 80 %, konsentrasi 50 ppm mortalitas sebesar 82 % dan konsentrasi 100 ppm mortalitas sebesar 80 %.<br /><br />Dari data persentase mortalitas larva A. salina pada ekstrak kloroform tersebut, dapat dibuat grafik yang menunjukkan hubungan antara persentase mortalitas dengan konsentrasi (dosis) ekstrak yang larut dalam kloroform seperti pada grafik Gambar 5.1 berikut ini.<br /><br />Gambar 5.1. Hubungan persentase mortalitas dengan konsentrasi ekstrak kloroform dari S cristaefolium.<br /><br />Grafik diatas menujukkan bahwa konsentrasi dosis ekstrak kloroform pada 6,25 ppm dimana mortalitas mencapai 72 persen. Pada konsentrasi dosis 12,5 ppm terjadi penurunan mortalitas menjadi 70 persen tetapi kembali meningkat pada konsentrasi 25 ppm sebesar 80 persen. Sedangkan pada konsentrasi 50 ppm meningkat sebesar 82 persen dan kemudian menurun sebesar 80 persen pada konsentrasi 100 ppm. Penurunan mortalitas dengan semakin meningkatnya konsentrasi ini diduga karena ekstrak kasar masih banyak mengandung senyawa yang bekerja saling kontraproduktif satu sama lainnya. Nilai LC50 ekstrak kloroform dari hasil analisa probit dengan selang kepercayaan p = 0.00 adalah 1.88 ppm yang berarti mortalitas hewan uji mencapai 50% pada saat konsentrasi ekstrak senyawa mencapai 1.88 ppm. Nilai LC50 ini termasuk dalam kategori sangat toksik karena nilai LC50-nya dibawah 30 ppm.<br /><br />Untuk hasil persentase mortalitas larva A. salina pada ekstrak aseton berkisar antara 88-96 %. Pada konsentrasi 6,25 ppm persentase mortalitas sebesar 90 %, konsentrasi 12,5 ppm mortalitas sebesar 88 %, konsentrasi 25 ppm mortalitas sebesar 92 %, konsentrasi 50 ppm mortalitas sebesar 90 % dan konsentrasi 100 ppm mortalitas sebesar 96 %. Hubungan antara persentase mortalitas dengan konsentrasi ekstrak aseton disajikan pada Gambar 5.2 berikut ini.<br /><br />Gambar 5.2. Hubungan persentase mortalitas dengan konsentrasi dosis ekstrak aseton dari S cristaefolium.<br /><br />Berdasarkan nilai LC50 hasil analisa probit dengan selang kepercayaan p = 0.00 pada ekstrak aseton yaitu sebesar 3,97 ppm menunjukkan bahwa angka mortalitas hewan uji mencapai 50% pada saat konsentrasi ekstrak senyawa mencapai 3,97 ppm. Berdasarkan nilai LC50 maka ekstrak aseton termasuk dalam kategori sangat toksik karena berada dibawah 30 ppm (Meyer et. al, 1982).<br /><br />Hasil uji toksisitas ekstrak metanol, menunjukkan persentase mortalitas larva A. salina berkisar antara 80-92 %. Secara berurutan, konsentrasi 6,25 ppm persentase mortalitas sebesar 80 %, konsentrasi 12,5 ppm mortalitas sebesar 84 %, konsentrasi 25 ppm mortalitas sebesar 92 %, konsentrasi 50 ppm mortalitas sebesar 90 % dan konsentrasi 100 ppm mortalitas sebesar 92 %. Grafik hubungan antara persentase kematian dengan konsentrasi dosis ekstrak metanol disajikan pada Gambar 5.3 berikut ini.<br /><br />Gambar 5.3. Hubungan persentase mortalitas dengan konsentrasi ekstrak metanol dari S. cristaefolium.<br /><br />Hasil analisa probit dengan selang kepercayaan p = 0.00 diperoleh nilai LC50 dari ekstrak metanol yaitu sebesar 3.02 ppm. Ini berarti bahwa mortalitas hewan uji sebesar 50 persen dicapai pada saat konsentrasi dosis ekstrak metanol sebsar 3.02 ppm. Berdasar pada nilai LC50 ini maka ekstrak metanol dikategorikan sebagai sangat toksik.<br /><br />Dari hasil analisa data uji toksisitas ini, memperlihatkan bahwa semakin besar nilai konsentrasi dosis ekstrak, maka mortalitas larva A. salina juga semakin besar. Hal ini sejalan dengan Harbone (1994), bahwa semakin tinggi konsentrasi ekstrak maka sifat toksiknya juga semakin tinggi. Mortalitas pada perlakuan pemberian ekstrak disebabkan oleh pengaruh sifat toksik dari ekstrak yang terlarut dalam media hidup larva tersebut.<br /><br />Menurut Meyer et. al, (1982) tingkat toksisitas dari ekstrak tanaman dapat ditentukan dengan melihat harga LC50-nya. Suatu ekstrak dianggap sangat toksik bila memiliki nilai LC50 di bawah 30 ppm, dianggap toksik bila memiliki nilai LC50 30-1000 ppm dan dianggap tidak toksik bila nilai LC50 di atas 1000 ppm. Tingkat toksisitas tersebut akan memberi makna terhadap potensi aktivitasnya sebagai antitumor. Semakin kecil harga LC50 semakin toksik suatu senyawa.<br /><br />Lebih jauh, Meyer (1982) dan Anderson (1991) menjelaskan bahwa aktifitas ketoksikan suatu ekstrak dalam BSLT jika ekstrak dapat menyebabkan kematian 50% larva uji pada konsentrasi kurang dari 1000 ppm. Dengan demikian, berdasarkan nilai LC50 yang diperoleh dari ketiga ekstrak yang diujikan maka dinyatakan bersifat sangat toksik. Ekstrak kloroform mencapai nilai LC50 pada konsentrasi 1,88 ppm, ekstrak aseton pada konsentrasi 3,97 ppm dan ekstrak metanol pada konsentrasi 3,02 ppm. <br /><br />Ekstrak yang paling toksik dapat dilihat dari kemampuan menyebabkan kematian hewan uji yang lebih besar dengan semakin kecilnya konsentrasi. Hal ini menunjukkan bahwa secara berturut-turut ekstrak paling toksik berdasarkan nilai LC50 adalah ekstrak kloroform dengan nilai 1,88 ppm, diikuti oleh ekstrak metanol dengan nilai 3,02 ppm dan ekstrak aseton dengan nilai 3,97 ppm.<br /><br />Berdasarkan data tersebut, ketiga fraksi ekstrak kasar yang diujikan dari alga coklat S. cristaefolium ini memperlihatkan bahwa ketiga ekstrak dapat dikategorikan sangat toksik karena memiliki nilai LC50 dibawah 30 ppm.<br /><br />Senyawa bioaktif selalu selalu toksik pada dosis tinggi. Oleh karena itu, daya bunuh in vivo dari senyawa dari organisme hewan dapat digunakan untuk menapis ekstrak tumbuhan yang mempunyai bioaktifitas dan juga untuk memonitor fraksi bioaktif selama fraksinasi dan pemurnian (Meyer. et al. 1982).<br /><br />Persentase mortalitas A. salina oleh ekstrak kloroform memperlihatkan nilai LC50 yang lebih toksik (1,88 ppm) disebabkan karena senyawa-senyawa non polar yang terlarut dalam ekstrak kloroform tersebut memiliki ukuran yang lebih kecil sehingga lebih mudah untuk masuk dalam membran sel melalui proses difusi pada daerah ekor (tail) yang bersifat hidropobik pada phospolipid bilayer. Hal ini mengakibatkan sel lebih cepat mengalami kerusakan atau mati dalam proses difusi senyawa-senyawa non polar dari ekstrak kloroform. Disisi lain, senyawa-senyawa polar tidak mudah berdifusi memasuki dinding sel (membran) dimana senyawa polar ini berada pada posisi kepala (head) yang bersifat hidropilik. Hal ini mengakibatkan senyawa polar lebih sulit untuk masuk dalam dinding sel sehingga nilai ketoksikan senyawa polar lebih rendah daya rusaknya terhadap sel.<br /><br />Proses difusi pada sel terjadi akibat kecenderungan dari substansi yang bergerak dari daerah dengan konsentrasi tinggi ke daerah dengan konsentrasi yang rendah. Struktur membran sel yang memiliki dua lapisan lipid (phospolipid bilayer) dimana molekul lipid mempunyai satu bagian kepala bundar yang polar (globular head polar) yang mengandung grup NH3 pada bagian luar dan daerah dua ekor yang mengandung asam lemak non polar yang bersifat hidropobik pada permukaan bagian dalamnya memudahkan molekul-molekul non polar berdifusi sedangkan molekul polar tidak bisa berdifusi langsung.<br /><br />Pelarut non polar hanya dapat melarutkan senyawa-senyawa non polar sehingga pelarut polar tidak dapat bercampur dengan pelarut non polar didalam phospolipid bilayer. Pelarut polar tidak dapat memasuki membran sel lipid tampa bantuan dari protein pembawa (carrier). Tidak semua molekul dapat memasuki membran phospolipid termasuk gradient elektrokimia dan ukurannya. Molekul yang lebih kecil dan non polar dapat dengan mudah masuk ke dalam phospolipid bilayer lewat proses difusi karena kesamaan polaritasnya. Sedangkan pelarut molekul polar tidak dapat masuk dalam membran plasma hanya dengan proses difusi, melainkan dengan proses endocytosis, difusi yang difasilitasi dan transport aktif (Prashant, et. al., 2009)<br /><br />Salah satu organisme yang sangat sesuai dengan hewan uji tersebut adalah Brine Shrimp (udang laut). Brine shrimp test sudah digunakan untuk berbagai sistem bioassay yaitu untuk menganalisa residu pestisida, mikotoksin, polutan pada air sungai, ananstetik, toksik dinoflagellata senyawa yang berupa morfin, tosksisitas pada dispersant minyak dan kokarsinogenik ester phorbol. Dalam fraksinasi yang diarahkan dengan bioassay, metode brine shrimp telah digunakan untuk memonitor fraksi aktif mikotoksin dan antobiotik pada ekstrak jamur (Abdi, 2001 dalam Lenny, 2006)<br /><br />Uji tahap lanjut untuk mengisolasi dan mengidentifikasi senyawa flavonoid yang terdapat dalam ekstrak yang aktif dilakukan pada ekstrak metanol dari S. cristaefolium karena ekstrak metanol merupakan ekstrak yang bersifat polar. Pelarut polar memiliki kemampuan yang lebih baik dalam melarutkan senyawa organik dari bahan alam terutama senyawa fenol dan flavonoid. (Harbone, 1987)<br /><br /></span><div style="text-align: center;"><span class="fullpost"><span style="font-weight: bold;">KESIMPULAN DAN SARAN</span></span><br /></div><span class="fullpost"><br />Kesimpulan<br /><br />Berdasarkan hasil penelitian uji toksisitas ekstrak metanol alga coklat S. cristaefolium maka dapat diambil kesimpulan sebagai berikut :<br /><br />1. Hasil uji toksisitas dengan metode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT) ekstrak kasar senyawa dari S. cristaefolium diperoleh nilai LC50 dari masing-masing ekstrak yaitu ekstrak kloroform sebesar 1, 88 ppm yang merupakan ekstrak paling toksik, diikuti oleh ekstrak metanol dengan nilai sebesar 3,20 ppm dan ekstrak aseton sebesar 3,97 ppm.<br />2. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa ketiga ekstrak senyawa dari S. cristaefolium mempunyai prospek dapat dikembangkan sebagai sumber senyawa bioaktif dalam dunia farmasi, misalnya sebagai antitumor atau antikanker.<br /><br />Saran<br /><br />Perlu adanya penelitian lebih lanjut terhadap masing-masing ekstrak (kloroform, aseton dan metanol) dengan menggunakan konsentrasi (dosis) dibawah 6,25 ppm terkait dengan potensi dan prospeknya sebagai sumber senyawa bioaktif bahan alam yang memiliki peran dalam dunia farmasi mengingat sifatnya yang sangat toksik.<br /><br />Selain itu, disarankan untuk melakukan kajian-kajian terhadap manfaat alga coklat S. cristaefolium sehingga dapat dimanfaatkan secara optimal. S. cristaefolium pada saat ini belum dimanfaatkan dengan optimal meskipun jumlahnya sangat melimpah diperairan laut Indonesia. Pemanfaatan S. cristaefolium dalam rangka meningkatkan kesejahteraan masyarakat secara luas.<br /><br /></span><div style="text-align: center;"><span class="fullpost"><span style="font-weight: bold;">PUSTAKA</span></span><br /></div><span class="fullpost"><br /><span style="font-weight: bold; font-style: italic;">Fahri, M, 2010. Thesis. Unpublication</span>.<br /><br /></span><div class="blogger-post-footer">MEMUSNAHKAN TANDA TANYA ANDA. THANKS BRO !</div>Thailand aik aikhttp://www.blogger.com/profile/10964108109700651247noreply@blogger.com6tag:blogger.com,1999:blog-2030866544649181977.post-33925037957778463892010-10-05T02:44:00.003+07:002010-10-05T02:52:54.170+07:00KAJIAN KANDUNGAN METABOLIT SEKUNDER DARI ALGA COKLAT Sargassum cristaefolium<div style="text-align: center;"><span style="font-weight: bold;">Oleh : Muhammad Fahri, S.Pi. M.Pi</span><br /></div><br /><br /><div style="text-align: center;"><span style="font-weight: bold;">PENDAHULUAN</span><br /></div><br />Sargassum cristaefolium.<br /><br />Alga coklat Sargassum cristaefolium merupakan salah satu marga Sargassum termasuk dalam kelas Phaeophyceae. Ada 150 jenis Marga Sargassum yang dijumpai di daerah perairan tropis, subtropis dan daerah bermusim dingin (Nizamuddin, 1970). Habitat alga Sargassum tumbuh diperairan pada kedalaman 0,5–10 m, ada arus dan ombak.<br /><br />Pertumbuhan alga ini sebagai makro alga bentik melekat pada substrat dasar perairan. Di daerah tubir tumbuh membentuk rumpun besar, panjang thalli utama mencapai 0,5-3 m dengan untaian cabang thalli terdapat kantong udara (bladder), selalu muncul di permukaan air. (www.rumputlaut.org).<br /><br />Di Indonesia diperkirakan terdapat lebih dari 15 jenis alga Sargassum dan yang telah dikenal mencapai 12 jenis. Sedangkan di perairan Indo-Pasifik tercatat 58 jenis. Alga Sargassum tumbuh sepanjang tahun, alga ini bersifat “perenial” atau setiap musim barat maupun timur dapat dijumpai di berbagai perairan (Bosse, 1928).<br /><br />Sargassum secara ekologis ikut andil dalam pembentukan ekosistem terumbu karang dan merupakan tempat asuhan bagi biota kecil, termasuk untuk perlindungan benih ikan dan benur udang serta sarang melekatnya telur cumi-cumi. Marga Sargassum mengandung bahan alginat dan iodin, bermanfaat sebagai bahan industri makanan, farmasi, kosmetik dan tekstil. (www.rumputlaut.org)<br /><br />Morfologi dan Penyebaran S. cristaefolium<br /><span class="fullpost"><br />Sargassum spp. ada sekitar 400 spesies di dunia, sedangkan di Indonesia dikenal ada 12 jenis, yaitu: Sargassum duplicatum, S. hitrix, S. echinocarpum, S. gracilinum, S. obtuspfolium, S. binderi, S. polyceystum, S. microphylum, S. crassifolium, S. aquafolium, S. vulgare, dan S. polyceratium. Hormophysa di Indonesia dijumpai satu jenis yaitu Hormophysa tricuetra dan Turbinaria spp. ada 4 jenis yaitu Turbinaria conoides, T. conoides, T. ornata, T. murrayana dan T. deccurens. Sargassum spp. bersifat kosmopolitan, tersebar hampir diseluruh perairan Indonesia. Penyebaran Sargassum spp. di alam sangat luas terutama di daerah rataan terumbu karang di semua wilayah perairan pantai (DirJen Perikanan Budidaya DKP RI, 2009).<br /><br />Sargassum tumbuh dari daerah intertidal, subtidal sampai daerah tubir dengan ombak besar dan arus deras. Karakteristik daerah untuk pertumbuhan yaitu kedalamam 0,5–10 m, suhu perairan 27,25 – 29,30 oC dan salinitas 32–33,5 ‰. Kebutuhan intensitas cahaya matahari marga Sargassum lebih tinggi dari pada marga alga merah. Boney (1965) menyatakan pertumbuhan Sargassum membutuhkan intensitas cahaya matahari berkisar 6500–7500 lux. Sargassum tumbuh berumpun dengan untaian cabang-cabang. Panjang thalli utama mencapai 1–3 m dan tiap-tiap percabangan terdapat gelembung udara berbentuk bulat yang disebut “Bladder,” berfungsi untuk menopang cabang-cabang thalli terapung ke arah permukaan air dalam mendapatkan intensitas cahaya matahari.<br /><br />Spesifikasi khusus dari Sargassum cristaefolium C. Agardh yaitu mempunyai thalli bulat pada batang utama dan agak gepeng pada percabangan, permukaan halus atau licin. Percabangan dichotomous dengan daun bulat lonjong, pinggir bergerigi, tebal dan duplikasi (double edged). Vesicle melekat pada batang daun, bulat telur atau elip, bentuk bladder bulat lonjong (Tetsuro Ajisaka, 2006). Marfologi dari Sargassum cristaefolium C. Agardh dapat dilihat pada Gambar 2.1 berikut ini.<br /><br />Taksonomi S. cristaefolium<br /><br />Berdasarkan hierarki taksonomi Sargassum cristaefolium C. Agardh 1820 menurut NODC Taxonomic Code, database (version 8.0) (1996) adalah sebagai berikut :<br />Domain : Eukaryota - Whittaker & Margulis,1978<br />Kingdom : Chromista - T. Cavalier-Smith, 1981<br />Subkingdom : Chromobiota - Cavalier-Smith, 1991<br />Infrakingdom : Heterokonta - (Cavalier-Smith, 1986) Cavalier-Smith, 1995<br />Phylum : Ochrophyta - (Cavalier-Smith, 1986) T. Cavalier-Smith, 1995<br />Subphylum : Phaeista - Cavalier-Smith, 1995<br />Infraphylum : Chrysista - (Cavalier-Smith, 1986) Cavalier-Smith, 1995<br />Superclass : Phaeistia - Cavalier-Smith, 1995<br />Class : Phaeophyceae<br />Order : Fucales - Kylin<br />Family : Sargassaceae<br />Genus : Sargassum<br />Specific descriptor : cristaefolium - C. Agardh<br />Scientific name : Sargassum cristaefolium C. Agardh<br /><br />Sumber : NODC Taxonomic Code, database (version 8.0)<br />Acquired : 1996<br /><br />Kandungan S. cristaefolium C. Agardh<br /><br />Rumput laut merupakan makro alga laut primitif, mendukung fotosintesis kehidupan di laut atau di perairan payau. Alga ini diklasifikasikan berdasarkan kandungan pigmen dalam 4500 spesies dari alga merah (Rhodophyta) dengan pigmen r-phycoerythrin dan c-phycocyanin; selain itu 3000 spsies dari alga coklat (Phaeophyta) memiliki pigmen seperti xanthophylls dan fucoxanthins, dan sejumlah 7000 spesies dari alga hijau (Chlorophyta) dengan chlorophyll a dan b, karoten dan beberapa xanthophills. (Dring, 1982)<br /><br />Rumput laut mengandung komponen penting yang dibutuhkan dalam proses fisiologis hewan dan manusia. Rumput laut kaya akan karbohidrat, protein, lipid dan mineral dan tidak menyebabkan kerusakan pada paru-paru, ginjal, perut dan usus (Katheresan, 1992). Sehingga dapat digunakan sebagai suatu sumber potensial pangan fungsional.<br /><br />Secara umum, rumput laut mempunyai kandungan nutrisi cukup lengkap. Secara kimia rumput laut terdiri dari air (27,8%), protein (5,4%), karbohidrat (33,3%), lemak (8,6%) serat kasar (3%) dan abu (22,25%). Selain karbohidrat, protein, lemak dan serat, rumput laut juga mengandung enzim, asam nukleat, asam amino, vitamin (A, B, C, D, E dan K) dan makro mineral seperti nitrogen, oksigen, kalsium dan selenium serta mikro mineral seperti zat besi, magnesium dan natrium. Kandungan asam amino, vitamin dan mineral rumput laut mencapai 10 -20 kali lipat dibandingkan dengan tanaman darat (Anonim, 2009). Kandungan nutrien dan potensi zat-zat yang terdapat dalam alga laut, khususnya Sargassum belum banyak diteliti (Mulyo, 2009).<br /><br />Jenis rumput laut yang banyak digunakan untuk pembuatan obat adalah alga coklat khususnya Sargasum dan Turbinaria. Pengolahan rumput laut jenis tersebut menghasilkan ekstrak berupa senyawa natrium alginat. Senyawa alginat inilah yang dimanfaatkan dalam pembuatan obat antibakteri, antitumor, penurunan darah tinggi dan mengatasi gangguan kelenjar (Parveen dan Viqar, 2002).<br /><br />Menurut Parveen dan Viqar (2002), komposisi proksimat dari penelitian berdasarkan persentase berat kering beberapa jenis rumput laut mengandung unsur-unsur seperti yang disajikan dalam Tabel. 2.1 berikut ini.<br /><br />Tabel. 2.1. Komposisi Biokimia dari Beberapa Rumput Laut (Parveen dan Viqar, 2002).<br /><br />Senyawa Bioaktif dari S. cristaefolium C. Agardh<br /><br />Sitotoksisitas dari tumbuhan alam menjadi pertimbangan sebagai penyedia dari kandungan agen antitumor. Antitumor potensial menjadi harapan umumnya dari alga laut telah diteliti dan aktifitas penghambatan yang kuat terdapat dalam spesies Undaria pinnatifida, Laminaria dan Sargassum (Ohigashi et. al., 1992; Yamamoto et.al., 1974). Aktifitas antitumor dari fucoidan atau fucan dari alga coklat, spesies Laminaria dan Sargassum thumbergii juga telah dilaporkan dalam hewan uji tikus dengan karsinoma Ehrlich (Chida & Yamamoto, 1987; Ito & Sugiura, 1976; Zhuang, et.al., 1995). Fucan, sebuah polysacharide sulphate (HF) dari alga coklat Ascophyllum nodosum menunjukkan efek antitumor dan antipoliferasi baik secara in-vitro maupun in-vivo terhadap non-small-cell human broncho-pulmonary carcinoma (NSCLC-N6) dan sangat berpotensi sebagai agen antitumor dalam terapi kanker (Riou, et.al., 1996). Efek antitumor dari ekstrak Sargassum kjellmanianum juga telah dilaporkan (Iizima-Mizui et.al, 1985; Yamamoto et.al., 1981) masing-masing pada sulphate fucose mengandung polyscharide (Nagumo et.al, 1988, Yamamoto et.al, 1984). Fraksi dari polyscharide sulphate dari Sargassum fulvellum menunjukkan efek penghambatan tumor terhadap sarcoma-180 yang disuntikkan pada tikus (Yamamoto et.al., 1977).<br /><br />Mortalitas Artemia pada larutan ekstrak E. alvarezii yang terlarut pada metanol dan kloroform, membuktikan adanya metabolisme sekunder yang bersifat polar dan nonpolar. Senyawa metabolit sekunder dari alga yang bersifat polar adalah flavonoid dan alkaloid, sedangkan senyawa yang bersifat non-polar adalah terpenoid dan steroid (Sastrohamidjojo, 1985).<br /><br />Alginat adalah garam dari asam alginic, suatu co-polymer linier dari b-1, asam 4-D-mannuronic dan a-1, asam 4-L-guluronic, dengan residu diorganisir dari kelompok asam polyguluronic dan polymannuronic, seperti sequens heteropolymeric dari asam guluronic dan mannuronic. Alginat dilaporkan dapat merangsang produksi cytokines, tumour necrosis factor-a, interleukin-1 dan interleukin-6 dari monocytes manusia (Otterlei et al., 1991; Espevik et al., 1993), dan tidak bisa dipisahkan dari aktivitas perlawanan antitumor terhadap model tumour murine secara in-vivo (Fujihara et al., 1984; Fujihara & Nagumo, 1992). Suntikan intraperitoneal tunggal dari derivat alginat seperti alginate-DNM (daunomycin) pada tikus B16 menekan tumours subcutaneous yang dihasilkan kecil, tetapi secara signifikan menghalangi pertumbuhan tumor (Al-Shamkhani & Duncan, 1995).<br /><br />Depolymerisasi secara biologi dari alginat adalah mengkatalisasi dengan alginate lyases (EC 4.2.2.3) melalui reaksi β-elimination, membelah rantai molekular dan menciptakan asam uronic yang tak terbungkus pada akhir tanpa pengurangan yang baru (Haugen et al., 1990). Produk akhir adalah campuran dari oligosaccharides pendek, yang menjadi bioaktif dan mempunyai aktivitas antitumour dan antivirus (Boyd & Turvey, 1978; Currie, 1983).<br /><br />Sintesa total dari empat stereoisomer dari amiroxene, dimana hormone pelepasan spermatozoid dan feromon menarik dari Laminaria spp, menunjukkan (1S,2R,3S)-lamiroxene adalah isomer paling aktif. Sintesa total dari (3R,4S)-dictyopterene A, yang merupakan suatu feromon seks dari Dictyopteris Hawaiian sp, menggunakan optis aktif tributylstannylcyclopropane sebagai kunci penghubung ( 2S,3S,5R)-5-[(1R)-1-Hydroxydec-9-enyl]-2-pentyltetrahydrofuran-3-ol151 dan (2S,3S,5S)-5-[(1S)-1-hydroxydec-9-enyl]-2-pentyltetrahydrofuran-3-ol152, keduanya diisolasi dari Notheia anomala. (John Faulkner, 2001).<br /><br />Alga coklat jenis Stypopodium schimperi dari laut Aegean mengandung meroterpenoid schimperiol baru. Seskuiterpena hydroquinones zonarol dan isozonarol dan quinones yang sesuai dengan zonarone dan isozonarone, merupakan hasil metabolit dari Dictyopteris zonaroides, disintesa secara umum dari β-ionone. Struktur dari sporochnol A, penghambat pakan ikan dari alga Caribbean Sporochnus bolleanus, diperoleh dengan sintesa total dari racemate. Dua diastereoisomers dan dari suatu struktur berdasarkan arsenomethionine yang diisolasi dari Sargassum lacerifolium (John Faulkner, 2001)<br /><br /></span><div style="text-align: center;"><span class="fullpost"><span style="font-weight: bold;">PUSTAKA</span></span><br /></div><span class="fullpost"><br /></span><div style="text-align: left;"><span style="font-style: italic; font-weight: bold;" class="fullpost">Fahri, M. 2010. Thesis. Unpublication.</span><br /></div><span class="fullpost"><br /></span><div class="blogger-post-footer">MEMUSNAHKAN TANDA TANYA ANDA. THANKS BRO !</div>Thailand aik aikhttp://www.blogger.com/profile/10964108109700651247noreply@blogger.com3tag:blogger.com,1999:blog-2030866544649181977.post-26526336327158168602010-10-05T02:41:00.001+07:002010-10-05T02:43:57.413+07:00KERANGKA KONSEP PENELITIAN<div style="text-align: center;">ISOLASI DAN IDENTIFIKASI SENYAWA FLAVONOID SERTA UJI TOKSISITAS EKSTRAK METANOL DARI ALGA COKLAT Sargassum cristaefolium<br /><span style="font-weight: bold;">Oleh : Muhammad Fahri, S.Pi. M.Pi</span><br /></div><br /><br /><span style="font-weight: bold;">Kerangka Konsep Teoritis</span><br /><br />Penelitian pendahuluan sangat diperlukan dalam upaya mencari informasi kandungan fitokimia dan potensi senyawa yang dapat menjadi alternatif pemanfaatannya dimasa depan dari bahan alam khususnya dari tumbuhan laut.<br /><br />Untuk mengetahui kandungan senyawa bioaktif flavonoid dari alga coklat S. cristaefolium, belum banyak dilakukan. Sehingga perlu dilakukan pengujian fitokimia yang lebih mendalam untuk mengetahui kandungan senyawa flavonoid pada S. cristaefolium dengan metode isolasi dan identifikasi senyawa, serta pengujian daya toksisitas ekstrak senyawa pada A. salina.<br /><span class="fullpost"><br />Alur kerangka pikir dalam penelitian ini adalah ekstraksi senyawa dengan metode maserasi bertingkat menggunakan pelarut organik dengan tingkat kepolaran berbeda yaitu non polar, semi polar dan polar. Hasil berupa ekstrak kasar masing-masing pelarut tersebut dilakukan uji pre-skrining pada hewan uji dengan uji toksisitas metode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT) untuk mengetahui kemampuan ekstrak senyawa untuk menyebabkan kematian pada hewan uji A. salina L sehingga diketahui nilai LC50 senyawa tersebut. Nilai LC50 adalah kemampuan senyawa dapat menyebabkan kematian hewan uji sebanyak 50 % pada konsentrasi kurang dari 1000 ppm.<br /><br />Ekstrak senyawa yang bersifat toksik dengan konsentrasi kurang dari 1000 ppm dilanjutkan dengan isolasi dan identifikasi untuk mengetahui jenis kandungan senyawa bioaktif yang terdapat dalam ekstrak tersebut. Isolasi dan indentifikasi senyawa flavonoid menggunakan metode Kromatografi Lapis Tipis (KLT), High Pressure Liquid Chromatography (HPLC), Spektroskois Ultraviolet-Cahaya Tampak (UV-vis), Spektroskopis Infrared (FT-IR). <br /><br /><br /></span><div class="blogger-post-footer">MEMUSNAHKAN TANDA TANYA ANDA. THANKS BRO !</div>Thailand aik aikhttp://www.blogger.com/profile/10964108109700651247noreply@blogger.com1tag:blogger.com,1999:blog-2030866544649181977.post-7247449825738692852010-10-05T02:21:00.003+07:002010-10-05T02:39:37.216+07:00ISOLASI DAN IDENTIFIKASI SENYAWA FLAVONOID DARI ALGA COKLAT Sargassum cristaefolium<div style="text-align: center;"><span style="font-weight: bold;">Oleh : Muhammad Fahri, S.Pi. M.Pi</span><br /></div><br /><div style="text-align: center;"><span style="font-weight: bold;">PENDAHULUAN</span><br /></div><br />Isolasi dan Identifikasi Senyawa Metabolit Sekunder<br /><br />Prinsip dari pemisahan (isolasi) adalah adanya perbedaan sifat fisik dan kimia dari senyawa yaitu kecendrungan dari molekul untuk melarut dalam cairan (kelarutan), kecenderungan molekul untuk menguap (keatsirian), kecenderungan molekul untuk melekat pada permukaan serbuk labus (adsorpsi, penserapan) (Harborne, 1987).<br /><br />Salah satu cara pemisahan adalah kromatografi cair vakum, kromatografi cair vakum adalah kromatografi kolom yang dipercepat dan bekerja pada kondisi vakum. Alat yang digunakan terdiri dari corong G-3, sumbat karet, pengisap yang dihubungkan dengan pompa vakum serta wadah penampung fraksi. Corong G-3 diisi adsorben sampai setinggi 2,5 cm, kemudian diketuk-ketuk dengan batang pengaduk bersalut dilarutkan dalam pelarut organik yang cocok, kemudian ke dalam larutan ekstrak tersebut ditambahkan adsorben dengan bobot sama dengan bobot ekstrak. Campuran ini digenis sampai homogen, dikeringkan dan dimasukkan ke dalam corong G-3 kemudian diratakan. Permukaan lapisan adsorben ditutup dengan kertas saring. Elusi diawali dengan pelarut non polar dilarutkan dengan kombinasi pelarut dengan polaritas meningkat. Jumlah pelarut yang digunakan setiap kali elusi untuk bobot ekstrak sampai lima gram diperlukan 25 ml pelarut, untuk 10-30 gram ekstrak diperlukan 50 ml pelarut. Dalam hal ini, diameter corong dipilih sedemikian rupa sehingga lapisan ekstrak dipermukaan kolom setipis mungkin dan rata. Masing-masing pelarut dituangkan ke permukaan kolom kemudian dihisapkan pompa vakum. Masing-masing ekstrak ditampung dalam wadah terpisah sehingga menghasilkan sejumlah fraksi (Soediro, dkk.,1986).<br /><br />Cara lain yang dapat dipakai untuk pemisahan adalah ekstraksi cair-cair, kromatografi kolom, kromatografi lapis tipis dan kromatografi kertas. Isolasi dan pemurnian dapat dilakukan dengan kromatografi lapis tipis atau kromatografi kertas preparatif dengan pengembangan yang dapat memisahkan komponen paling baik (Harborne, 1987).<br /><br />Uji Fitokimia Senyawa<br /><span class="fullpost"><br />Secara umum kandungan metabolit sekunder dalam bahan alam dikelompokkan berdasarkan sifat dan reaksi khas suatu metabolit sekunder dengan pereaksi tertentu. Menurut Harbone (1973), kandungan metabolit sekunder tanaman secara umum dapat dikelompokkan sebagai berikut :<br /><br />a. Alkaloida, golongan senyawa yang mengandung nitrogen dalam bentuk gugus amina, baik primer, sekunder, tersier maupun kuartener.<br />b. Terpenoida/Streoida, golongan senyawa turunan asam mevalanat dengan satuan-satuan isoprena.<br />c. Flavonoid, golongan senyawa fenil propanoid dengan kerangka karbon C6-C3-C6.<br />d. Fenolik, golongan senyawa aromatik dengan substituen gugus hidroksil.<br />e. Saponin, golongan senyawa dalam bentuk glikosida terpenoid/streoid.<br />f. Kumarin, golongan senyawa fenil propanoid dengan kerangka sinamat dasar C6-C3.<br />g. Kuinon.<br /><br />Kromatografi<br /><br />Ketika pelarut mulai membasahi lempengan, pelarut pertama akan melarutkan senyawa-senyawa dalam bercak yang telah ditempatkan pada garis dasar. Senyawa-senyawa akan cenderung bergerak pada lempengan kromatografi sebagaimana halnya pergerakan pelarut. Kecepatan senyawa-senyawa dibawa bergerak ke atas pada lempengan, tergantung pada kelarutan senyawa dalam pelarut. Hal ini bergantung pada besar atraksi antara molekul-molekul senyawa dengan pelarut (Harborne, 1987).<br /><br />Kemampuan senyawa melekat pada fase diam, misalnya gel silika tergantung pada besar atraksi antara senyawa dengan gel silika. Senyawa yang dapat membentuk ikatan hidrogen akan melekat pada gel silika lebih kuat dibanding senyawa lainnya karena senyawa ini terjerap lebih kuat dari senyawa yang lainnya. Penjerapan merupakan pembentukan suatu ikatan dari satu substansi pada permukaan (Harborne, 1987).<br /><br />Penjerapan bersifat tidak permanen, terdapat pergerakan yang tetap dari molekul antara yang terjerap pada permukaan gel silika dan yang kembali pada larutan dalam pelarut. Dengan jelas senyawa hanya dapat bergerak ke atas pada lempengan selama waktu terlarut dalam pelarut. Ketika senyawa dijerap pada gel silika -untuk sementara waktu proses penjerapan berhenti- dimana pelarut bergerak tanpa senyawa. Itu berarti bahwa semakin kuat senyawa dijerap, semakin kurang jarak yang ditempuh ke atas lempengan (Harborne, 1987). Dalam hal ini, senyawa yang dapat membentuk ikatan hidrogen akan menjerap lebih kuat daripada yang tergantung hanya pada interaksi van der Waals, dan karenanya bergerak lebih jauh pada lempengan.<br /><br />Jika komponen-komponen dalam campuran dapat membentuk ikatan-ikatan hydrogen, terdapat perbedaan bahwa ikatan hidrogen pada tingkatan yang sama dan dapat larut dalam pelarut pada tingkatan yang sama pula. Ini tidak hanya merupakan atraksi antara senyawa dengan gel silika. Atraksi antara senyawa dan pelarut juga merupakan hal yang penting dimana hal ini akan mempengaruhi mudahnya proses senyawa ditarik pada larutan keluar dari permukaan silika. Ini memungkinkan senyawa-senyawa tidak terpisahkan dengan baik ketika membuat kromatogram. Dalam kasus itu, perubahan pelarut dapat membantu dengan baik, termasuk memungkinkan perubahan pH pelarut. Ini merupakan tingkatan uji coba, jika satu pelarut atau campuran pelarut tidak berkerja dengan baik, maka dapat mencoba dengan pelarut lainnya (Harborne, 1987).<br /><br />Kromatografi Lapis Tipis (KLT)<br /><br />Kromatografi digunakan untuk memisahkan substansi campuran menjadi komponen-komponennya. Seluruh bentuk kromatografi berkerja berdasarkan prinsip ini. Semua kromatografi memiliki fase diam (dapat berupa padatan, atau kombinasi cairan-padatan) dan fase gerak (berupa cairan atau gas). Fase gerak mengalir melalui fase diam dan membawa komponen-komponen yang terdapat dalam campuran. Komponen-komponen yang berbeda bergerak pada laju yang berbeda (Harborne, 1987).<br /><br />KLT dapat dipakai dengan dua tujuan. Pertama, dipakai selayaknya sebagai metode untuk mencapai hasil kualitatif, kuantitatif, atau preparatif. Kedua, dipakai untuk menjajaki sistem pelarut dan sistem penyangga yang akan dipakai dalam kromatografi kolom atau kromatografi cair kinerja tinggi (Roy, et. all, 1991).<br /><br />Beberapa keuntungan dari kromatografi planar ini menurut Ibnu Gholib Gandjar dan Abdul Rohman (2007) adalah :<br />• Kromatografi lapis tipis banyak digunakan untuk tujuan analisis.<br />• Identifikasi pemisahan komponen dapat dilakukan dengan pereaksi warna, fluorisensi atau dengan radiasi menggunakan sinar ultraviolet.<br />• Dapat dilakukan elusi secara menaik (ascending), menurun (descending), atau dengan cara elusi 2 dimensi.<br />• Ketepatan penentuan kadar akan lebih baik karena komponen yang akan ditentukan merupakan bercak yang tidak bergerak.<br /><br />Pelaksaanan kromatografi lapis tipis menggunakan sebuah lapis tipis silika atau alumina yang seragam pada sebuah lempeng gelas atau logam atau plastik yang keras. Gel silika (atau alumina) merupakan fase diam. Fase diam untuk kromatografi lapis tipis seringkali juga mengandung substansi yang mana dapat berpendarflour dalam sinar ultra violet. Fase gerak merupakan pelarut atau campuran pelarut yang sesuai (Harborne, 1987).<br /><br />Kromatografi lapis tipis adalah metode pemisahan fitokimia. Lapisan yang memisahkan terdiri atas bahan berbutir-butir (fase diam), ditempatkan pada penyangga berupa pelat gelas, logam, atau lapisan yang cocok. Campuran yang akan dipisah, berupa larutan, ditotolkan berupa bercak atau pita (awal), kemudian pelat dimasukkan di dalam bejana tertutup rapat yang berisi larutan pengembang yang cocok (fase gerak). Pemisahan terjadi selama perambatan kapiler (pengembangan) dan selanjutnya senyawa yang tidak berwarna harus ditampakkan (Stahl, 1985).<br /><br />Keuntungan kromatografi lapis tipis adalah dapat memisahkan senyawa yang sangat berbeda seperti senyawa organik alam dan senyawa organik sintesis, kompleks organik dan anorganik serta ion anorganik dalam waktu singkat menggunakan alat yang tidak terlalu mahal. Metode ini kepekaannya cukup tinggi dengan jumlah cuplikan beberapa mikrogram. Kelebihan metode ini jika dibandingkan dengan kromatografi kertas adalah dapat digunakan pereaksi asam sulfat pekat yang bersifat korosif, kelemahannya adalah harga RF yang tidak tetap (Gritten, et. al., 1991).<br /><br />High Pressure Liquid Chromatography (HPLC)<br /><br />High Pressure Liquid Chromatography (HPLC) atau Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT) merupakan salah satu metode kimia dan fisikokimia. KCKT termasuk metode analisis terbaru yaitu suatu teknik kromatografi dengan fasa gerak cairan dan fasa diam cairan atau padat. Banyak kelebihan metode ini jika dibandingkan dengan metode lainnya (Done dkk, 1974; Snyder dan Kirkland, 1979; Hamilton dan Sewell, 1982; Johnson dan Stevenson, 1978).<br /><br />Informasi seperti kelarutan, gugus fungsi yang ada, besarnya berat molekul (BM) dapat diperoleh dari pembuat informasi, pemberi sampel, atau data spektroskopik seperti Nucleic Magnetic Resonance Spectrosphotometer (NMR), Infrared spectrophotometer, ultra violet spectrumeter, dan mass Spectrophotometer. Semua data-data ini dapat digunakan sebagai petunjuk bagi analis memilih tipe HPLC yang tepat untuk digunakan (Johnson dan Stevenson, 1978)<br /><br />Berdasarkan Hukum Dasar "like dissolves like" maka sangat mudah untuk memutuskan tipe KCKT yang akan dipilih. Seleksi tipe KCKT, dengan cepat kita dapat melihat bahwa Berat Molekul (BM) lebih besar dari 2000, maka kita dapat menggunakan kromatografi eksklusi. Fasa geraknya adalah air jika sampelnya larut dalam air; bila dapat larut dalam pelarut organik maka digunakan pelarut- pelarut organik sebagai rasa gerak. Fasa diamnya adalah Sephadex atau Bondagel Seri E untuk rasa gerak air dan Styragel atau MicroPak TSK gel untuk rasa gerak organik. Bila BM lebih rendah dari 2000, pertama yang harus ditentukan adalah apakah sampel dapat larut dalam air. Bila sampel dapat larut dalam air, maka kromatografi partisi rasa terbalik atau kromatografi penukar ion dapat digunakan. Bila kelarutan dipengaruhi oleh penambahan asam atau basa atau bila pH larutan bervariasi lebih dari 2 (dua) satuan pH dari pH 7, maka kromatografi penukar ion adalah pilihan utama. Bila kelambatan tidak dipengaruhi oleh asam dan basa dan larutan sampel adalah netral, maka kromatografi partisi rasa terbalik adalah pilihan terbaik. Tipe Eksklusi menggunakan ukuran poros yang kecil dan rasa air dapat juga dicoba.<br /><br /></span><div style="text-align: center;"><span class="fullpost"><span style="font-weight: bold;">METODELOGI PENELITIAN</span></span><br /></div><span class="fullpost"><br />Uji Fitokimia Metabolit Sekunder<br /><br />a. Pemeriksaan Falvonoid, Fenolik dan Saponin.<br />- Flavonoid, dalam ekstrak air (aqueous extract) ditetesi dengan larutan amoniak encer dan ditetesi asam sulfat pekat. Terbentuknya warna kuning mengindikasikan adanya flavonoid. Cara lain dengan menambahkan HCl pekat dan beberapa butir serbuk magnesium ke dalam ekstrak air. Pewarnaan oranye sampai merah mengindikasikan adanya flavonoid.<br />- Fenolik, ekstrak dalam tabung reaksi ditetesi larutan FeCl3. Pewarnaan biru atau biru keunguan menunjukkan positif fenolik.<br />- Saponin, ekstrak dalam tabung reaksi dikocok kuat, pembentukan busa permanen (sekitar 15 menit) dan tidak hilang dengan penambahan 1 tetes HCl pekat menunjukkan positif adanya saponin.<br /><br />b. Pemeriksaan Alkaloid (Maldoni, 1991)<br />Penambahan larutan kloroform-amoniak 0,05 N pada ekstrak kloroform dalam tabung reaksi kemudian ditambahkan H2SO4 2 N (10-20 tetes). Pemberian pereaksi Meyer (1-2 tetes) dan pereaksi Dragendorff (1-2- tetes). Uji positif alkaloid ditandai dengan adanya endapan putih yang relatif banyak (+4), kabut putih tebal (+3), kabut tipis (+2) dan kabut putih tipis (+1) untuk uji pereaksi Meyer dan pereaksi Dragendorff menunjukkan adanya endapan jingga sampai merah coklat.<br /><br />c. Pemeriksaan Terpenoid/Streoid (Libermann-Burchard : AC2O/H2SO4)<br />Pemberian anhidrida asam asetat (AC2O) sebanyak 1-2 tetes dalam ekstrak kloroform dan sebagai pembanding menggunakan H2SO4 pekat (1-2 tetes). Perubahan warna menjadi merah atau merah keunguan mengindikasikan terpenoid dan hijau atau hijau kebiruan untuk streoid.<br /><br />Uji terpenoid (Salkowski Test) dengan pemberian H2SO4 pekat pada ekstrak kloroform sehingga terbentuk 2 lapisan fasa cair. Terbentuknya warna coklat kemerahan pada antar muka lapisan menunjukkan adanya terpenoid.<br /><br />d. Pemeriksaan Kuinon<br />Kandungan kuinon dalam sampel tumbuhan biasanya ditandai dengan pewarnaan kuning, oranye atau merah. Pemeriksaan kuinon dapat dilakukan dengan cara mengekstraksi sampel dengan eter. Jika warna sampel terekstraksi dalam eter maka boleh jadi zat warna yang muncul adalah kuinon. Selanjutnya jika ekstrak eter ini diekstraksi kembali dengan larutan NaOH 5% ternyata warnanya hilang dan jika ditambahkan dengan asam flourida sampai bereaksi asam ternyata warna semula kembali timbul, maka zat warna dimaksud termasuk kelompok kuinon.<br /><br />d. Pemeriksaan Kumarin<br />Kumarin sederhana biasanya memberikan bau yang enak. Namun dalam banyak hal, karena struktur kerangka kumarin yang berbentuk lakton cincin 6, maka tidak ada reaksi warna atau pengendapan yang spesifik untuk kelompok senyawa ini. Meski demikian keberadaan kumarin dalam sampel dapat dideteksi dengan melakukan KLT ekstrak etanol/metanol, kemudian dielusi dengan pelarut yang sesuai, misalnya, etil asetat-metanol dengan perbandingan 9:1 atau 8:2. Pemeriksaan dibawah lampu UV 360 nm, flourisensi biru menandakan keberadaan kumarin. Jika bercak berflourisensi ini dikenai uap amoniak maka akan terlihat bercak warna kuning.<br /><br />Isolasi Senyawa Bioaktif Flavonoid<br /><br />KLT Kualitatif<br /><br />Kromatografi Lapis Tipis (KLT) menggunakan plat silika gel F254 dengan ukuran 2 X 10 cm. Ekstrak pekat Sargassum cristaefolium ditotolkan pada plat silika dengan jarak 1 cm dari bagian bawah dengan pipa kapiler. Selanjutnya, dikeringkan dan dielusi dalam larutan eluen yang dipersiapkan sesuai dengan tujuan senyawa apa yang akan diisolasi. Larutan eluen ditempatkan pada bejana kaca dengan bagian tutup yang lebar. Selama perendaman bejana ditutup agar media jenuh dengan larutan eluen.<br /><br />Ekstrak akan ditarik ke atas oleh eluen sampai jarak 1 cm dari bagian atas plat. Plat selanjutnya dikeringkan. Pengamatan warna yang muncul dibawah penyinaran sinar ultra violet dengan panjang gelombang 256-366 nm. Plat disemprot dengan dengan pelarut dari campuran vanili 0,25 ml dan etanol 25 ml kemudian disemprotkan dengan H2SO4 bertujuan untuk memperkuat penampakan warna yang muncul pada plat. Untuk mengetahui nilai RF dengan mengukur jarak antara titik awal dengan pusat bercak yang dihasilkan senyawa dan jarak ini kemudian dibagi dengan jarak antara titik awal dan garis depan (jarak yang ditempuh oleh cairan pengembang). Eluen yang memberikan hasil terbaik akan digunakan dalam pemisahan dengan KLT preparatif.<br /><br />KLT Preparatif<br /><br />Pemisahan dengan KLT preparatif menggunakan plat silika gel F254 dengan ukuran 10 X 20 cm. Ekstrak pekat hasil ekstraksi ditotolkan sepanjang plat pada jarak 1 cm dari garis bawah dan 1 cm dari garis tepi. Selanjutnya dielusi dengan menggunakan eluen yang memberikan hasil pemisahan terbaik pada KLT kualitatif. Noda yang diperoleh dikerok dan dilarutkan dengan metanol. Kemudian disentrifuge untuk mengendapkan silikanya. Supernatan yang diperoleh dipekatkan sehingga diperoleh isolat berdasarkan harga RF-nya.<br /><br />Analisa HPLC<br /><br />Uji HPLC kualitatif dilakukan untuk mengetahui komposisi kandungan senyawa yang terkandung dalam ekstrak Sargassum cristaefolium. Untuk memastikan kemurnian dari isolat maka dilakukan analisis dengan menggunakan metode HPLC analitik dengan komposisi gradien (eluen) metanol-air ada kolom fase terbalik (reversed phase) C-18 (RP-18) dan detektor Photo Dioda Array untuk merunut keberadaan senyawa utama. Kemudian dilakukan isolasi senyawa utama dengan HPLC preparatif, Pada penggunaan HPLC preparatif, dibuat gradien seoptimal dan sesingkat mungkin dengan cara mengubah atau mengganti konsentrasi eluen. Selanjutnya, setelah didapatkan senyawa utama, dilakukan penentuan struktur dengan metode spektroskopis.<br /><br />Identifikasi Senyawa Bioaktif Flavonoid<br /><br />Spektrofotometri UV-vis<br /><br />Isolat hasil KLT dimasukkan ke dalam kuvet dan diamati spektrumnya pada panjang gelombang 200-600 nm. Identifikasi dilanjutkan dengan penambahan pereaksi geser NaOH 2 M. AICl3 5 %, NaOAc, H3BO3, kemudian diamati pergeseran puncak serapannya.<br />Tahapan prosedur penggunaan pereaksi geser sebagai berikut :<br />1. Isolat yang diduga sebagai senyawa utama diamati pada panjang gelombang 200-600 nm, direkam dan dicatat hasilnya.<br />2. Isolat dari tahap 1 ditambahkan 3 tetes NaOH 2 M kemudian dikocok sehingga homogen dan diamati hasilnya.<br />3. Isolat tahap 1 ditambahkan 6 tetes pereaksi AICl3 5 % dalam metanol kemudian dicampur hingga homogen dan diamati hasilnya.<br />4. Isolat tahap 1 ditambahkan serbuk NaOAc kira-kira 250 mg, campuran dikocok sampai homogen dan diamati spektrumnya, selanjutnya ditambahkan serbuk H3BO3 kira-kira 150 mg dikocok sampai homogen dan diamati spektrumnya.<br /><br />Spektrometri Infrared<br /><br />Isolat hasil KLT preparatif yang menunjukkan adanya senyawa utama berdasarkan identifikasi dengan spetrofotometri UV-vis diuapkan pelarutnya. Isolat pekat diteteskan pada pelet KBr, dikeringkan kemudian dibuat spektrumnya.<br /><br /></span><div style="text-align: center;"><span class="fullpost"><span style="font-weight: bold;">HASIL DAN PEMBAHASAN</span></span><br /></div><span class="fullpost"><br />Isolasi Senyawa Flavonoid<br /><br />Uji Golongan Senyawa<br /><br />Uji golongan dilakukan terhadap ekstrak metanol sebagai langkah awal untuk mengetahui kandungan senyawa yang terdapat di dalam ekstrak metanol. Hasil uji golongan mengandung senyawa golongan flavonoid, alkaloid, steroid dan terpenoid. Uji golongan yang dilakukan pada ekstrak pekat kloroform, aseton, dan metanol dari S. cristaefolium dengan pereaksi bahan kimia, sebagai berikut :<br /><br />a. Uji H2SO4<br />Ekstrak metanol sebanyak 2 ml, ditetesi H2SO4, terjadi perubahan warna menjadi oranye atau kuning tua. Hal ini mengindikasikan bahwa di dalam ekstrak metanol terdapat senyawa flavon atau flavonoid.<br />Ekstrak aseton, diberi metanol sebanyak 2 ml, ditetesi H2SO4, tidak terjadi perubahan warna sama sekali. Hal ini mengindikasikan bahwa di dalam ekstrak aseton tidak terdapat senyawa flavon.<br /><br />b. Uji Meyer<br />Ekstrak metanol sebanyak 2 ml diberi pereaksi Mayer, terdapat sedikit endapan putih. Hal ini mengindikasikan bahwa terdapat kandungan alkaloid dalam ekstrak metanol.<br />Ekstrak aseton, diberi metanol sebanyak 2 ml, diberi pereaksi Mayer, tidak terdapat endapan sama sekali. Hal ini mengindikasikan bahwa tidak terdapat senyawa alkaloid dalam ekstrak aseton.<br />Ekstrak kloroform, diberi metanol sebanyak 2 ml, diberi pereaksi Mayer, terdapat endapan berwarna putih. Hal ini mengindikasikan bahwa terdapat senyawa alkaloid dalam ekstrak kloroform<br /><br />c. Uji Dragendorff<br />Ekstrak metanol sebanyak 2 ml, ditetesi H2SO4 dan larutan Dragendorff, terdapat endapan berwarna oranye. Hal ini menunjukkan adanya kandungan alkaloid pada ekstrak metanol.<br />Ekstrak aseton sebanyak 2 ml, diperlakukan sama seperti pada ekstrak metanol, tidak terdapat endapan apapun. Hal ini menunjukkan bahwa tidak terdapat senyawa alkaloid pada ekstrak aseton.<br />Ekstrak kloroform sebanyak 2 ml, diperlakukan sama seperti pada ekstrak metanol dan aseton, terdapat endapan berwarna oranye. Hal ini menunjukkan bahwa adanya senyawa alkaloid pada ekstrak kloroform.<br /><br />d. Uji Salkowski<br />Ekstrak metanol sebanyak 2 ml, ditetesi H2SO4 dan kloroform menunjukkan adanya endapan warna merah dan oranye. Hal ini mengindikasikan adanya senyawa terpenoid atau steroid.<br />Ekstrak aseton sebanyak 2 ml, ditetesi metanol, H2SO4 dan kloroform tidak ada endapan sama sekali. Hal ini menunjukkan bahwa ekstrak aseton tidak mengandung senyawa terpenoid ataupun steroid.<br />Ekstrak kloroform, diberi metanol sebanyak 2 ml, ditetesi H2SO4 dan kloroform terjadi endapan berwarna merah dan oranye. Hal ini menunjukkan bahwa di dalam ekstrak kloroform terdapat senyawa terpenoid atau steroid.<br /><br />Uji golongan fitokimia senyawa dari ekstrak kasar S. cristaefolium sebagai uji pendahuluan dan panduan dasar keberadaan senyawa bioaktif flavonoid dalam rangka isolasi. Dari berbagai uji fitokimia terhadap ekstrak kasar masing-masing pelarut dapat dilihat bahwa unktuk ekstrak kloroform mengandung senyawa flavonoid, alkaloid dan terpenoid serta streoid. Ekstrak aseton tidak terbentuk endapan dari pereaksi pendeteksi yang dilakukan sehingga tidak mengindikasikan keberadaan senyawa yang dituju. Ekstrak methanol diduga memiliki kandungan flavonoid, flavon, alkaloid, terpenoid dan steroid berdasarkan reaksi senyawa terhadap pereaksi pendeteksi yang diujikan. Secara ringkas, hasil uji golongan ekstrak dapat dilihat pada Tabel 5.3 sebagai berikut :<br /><br />Tabel 5.3. Hasil Uji Golongan Senyawa Ekstrak Kasar S. cristaefolium<br /><br />Hasil uji golongan (fitokimia) yang dilakukan, menunjukkan bahwa senyawa kimia berupa senyawa metabolit sekunder yang terdapat pada ekstrak S. cristaefolium mengandung senyawa flavonoid. Harbone (1987) menjelaskan bahwa pada uji fitokimia terhadap senyawa golongan flavonoid akan menunjukkan hasil positif dengan terjadinya perubahan warna berupa warna kuning. Hal ini dibuktikan dengan pembentukan warna yang ditunjukkan pada Gambar 5.4 yaitu warna kuning.<br /><br />Gambar 5.4. Hasil uji fitokimia flavonoid ekstrak metanol S. cristaefolium.<br /><br />Kromatografi Lapis Tipis<br /><br />Berdasarkan hasil uji toksisitas dengan A. salina (uji pre-skrining) diketahui bahwa ekstrak metanol merupakan ekstrak yang mempuyai aktifitas yang sangat aktif (sangat toksik) dengan nilai LC50 sebesar 3,02 ppm. Pada uji golongan ekstrak metanol juga mengandung beberapa senyawa diantaranya flavonoid, flavon, alkaloid, terpenoid dan steroid. Pelarut metanol merupakan pelarut yang bersifat polar. Pelarut polar memiliki kemampuan yang lebih baik dalam melarutkan senyawa organik dari bahan alam terutama senyawa fenol dan flavonoid. (Harbone, 1987).<br /><br />Dengan demikian, uji tahap lanjut untuk mengisolasi dan mengidentifikasi senyawa flavonoid yang terdapat dalam ekstrak yang aktif dilakukan pada ekstrak metanol dari S. cristaefolium. Ekstrak metanol dilanjutkan ke tahap pemisahan dan pemurnian selanjutnya dengan Kromatografi Lapis Tipis (KLT) kualitatif dan preparatif.<br /><br />Analisa pemisahan senyawa dari ekstrak metanol dengan Kromatografi Lapis Tipis (KLT) kualitatif menggunakan beberapa eluen. Markham (1988), bahwa eluen yang digunakan untuk memisahkan komponen dari bahan alam yang diduga mengandung senyawa flavonoid adalah n-butanol : asam asetat : air (BAA) dengan komposisi (4:1:5), dan metanol : kloroform (7:3). Penggunaan berbagai macam komposisi dan eluen ini dimaksudkan mampu untuk memisahkan senyawa flavonoid yang terkandung dalam S. cristaefolium. Hasil KLT kualitatif berupa pola pemisahan pada kromatogram dari berbagai eluen yang digunakan. Berdasarkan pola kromatogram yang terbentuk pada plat silika gel dapat ditentukan resolusi senyawa flavonoid dan jenis flavonoid yang terdapat dalam ekstrak.<br /><br />Eluen yang digunakan pada KLT kualitatif ini adalah n-butanol : asam asetat : air (BAA) dengan komposisi (4:1:5), metanol : kloroform (7:3), asam asetat : benzene (2:8), etil asetat : n-heksan (7:5) dan toluen : eter : asam asetat (10:10:2). Hasil KLT kualitatif dengan beberapa eluen tersebut disajikan dalam Table 5.4.<br /><br />Tabel 5.4. Hasil KLT kualitatif beberapa eluen dari ekstrak metanol S. cristaefolium.<br /><br />Hasil pemisahan secara KLT kualitatif menunjukkan bahwa eluen yang memberikan hasil terbaik adalah toluen : eter : asam asetat (10:10:2) mampu memberikan resolusi terbaik, terlihat dari terbentuknya noda yang terpisah dan jumlah noda yang paling banyak yaitu 9 noda. Campuran eluen lain yang menghasilkan noda adalah etil asetat : n-heksan (7:5) tetapi tidak mampu memisah dengan baik noda yang masih berhimpitan dan jumlah noda hanya 3 noda. Sedangkan eluen lainnya tidak dapat memisahkan senyawa yang terlihat dari gerak senyawa yang membentuk garis lurus. Dengan demikian, eluen terbaik yang digunakan dalam pemisahan senyawa flavonoid pada analisa Kromatografi Lapis Tipis (KLT) preparatif adalah eluen campuran toluen : eter : asam asetat (10:10:2).<br /><br />Hasil pemisahan dengan Kromatografi Lapis Tipis (KLT) preparatif hampir sama dengan KLT kualitatif hanya berbeda pada kuantitas ekstrak lebih banyak yang digunakan. Penggunaan plat silika gel dengan ukuran yang besar dan lebih banyak. Noda-noda yang dihasilkan pada KLT preparatif ditandai selanjutnya dikerok dan dilarutkan pada pelarut metanol. Isolat yang diperoleh tersebut kemudian diidentifikasi dengan spektrofotometri UV-visual dan Inframerah (FT-IR).<br /><br />Gambar 5.5. Kromatogram hasil KLT preparatif ekstrak metanol S. cristaefolium.<br /><br />Keterangan :<br />fase gerak : toluen : eter : asam asetat (10:10:2)<br />fase diam : plat silika gel GF254<br />sinar UV : 366 nm<br /><br />HPLC<br /><br />Data hasil analisa HPLC kualitatif terhadap ekstrak metanol S. cristaefolium menunjukkan bahwa puncak utama senyawa yang terdapat dalam ekstrak metanol berada pada puncak kedua dengan waktu retensi (waktu hambat/tambat) 20.03 menit serta area persentase senyawa sebesar 38.505 %. Puncak ini pada KLT kualitatif mempunyai nilai Rf 0.88 cm dan menunjukkan warna oranye keungunan menyala pada sinar UV 366 nm. Sedangkan puncak yang juga menunjukkan warna oranye menyala pada sinar UV 366 nm hasil KLT kualitatif dengan nilai Rf 0.77 ditunjukkan oleh puncak keempat pada hasil HPLC dengan waktu retensinya 29.92 menit dan area persentase senyawa sebesar 7.757 %.<br /><br />Hasil analisa HPLC kualitatif terhadap ekstrak metanol S. cristaefolium disajikan dalam bentuk grafik pada Gambar 5.6 sebagai berikut.<br /><br />Gambar 5.6. Hasil HPLC ekstrak metanol S. cristaefolium.<br /><br />Identifikasi Senyawa Flavonoid<br /><br />Identifikasi Pendahuluan<br /><br />Identifikasi pendahuluan terhadap warna kromatogram pada plat silika gel hasil KLT kualitatif berdasarkan penampakan warna kromatogram yang terbentuk. Penampakan warna diamati dengan sinar UV pada panjang gelombang 254 nm dan 366 nm baik sebelum maupun sesudah disemprot dengan pelarut berflourenses (larutan vanila 5% dalam etanol dan H2SO4). Warna kromatogram dari masing-masing noda yang terbentuk hasil KLT kualitatif disajikan dalam Tabel 5.5.<br /><br />Berdasarkan Tabel 5.5 tersebut, penampakan warna kromatogram noda 1 dengan Rf 0,94 cm adalah hijau muda. Pada sinar UV 254 dan 366 nm tampak berwarna coklat muda sebelum disemprot dengan pelarut berflourensens (vanila 5 % dalam etanol). Setelah disemprot tidak tampak pada sinar UV 254 nm dan berwarna coklat pada sinar UV 366 nm. Noda 2 dengan Rf 0,88 cm tampak hijau kebiruan, pada sinar UV 254 nm sebelum disemprot tampak coklat muda dan tampak oranye pada sinar UV 366 nm. Setelah penyemprotan kromatogram tampak biru muda pada sinar UV 254 nm dan oranye terang (menyala) pada sinar UV 366 nm. Noda 3 Rf 0,83 tidak tampak, pada sinar UV 254 nm juga tidak terlihat tetapi tampak warna putih pada sinar UV 366 nm sebelum disemprot. Setelah disemprot tidak tampak pada UV 254 nm dan terlihat coklat muda pada UV 366 nm.<br /><br />Tabel 5.5. Harga RF dan warna noda kromatogram hasil KLT kualitatif dengan eluen toluen : eter : asam asetat (10:10:2).<br /><br />Noda 4 dengan Rf 0,77 cm berwarna hijau kekuningan. Sebelum disemprot tidak tampak pada UV 254 nm dan terlihat coklat oranye pada UV 366 nm. Pada sinar UV 254 nm setelah disemprot tampak biru muda dan oranye keunguan pada sinar Uv 366 nm. Noda 5 Rf 0,72 cm warna hijau biru, sebelum disemprot tampak coklat muda pada UV 254 nm dan ungu muda pada UV 366 nm. Setelah disemprot tidak tampak pada UV 254 dan 366 nm. Noda 6 Rf 0,66 cm berwarna coklat muda, coklat muda pada UV 254 dan coklat pada 366 nm sebelum disemprot. Setelah disemprot tampak coklat pada Uv 254 nm dan ungu muda pada 366 nm. Warna ungu muda pada noda 7 Rf 0,61 cm, tetapi tidak tampak pada UV 254 nm dan coklat muda pada UV 366 nm sebelum disemprotkan. Warna ungu muda pada 366 nm dan tidak tampak pada UV 254 nm setelah disemprot. Noda 8 Rf 0,55 cm terlihat oranye kekuningan, pada UV 254 nm coklat muda dan coklat gelap pada 366 nm sebelum disemprot. Setelah disemprot tampak biru pada UV 254 dan 366 nm. Noda terakhir 9 Rf 0,44 cm tampak hijau kekuningan, namun tampak coklat kebiruan pada UV 254 nm dan coklat pada UV 366 nm. Seteah disemprot terlihat coklat kebiruan pada UV 254 nm dan coklat pada UV 366 nm.<br /><br />Dari 9 noda tersebut, noda ke 2 dan ke 4 memperlihatkan warna oranye terang keunguan (lembayung) pada UV 366 nm setelah disemprot maka dapat diduga pada kedua noda tersebut ada senyawa flavonoid golongan flavon, isoflavon, flavonol, dihidroflavonol atau flavanon (Markham, 1998).<br /><br />Kedua noda senyawa ini (2 dan 4) dilakukan isolasi dengan kromatografi lapis tipis (KLT) preparatif karena warna oranye menyala pada gelombang UV 366 nm setelah disemprot dengan larutan berflourensens vanila 5 % dalam etanol dan H2SO4 pekat mengindikasikan keberadaan kandungan senyawa flavonoid. Hal ini seperti yang dijelaskan oleh Markham (1988), vanila 5 % dalam etanol dan H2SO4 pekat perbandingan 4:1 akan menimbulkan bercak merah atau merah lembayung segera setelah penyemprotan dan pemanasan (dengan pengering rambut) oleh katekin dan proantosiniadin. Bila bercak terbentuk lebih lambat disebabkan oleh flavanon dan dihidroflavonol. Pereaksi bereaksi dengan semua flavonoid yang mempunyai pola oksidasi lingkar-A floroglusinol dan lingkar-C jenuh. Senyawa yang demikian seringkali tidak tampak pada kromatografi bila disinari dengan sinar UV.<br /><br />Spektrofotometri Ultra Violet Cahaya Tampak (UV-vis)<br /><br />Identifikasi senyawa flavonoid dengan spektrofotometri UV-visual ini berdasarkan pada serapan cahaya oleh molekul dalam daerah ultraviolet dan tampak tergantung dari transisi elektroniknya. Markham (1988), Spektrofotometri serapan Ultra Violet dan serapan Tampak (UV-vis) barangkali merupakan cara tunggal yang paling berguna untuk menganalisis struktur flavonoid. Analisis dengan spektrofotometri UV-vis berguna dalam mengidentifkasi jenis golongan senyawa flavonoid dan menentukan pola oksigenasinya. Kedudukan gugus hidroksil fenol bebas pada inti flavonoid dapat ditentukan dengan menambah pereaksi geser ke dalam larutan cuplikan dan mengamati puncak serapan yang terjadi.<br /><br />Flavonoid merupakan satu dari banyak senyawa metabolit sekunder yang dihasilkan oleh tumbuhan yang biasa ditemukan pada bagian akar, batang, kulit dan daun serta biji tumbuhan. Senyawa flavonoid mengandung cincin aromatik yang tersusun dari 15 atom karbon dengan inti dasar tersusun dalam konjungasi C6-C3-C6 (dua inti aromatik dihubungkan dengan atom karbon). Pita spektrumnya dapat terserap kuat pada panjang gelombang UV disebabkan oleh keberadaan dari cincin aromatik tersebut. Profil pita yang memberikan spektrum UV khas flavonoid dapat diidentifikasi lebih lanjut dengan pereaksi geser. Pereaksi geser ini untuk menentukan kedudukan gula dan gugus hidroksil fenol pada inti flavonoid dengan cara mengamati pergeseran puncak (peak) serapan yang terjadi.<br /><br />Pereaksi geser yang digunakan adalah NaOH, AlCl3, NaOAc, dan campuran NaOAc dan H3BO3. Identifikasi dan analisa struktur flavonoid dengan spektrum UV dilakukan terhadap isolat noda oranye yaitu noda 2 dan 4.<br /><br />Menurut Markham (1988) dan Mabry (1970), spektrum khas flavonoid terdiri dari dua pita yaitu pada rentang panjang gelombang 240-295 nm (pita II) dan 300-350 nm (pita I). Lebih lanjut, menurut Markham (1988), sistem hidroksilasi pada flavon ditunjukkan dengan pemunculan puncak yang kadang-kadang berupa bahu pada spektrum pita I.<br /><br />Spektrum UV-vis isolat ekstrak metanol S. cristaefolium yang disolasi disajikan dalam Gambar 5.7 dan 5.8.<br /><br />Dari spektrum UV-vis setelah penambahan pereaksi geser NaOH, AlCl3, NaOAc, dan campuran NaOAc dan H3BO3 terhadap isolat memberikan pola pergeseran yang berbeda-beda. Hasil pergeseran spektrum UV dari isolat noda 2 dan 4 dengan adanya pereaksi geser disajikan dalam Lampiran 7 dan Tabel 5.6.<br /><br />Tabel 5.6. Pergeseran rentang panjang gelombang puncak spektrum UV-vis Isolat 4 dengan adanya pereaksi geser.<br /><br />Pola hidroksilasi dan derajat penyulihan pada flavon dan flavonol mengakibatkan adanya sistem ’3, ’4-di OH umumnya dapat dibuktikan dengan adanya puncak kedua dalam pita II (kadang-kadang berupa bahu). Berdasarkan Markham (1988) dapat diamati bahwa pola grafik hidroksilasi isolat noda 4 yang diisolasi tersebut mengarah pada flavanon (naringenin) atau dihidroflavonol. Hal ini secara jelas dapat diamati dari adanya pola dua puncak utama dari isolat noda ke 4 ini. Rentang serapan spektrum utama UV-visual flavonoid untuk flavanon dan dihidroflavonol berada ada 275-295 nm pada pita II. Rentang serapan spektrum utama UV-visual flavonoid ini sesuai dengan spektrum yang muncul pada serapan pita II isolat noda 4 yaitu 280 nm.<br /><br />Melihat perubahan spektrum dengan pereaksi geser pada isolat noda ke 4 dengan Rf 0,77 cm (Tabel 8) dengan didukung oleh pustaka (Markham, 1998; Mabry, 1970) maka dapat dijelaskan bahwa dengan adanya pereaksi geser NaOH terjadi pergeseran pita II sebesar 5 nm ke kanan mengarah pada substitusi posisi 7-OH. Penambahan pereksi geser AICl3 tidak terjadi pergeseran pada pita I (tetap) mengarah pada substitusi posisi 5-OH. Penambahan pereaksi geser NaOAc (asam asetat) menurunkan kekuatan pita II yang mengarah pada substitusi posisi 6,7atau 7,8 atau 3, 4’-di OH (gugus yang peka terhadap basa). Pada pita I dengan pereaksi geser AICl3 ini mengalami pergeseran sebesar 7 nm mengarah ada 7-OH. Sedangkan penambahan NaOAc dan H3BO3 (asam borat) terjadi pergeseran pita I ke kanan sebesar 8 nm yang mengarah pada substitusi o-di OH pada cincin A (6,7). Pergeseran 8 nm ini hanya menambah 1 nm dari pergeseran oleh NaOAc yang berarti tidak signifikan atau tetap (tidak ada pergeseran). Hal ini membuktikan bahwa pada cincin B terjadi proses metilasi atau glikolisasi yang menghambat hidrolisis (ionisasi). Dengan demikian diduga bahwa isolat yang diisolasi adalah senyawa flavonoid golongan dihidroflavonol yakni 5,6,7-dihidroflavonol.<br /><br />Markham (1982), lebih jauh memaparkan bahwa spektrum khas jenis flavonoid utama dengan pola oksigenasinya yang setara (5,7,4’) adalah kekuatan nisbi yang rendah pada pita I dalam dihidroflavon, dihidroflavonol dan isoflavon serta kedudukan pita I pada spektrum khalkon, auron dan antosianin yang terdapat pada panjang gelombang yang tinggi.<br /><br />Proses metilasi atau glikosilasi (terutama pada 3,5,7 dan 4’-hidroksil) mengakibatkan pergeseran pita ke panjang gelombang yang lebih rendah. Sifat gula pada glikosida biasanya tidak berpengaruh. Proses metilasi terdeteksi dari pereaksi geser NaOAc yang tidak mengakibatkan pergeseran pita serapan panjang gelombang pada cincin B diduga disebabkan oleh keberadaan CH3 bukan oleh gula. Ini diperkuat dengan data Infrared (IR) dimana muncul peak serapan pada panjang gelombang 1347,19 cm-1 dimana pada daerah ini merupakan daerah serapan khas gugus-gugus metil pada alkohol dan fenol.<br /><br />Pergeseran ke panjang gelombang yang lebih kecil pada pita II dengan NaOAc menunjukkan bahwa pada posisi 7 terjadi metilasi atau glikolisasi. Pergeseran panjang gelombang 10 nm pada pita I dengan AICl3 disebabkan karena mengandung gugus hidroksil pada posisi 5. Pergeseran ke arah batokromik mengakibatkan perpanjangan delokalisasi elektron oleh senyawa kompleks. Adanya gugus 5-OH didukung oleh adanya serapan yang muncul pada daerah 1639,38 cm-1 pada spektrum IR yang merupakan serapan khas flavonol dengan adanya gugus 5-OH (Geissman, 1969).<br /><br />Berdasarkan data analisa spektrum UV-vis dan spektrum inframerah maka noda ke 4 (empat) diduga merupakan senyawa flavonoid golongan dihidroflavonol, dengan struktur sebagai berikut :<br /><br />Untuk isolat noda ke 2 yang diisolasi dengan melihat serapan panjang gelombang dari adanya pereaksi geser menunjukkan serapan panjang gelombang berada diluar rentang panjang gelombang dari spektrum khas flavonoid (240-295 nm pita II dan 300-350 nm pita I) yaitu sebesar 610-660 nm pada pita I dan 408 nm pada pita II. Ini dapat diduga bahwa isolat noda ke 2 dengan Rf 0,88 cm bukan senyawa flavonoid yang menjadi senyawa target.<br /><br />Spektroskopis Infrared (FT-IR)<br /><br />Analisis spektrofotometri inframerah (Fourier Transform Infrared, FT-IR) bertujuan untuk menentukan gugus fungsional suatu senyawa berdasarkan serapan spektrum elektromagnetik pada daerah IR. Hasil analisis spektrum IR menunjukkan bahwa isolat yang diisolasi mengandung gugus-gugus fungsional dengan perkiraan gugus fungsional seperti yang ditunjukkan pada Gambar 5.10 dan Tabel 5.7.<br /><br />Pita lebar kuat pada puncak 3445,59 cm-1 menunjukkan adanya gugus –OH, puncak 2973,07 cm-1 menunjukkan vibrasi ulur C-H asimetris dan vibrasi ulur simetris terdapat pada puncak 2866,02 cm-1, yang diperkuat dengan adanya vibrasi tekuk =C-H pada 1457,12 cm-1 dan 1347,19 cm-1. Hal ini sesuai dengan Silverstein et al, (1986), bahwa gugus-gugus metil pada alkohol dan fenol biasanya memiliki getaran tekuk simetrik (δsCH3) didekat 1375 cm-1 (7,28 µm), sedangkan getaran tekuk tak-simetrik (δαsCH3) di dekat 1450 cm-1 (6,90 µm). Pita-pita khas yang teramati dalam spektrum alkohol dan fenol dihasilkan oleh uluran (vibrasi) O-H dan uluran C-O. (Silverstein, et. al., 1986).<br /><br />Vibrasi ulur C=O karbonil ditunjukkan pada puncak 1639,38 cm-1 menunjukkan adanya pita kerangka C=C yang diperkuat adanya vibrasi ulur C-O eter (jembatan O) pada puncak 1054,99 cm-1. Sedangkan daerah serapan pada puncak 800 cm-1 kebawah menunjukkan tekuk C-H keluar bidang yang berarti adanya benzena tersubstitusi (substitusi cincin aromatik).<br /><br />Dari analisis hasil spektroskopis infrared tersebut menunjukkan bahwa senyawa yang diisolasi kemungkinan mempunyai gugus fungsi –OH, C-H, C=O, C-O, =C-H dan C-C (cincin benzena).<br /><br />Berdasarkan interpretasi data yang diperoleh dari analisa spektrum UV-vis dan spektrum inframerah (IR) maka dapat disimpulkan bahwa isolat noda ke 4 (empat) dari ekstrak metanol S. cristaefolium yang diisolasi diduga merupakan senyawa flavonoid golongan dihidroflavonol, dengan struktur sebagai berikut :<br /><br /></span><div style="text-align: center;"><span class="fullpost"><span style="font-weight: bold;">KESIMPULAN DAN SARAN</span></span><br /></div><span class="fullpost"><br />Kesimpulan<br />Berdasarkan hasil penelitian isolasi dan identifikasi senyawa flavonoid dan uji toksisitas ekstrak metanol alga coklat S. cristaefolium maka dapat diambil kesimpulan sebagai berikut :<br />1. Hasil skrining fitokimia (uji golongan) senyawa ekstrak metanol S. cristaefolium mengandung beberapa senyawa diantaranya flavonoid, flavon, alkaloid, terpenoid dan steroid.<br />2. Hasil analisis dengan spektroskopi UV-visual dan spektroskopi infrared (IR) diduga golongan flavonoid yang terkandung dalam ekstrak metanol S. cristaefolium adalah senyawa 5,6,7,-dihidroflavonol yang diperoleh dari isolat noda ke 4 pada KLT kualitatif dengan nilai Rf 0,77 cm.<br /><br />Saran<br />Disarankan untuk penelitian lebih lanjut dengan melakukan analisa yang lebih lengkap terhadap ekstrak S. cristaefolium meliputi 1H-NMR, LCMS, 13C-NMR untuk dapat menduga struktur senyawa secara lebih tepat terhadap senyawa yang telah diisolasi.<br /><br /></span><div style="text-align: center;"><span class="fullpost"><span style="font-weight: bold;">PUSTAKA</span></span><br /></div><span class="fullpost"><br />Anderson DP. 1974. Fish Immunologi. TFH Publication Ltd Hongkong. 239 p.<br /><br />Anonymous, 2004. Buku Petunjuk Rumput Laut Ditjen P. Budidaya. Dinas Kelautan dan Perikanan Republik Indonesia.<br /><br />Bengen, D.G. 2001. Sinopsis Ekosistem dan Sumberdaya Alam Pesisir dan Laut. Pusat Kajian Sumberdaya Pesisir dan Lautan Institut Pertanian Bogor. Bogor . (Khurniasari, 2004).<br /><br />Boney, A. D. 1965. Aspect of the biology of the seaweeds of economic importance. In : Basic in Mar. Bot. 3 : 205 – 253.<br /><br />BOYD, J. & TURVEY, J.R. (1978). Structural studies of alginic acid using a bacterial poly-a-L-guluronate lyase. Carbohydr. Res., 66: 187 – 194.<br /><br />Cabbalo, J.L., Hernandez-Inda, Z.L., Perez, P., Gravalos, M.D. 2002. A Comparison between two brine shrimp assy to detect in vitro cytotoxicity in marine natural product (methodology article). BMC Biotechnology. 2:1-5.<br /><br />Calleja M.C, Persoone G, 1992. Cyst based toxicity test IV, The potential of ecotoxicological test for the prediction of acute toxicity in man as evaluated on the first ten chemicals of the MEIC programme, ATLA-Altern Lab Animals, 20:396-405.<br /><br />Cutler, SJ., H. Cutler. Biologically Active Natural Products: Pharmaceuticals. CRC Press LLC. Boca Raton. USA 2000;1-13, 17-22, 73-92.<br /><br />Gritten, R.J., J.M. Bobbit, and A.E. Schwarling, "Pengantar Kromatografi", terjemahan K. Radmawinata dan I. Soediso, penerbit ITB, Bandung, 1991, 5-9.<br /><br />Harborne, JB., 1973, Phytochemical Methods: Chapman and Hall, Ltd., London, pp. 49-188<br /><br />Harborne, JB., et.al., Phytochemical Dictionary: A Handbook of Bioactive Compounds from Plants, 2nd ed., Taylor & Francis Ltd., London., 1999;396, 487, 494.<br /><br />Ibnu Gholib Gandjar. Abdul Rohman. 2007. Kimia Farmasi Analisis. Pustaka Pelajar. Yogyakarta.<br /><br />J.B. Harborne, Metode Fitokimia, Penuntun cara modern menganalisis tumbuhan, (Terjemahan Kosasih Padmawinata dan Iwang Soediro), Penerbit ITB, Bandung, 1987<br /><br />Jadulco, R.C. 2002, Isolation and Structure Elucidation of Bioactive Secondary Metabolites from Marine sponges and Sponges-derived Fungi. Dissertation of Doktorgrades, University of Wuerzburg. 176p.<br /><br />Ledenberg, J., 1992. Encylopedi of Microbiology, Volume Academic Press Inc, Rockefller University, New York<br /><br />Markham. K.R., "Cara Mengindentifikasi Flavonoid", terjemahan K. Radmawinata, Penerbit ITB, Bandung, 1988, 1-117. 10.<br /><br />Meyer, B. N., Ferrigni, N. R., Putnam, J. E., Jacobson, L. B., Nichols, D. E., and McLaughlin, J. L. 1982. Brine shrimp: a convenient general bioassay for active plant constituents. Planta Medica, 45: 31-34.<br /><br />Parveen Akhtar And Viqar Sultana, 2004, Biochemical Studies Of Some Seaweed Species From Karachi Coast, Zoological Survey Department, Government of Pakistan, Karachi (PA); Department of Biochemistry, University of Karachi (VS). Rec. Zool. Surv. Pakistan, 14: 1-4 (2002)<br /><br />Parveen Akhtar And Viqar Sultana, 2004, Biochemical Studies Of Some Seaweed Species From Karachi Coast, Zoological Survey Department, Government of Pakistan, Karachi (PA); Department of Biochemistry, University of Karachi (VS). Rec. Zool. Surv. Pakistan, 14: 1-4 (2002)<br /><br />Perez, H., Diaz, F., and Medina, J. D. 1997. Chemical investigation and in vitro antimalarial activity of Tabebuia ochracea ssp. neochrysantha. International Journal of Pharmacog, 35: 227-231.<br /><br />Rao,-A.S.; Rao,-M.U. 2002. Seasonal growth pattern in Sargassum polycystum C. Agardh (Phaeophyta, Fucales) occurring at Visakhapatnam, east coast of India. Indian Journal of Marine Sciences [Indian-J-Mar-Sci]. vol. 31, no. 1, pp. 26-32.<br /><br />Robert, M. Silverstein, G. Clayton Bassler, Terence C. Morril. 1986. Penyidikan Spektrometrik Senyawa Organik, Penerbit Erlangga. Jakartan (Terjemahan A. J. Hartomo dkk).<br /><br />Sovia Lenny. 2006. Senyawa Flavonoida, Fenil Propanoida, Alkaloida. USU Repository<br /><br />Stahl, E., "Analisis Obat Secara Kromatografi dan Mikroskopik", terjemahan K. Radmawinata dan I. Soediso, penerbit ITB, Bandung, 1985, 3-18. 15.<br /><br />Tetsuro Ajisaka, 2006, Problems in the identification of “Sargassum duplcatum” Group, Coastal Marine Science 30(1): 174-178. Kyoto University, Japan.<br /><br />Wiryowidagdo, Sumali. Kimia dan Farmakologi Bahan Alam. Dirjen Dikti–Universitas Indonesia. Jakarta 2000; viii + 339 hlm.<br /><br /></span><div class="blogger-post-footer">MEMUSNAHKAN TANDA TANYA ANDA. THANKS BRO !</div>Thailand aik aikhttp://www.blogger.com/profile/10964108109700651247noreply@blogger.com5tag:blogger.com,1999:blog-2030866544649181977.post-84111353292604516932010-10-05T02:09:00.004+07:002010-10-05T02:19:18.559+07:00TEKNIK EKSTRAKSI SENYAWA FLAVONOID DARI ALGA COKLAT Sargassum cristaefolium<span style="font-weight: bold;">Oleh : Muhammad Fahri, S.Pi. M.Pi</span><br /><br /><br /><div style="text-align: center; font-weight: bold;">PENDAHULAUAN<br /></div><br />Teknik Ekstraksi Senyawa<br /><br />Ekstraksi adalah proses penarikan komponen atau zat aktif suatu simplisia dengan menggunakan pelarut tertentu. Pemikiran metode ekstraksi senyawa bukan atom dipergunakan oleh beberapa faktor, yaitu sifat jaringan tanaman, sifat kandungan zat aktif serta kelarutan dalam pelarut yang digunakan. Prinsip ekstraksi adalah melarutkan senyawa polar dalam pelarut polar dan senyawa non polar dalam senyawa non polar. Secara umum ekstraksi dilakukan secara berturut-turut mulai dengan pelarut non polar (n-heksan), lalu pelarut kepolarannya menengah (diklor metan atau etilasetat) kemudian pelarut bersifat polar (metanol atau etanol) (Harborne, 1987).<br /><br />Ekstraksi digolongkan ke dalam dua bagian besar berdasarkan bentuk fase yang diekstraksi yaitu ekstraksi cair-cair dan ekstraksi cair padat, ekstraksi cair padat terdiri dari beberapa cara yaitu maserasi, perkolasi dan ekstraksi sinambung (Harborne, 1987).<br /><br />Maserasi<br /><br />Metode ekstraksi umum digunakan dalam mengisolasi senyawa metabolit sekunder adalah maserasi (penggunaan pelarut organik). Maserasi merupakan proses perendaman sampel dengan pelarut organik dengan beberapa kali pengocokan atau pengadukan dalam temperatur ruangan. Proses ini sangat menguntungkan karena dengan perendaman sampel tanaman akan mengakibatkan pemecahan dinding sel dan membran sel akibat perbedaaan tekanan antara di dalam sel dan di luar sel sehingga metabolit sekunder yang ada dalam sitoplasma akan terlarut dalam pelarut organik dan ektraksi senyawa akan sempurna karena dapat diatur lama perendaman yang dilakukan. Pemilihan pelarut dalam proses maserasi akan memberikan efektifitas yang tinggi dalam memperhatikan kelarutan senyawa bahan alam dalam pelarut tersebut. Secara umum, pelarut metanol merupakan pelarut yang paling banyak digunakan dalam proses isolasi senyawa organik bahan alam karena dapat melarutkan golongan metabolit sekunder (Darwis, 2000; Anonim, 1993).<br /><span class="fullpost"><br />Hasil yang diperoleh berupa ekstrak kasar yang telah diuapkan pelarutnya dengan rotary evaporator, dimana seluruh senyawa bahan alam yang terlarut dalam pelarut yang akan digunakan berada dalam ekstrak kasar tersebut. Selanjutnya ekstrak kasar tersebut akan dapat dipisahkan berdasarkan komponen-komponen dengan metode fraksinasi partisi dengan menggunakan corong pisah.<br /><br />Ekstraksi Sinambung<br /><br />Ekstraksi sinambung dilakukan dengan menggunakan alat Soxhlet. Pelarut penyair yang ditempatkan di dalam labu akan menguap ketika dipanaskan, melewati pipa samping alat Soxhlet dan mengalami pendinginan saat melewati kondensor. Pelarut yang telah berkondensasi tersebut akan jatuh pada bagian dalam alat Soxhlet yang bersimplisia dibungkus kertas saring dan menyisiknya hingga mencapai bagian atas tabung sifon. Seharusnya seluruh bagian linarut tersebut akan tertarik dan ditampung pada labu tempat pelarut awal. Proses ini berlangsung terus menerus sampai diperloleh hasil ekstraksi yang dikehendaki (Harborne, 1987).<br /><br />Keuntungan ekstraksi sinambung adalah pelarut yang digunakan lebih sedikit dan pelarut murni sehingga dapat menyaring senyawa dalam simplisia lebih banyak dalam waktu lebih singkat dibandingkan dengan maserasi atau perkolasi. Kerugian cara ini adalah tidak dapat digunakan untuk senyawa-senyawa termolabil (Harborne, 1987).<br /><br />Ekstraksi Cair - Cair<br /><br />Ekstraksi cair-cair diperlukan untuk mengekstraksi senyawa glikosida yang umumnya polar (aglikon berikatan dengan gula monosakarida dan disakarida). Ekstraksi cair-cair untuk glikosida biasanya dilakukan terhadap ekstrak etanol atau metanol awal. Ekstrak awal ini dilarutkan dalam air kemudian diekstraksi dengan etil asetat dan n-butanol. Glikosida terdapat dalam fase etil asetat atau n-butanol (Harborne, 1987).<br /><br />Selain itu, ekstraksi cair-cair dilakukan terhadap reaksi awal untuk menghilangkan lemak dan ekstrak tersebut jika bagian tumbuhan yang diekstraksi belum dihilangkan lemaknya pada ekstrak awal (Harborne, 1987).<br /><br /></span><div style="text-align: center;"><span class="fullpost"><span style="font-weight: bold;">METODELOGI PENELITIAN</span></span><br /></div><span class="fullpost"><br />Prosedur Ekstraksi Metabolit Sekunder S. cristaefolium<br /><br />Alga coklat Sargassum cristaefolium yang digunakan dalam penelitian ini berasal dari perairan Sumenep Madura, yang telah dikeringkan dengan kadar air sekitar 10-20 %. Sampel dalam bentuk serbuk halus kering digunakan sebagai sampel untuk diekstraksi.<br />Ekstraksi senyawa bioaktif dari S. cristaefolium menggunakan metode maserasi bertingkat. Sebanyak 500 gram sampel diekstraksi secara maserasi bertingkat menggunakan pelarut dengan kepolaran yang berbeda. Pelarut polar kloroform sebanyak 1 liter (1000 ml) selama 24 jam pertama kemudian disaring. Maserasi dengan pelarut kloroform ini sebanyak 3 kali. Setelah itu ampas dikeringkan hingga terbebas dari pelarut kloroform dan dimaserasi kembali selama 24 jam menggunakan pelarut semi polar aseton sebanyak 1 liter (1000 ml) kemudian disaring. Maserasi dengan pelarut aseton ini sebanyak 2 kali. Setelah itu ampas kembali dikeringkan sampai terbebas dari pelarutnya. Selanjutnya dimaserasi kembali dengan pelarut polar yaitu metanol sebanyak 1 liter (1000 ml) selama 24 jam kemudian disaring. Maserasi dengan pelarut metanol ini sebanyak 2 kali. Ketiga ekstrak yang diperoleh dipekatkan dengan rotary vacum evaporator pada suhu 600C sampai diperoleh ekstrak pekat kloroform, aseton, dan metanol. Asumsi perbandingan pelarut kloroform, aseton, dan metanol dengan sampel secara berturut-turut sebanyak 6:1, 4:1 dan 4:1. Prosedur kerja ekstraksi maserasi bertingkat S. cristaefolium secara singkat disajikan dalam Lampiran 1.<br />Ketiga ekstrak pekat yang diperoleh selanjutnya diuji toksisitasnya dengan mengunakan larva udang A. salina L.<br /><br /></span><div style="text-align: center;"><span style="font-weight: bold;" class="fullpost">HASIL DAN PEMBAHASAN</span><br /></div><span class="fullpost"><br />Hasil Ekstraksi<br /><br />Serbuk S. cristefolium sebanyak 500 gram diekstraksi dengan metode ekstraksi bertingkat pada pelarut dengan tingkat kepolaran yang berbeda, yaitu kloroform (non polar), aseton (semi polar) dan metanol (polar). Metode ekstraksi senyawa secara singkat disajikan dalam lampiran 1. Hasil ekstraksi berupa cairan ekstrak kasar berwarna hitam kehijauan. Setelah dievaporasi (rotary vaccum evaporator) pada suhu 600C diperoleh ekstrak berupa ekstrak pekat (pasta) masing-masing ekstrak kloroform 53 mg, ekstrak aseton 34 mg dan ekstrak metanol 14 mg. Hasil ekstraksi S. cristaefolium disajikan dalam Tabel 5.1, sebagai berikut :<br /><br />Tabel 5.1. Hasil Ekstraksi S. cristaefolium.<br />No Jumlah Serbuk Pelarut Jumlah Pelarut Lama Maserasi Ekstrak Kasar Ekstrak Pekat<br /><br />1 500 Kloroform 3000 3 x 24 1838 53<br />2 500 Aseton 2000 2 x 24 1169 34<br />3 500 Metanol 2000 2 x 24 1247 14<br /><br /><br />Kepolaran pelarut merupakan pertimbangan penting dalam ekstraksi senyawa flavonoid. Menurut Andersen dan Markham (2006), flavonoid yang memiliki kepolaran yang rendah, seperti isoflavon, flavanon, flavon methyl dan flavonol, dalam ekstraksinya menggunakan pelarut kloroform, diethyl eter, atau ethyl asetat pada flavonoid glikosida. Sedangkan pada flavonoid yang memiliki tingkat kepolaran aglikon dapat diekstraksi dengan alkohol atau campuran alkohol-air. Lebih lanjut, untuk bahan serbuk dari tumbuhan dapat juga diekstraksi dengan heksana untuk memecahkan kandungan lemaknya dan dengan pelarut ethyl asetat atau etanol untuk kandungan phenolnya. Namun pendekatan ini tidak cocok dengan senyawa-senyawa yang sensitif terhadap panas.<br /><br />Penggunaan pelarut kloroform (non polar) pada ekstraksi simplisia awal dengan jumlah yang lebih banyak dimaksudkan untuk memaksimalkan hidrolisis (pemecahan) dan penarikan senyawa yang terdapat dalam sampel S. cristaefolium. Pelarut non polar memiliki kemampuan untuk memecah kandungan lemak (lipida) yang terdapat dalam serbuk yang ekstraksi. Dengan pemecahan lemak tersebut maka akan memudahkan dalam mengekstraksi senyawa target flavonoid yang memiliki sifat polar. Senyawa polar biasanya akan lebih baik diekstraksi dengan pelarut golongan polar seperti etanol atau metanol. (Harbone, 1984). Hal ini sejalan dengan Markham (1988), untuk membebaskan senyawa yang kepolarannya rendah seperti lemak, terpena, klorofil, xantofil dan lainnya dengan ekstraksi memnggunakan heksana atau kloroform.<br />Absorbsi flavonoid yang sangat rendah disebabkan oleh karena dua faktor utama, yaitu 1). Flavonoid merupakan molekul dengan rantai yang beragam sehingga tidak cukup kecil untuk dilarutkan dengan difusi langsung. 2). Flavonoid merupakan tipe molekul yang memiliki kelarutan yang rendah dalam minyak dan lipid lainnya. Hal ini sangat membatasi kemampuan flavonoid untuk melewati kandungan lemak dari luar membran sel. Keberadaan lipid diluar membran sel tersebut harus dihidrolisis terlebih dahulu dengan pelarut non polar untuk menghilangkan lipid pada membran luar sel. Hal ini memudahkan pelarut polar dengan polaritas yang seimbang dengan flavonoid seperti metanol untuk melarutkan senyawa flavonoid yang terkandung dalam S. cristaefolium tersebut. Prashant, et. al., (2009) lebih jauh menjelaskan bahwa material awal dari kandungan flavonoid tidak dapat larut dengan pelarut seperti kloroform, diethyl eter atau benzene. Dengan demikian, ekstrak yang akan dilanjutkan dalam pemisahan dan identifikasi senyawa flavonoid adalah ekstrak dari pelarut polar yaitu ekstrak metanol.<br /><br />Ekstrak pekat yang diperoleh digunakan dalam uji toksisitas dengan metode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT) menggunakan larva A. salina umur 48-72 jam untuk mengetahui kemampuan aktifitas senyawa dalam ekstrak. Dari uji toksisitas dapat diketahui ekstrak yang aktif untuk dilanjutkan ke tahap isolasi dan identifikasi senyawa.<br /><br /><br /></span><div style="text-align: center;"><span class="fullpost"><span style="font-weight: bold;">KESIMPULAN DAN SARAN</span></span><br /></div><span class="fullpost"><br />Kesimpulan<br /><br />1. Kepolaran pelarut merupakan pertimbangan penting dalam ekstraksi senyawa flavonoid.<br />2. Pelarut metanol memiliki kemampuan yang lebih baik dalam melarutkan senyawa flavonoid yang terdapat dalam S. cristaefolium.<br /><br />Saran<br /><br />Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut dengan menggunakan pelarut yang lebih beragam untuk mengekstraksi senyawa dari S. cristaefolium untuk mengetahui kemampuan pelarut dalam mengekstraksi senyawa dari bahan alam.<br /><br /></span><div style="text-align: center;"><span class="fullpost"><span style="font-weight: bold;">PUSTAKA</span></span><br /></div><span class="fullpost"><br /><span style="font-style: italic;">Fahri, M. 2010. Thesis. Tidak dipublikasikan</span>.<br /><br /><br /></span><div class="blogger-post-footer">MEMUSNAHKAN TANDA TANYA ANDA. THANKS BRO !</div>Thailand aik aikhttp://www.blogger.com/profile/10964108109700651247noreply@blogger.com3tag:blogger.com,1999:blog-2030866544649181977.post-72309974305553819962010-10-05T01:59:00.002+07:002010-10-05T02:05:19.906+07:00ISOLASI DAN IDENTIFIKASI SENYAWA FLAVONOID SERTA UJI TOKSISITAS EKSTRAK METANOL DARI ALGA COKLAT (Sargassum cristaefolium)<div style="text-align: center;"><span style="font-weight: bold;">ISOLASI DAN IDENTIFIKASI SENYAWA FLAVONOID SERTA UJI TOKSISITAS EKSTRAK METANOL DARI ALGA COKLAT (Sargassum cristaefolium)</span><br /><br /><br /><br /><span style="font-weight: bold;">PUBLIKASI ILMIAH</span><br /><br /><br /><br /><span style="font-weight: bold;">JURUSAN BUDIDAYA PERAIRAN </span><br /><span style="font-weight: bold;">PROGRAM PASCA SARJANA </span><br /><span style="font-weight: bold;">FAKULTAS PERIKANAN DAN KELAUTAN</span><br /><span style="font-weight: bold;">UNIVERSITAS BRAWIJAYA</span><br /><span style="font-weight: bold;">MALANG</span><br /><span style="font-weight: bold;">2010</span><br /></div><span style="font-weight: bold;"><br /><br /><br /></span><div style="text-align: center;"><span style="font-weight: bold;">RINGKASAN</span><br /></div><br /><br /><div style="text-align: justify; font-style: italic;"><span style="font-weight: bold;">Muhammad Fahri</span>. Program Pasca Sarjana Budidaya Perikanan dan Kelautan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas Brawijaya. Isolasi Dan Identifikasi Senyawa Flavonoid Serta Uji Toksisitas Ekstrak Metanol Dari Alga Coklat (Sargassum cristaefolium). Ketua Komisi Pembimbing : Prof Ir. Yenny Risjani, DEA. Ph.D. Anggota Komisi Pembimbing : Dr. Drs. Sasangka Prasetyawan, MS.<br /></div><br /><div style="text-align: justify;">Banyak hasil bahan alam kelautan yang mempunyai bioaktivitas antitumor (Kamiya, et al. 1987), antiviral (Rinehart et al., 1993), komponen sitotoksik (Schmitz et al. 1993), dan lain-lain. Studi-studi tersebut memperlihatkan bahwa lingkungan kelautan merupakan sumber yang kaya akan komponen bioaktif, banyak di antaranya memiliki struktur kimiawi yang tidak ditemukan dalam sumber dari lingkungan terestial (Jadulco, 2002).<br /><br />Indonesia memiliki potensi alga yang sangat tinggi. Tercatat sedikitnya ada 555 jenis alga di perairan Indonesia. Sargassum merupakan alga coklat (Phaeophyceae) multiseluler yang diduga memiliki senyawa-senyawa metabolisme sekunder berupa alkaloid atau flavonoid. Senyawa-senyawa tersebut kemungkinan merupakan senyawa bioaktif yang dapat digunakan dalam dunia pengobatan, misalnya sebagai antikanker.<br /></div><br /><div style="text-align: justify;">Tujuan penelitian ini adalah isolasi dan identifikasi senyawa flavonoid yang terkandung dalam Sargassum cristefolium dan untuk mengetahui daya toksisitas ekstrak Sargassum cristaefolium sebagai uji pre-skrining awal untuk senyawa yang memiliki potensi sebagai antikanker atau antitumor.<br /><br /><span class="fullpost">Telah dilakukan isolasi dan identifikasi senyawa golongan flavonoid serta uji toksisitas ekstrak metanol Sargassum cristaefolium. Ekstraksi dilakukan dengan cara maserasi bertingkat, menghasilkan ekstrak kloroform, ekstrak aseton dan ekstrak metanol. Ketiga ekstrak yang diperoleh diuji aktifitasnya dengan hewan uji larva udang Artemia salina L dengan metode BSLT. Hasil uji toksisitas ekstrak adalah ekstrak klorofom dengan nilai LC50 sebesar 1,88 ppm, ekstrak aseton dengan nilai LC50 sebesar 3,97 ppm dan ekstrak metanol dengan nilai LC50 sebesar 3,02 ppm. Ketiga ekstrak sangat berpotensi sebagai senyawa antikanker atau antitumor yang berasal dari bahan alam khususnya dari tumbuhan laut. </span><br /><br /><span class="fullpost">Uji golongan fitokimia senyawa ekstrak metanol S. cristaefolium mengandung beberapa senyawa diantaranya flavonoid, flavon, alkaloid, terpenoid dan steroid. Isolasi ekstrak metanol dilakukan dengan Kromatografi Lapis Tipis (KLT) kualitatif dan preparatif dengan eluen toluen:eter:asam asetat (10:10:2) serta analisa HPLC kualitatif. Analisa Identifikasi isolat dengan spektrofotometri UV-vis menggunakan pereaksi geser dan Spektrofotometri Infrared (FT-IR). </span><br /><span class="fullpost">Hasil analisis dengan spektroskopi UV-visual menggunakan pereaksi geser dan spektroskopi infrared (IR) diduga golongan flavonoid yang terkandung dalam ekstrak metanol S. cristaefolium adalah senyawa 5,6,7,-dihidroflavonol yang diperoleh dari isolat noda ke 4 pada KLT kualitatif dengan nilai Rf 0,77 cm. Dari analisis hasil spektroskopis infrared tersebut menunjukkan bahwa senyawa yang diisolasi kemungkinan mempunyai gugus fungsi –OH, C-H, C=O, C-O, =C-H dan C-C (cincin benzena). </span><br /><br /><span style="font-style: italic;" class="fullpost">Kata Kunci : Isolasi, Identifikasi, Uji Toksisitas, Metanol, Flavonoid, S. cirstaefolium. dihidroflavonol.</span><br /><br /><br /><div style="text-align: center;"><span class="fullpost"><span style="font-weight: bold;">SUMMARY</span></span><br /></div><br /><br /><span class="fullpost">Muhammad Fahri. Postgraduate Program of Fishery and Marine Aquaculture Science, Faculty of Marine Science and Fishery Brawijaya University. Isolation And Identification of Flavonoids Compound And Toxicity Test of Methanol Extract From Brown Algae (Sargassum cristaefolium). Advisor: Prof. Ir. Yenny Risjani, DEA, Ph.D. Co-advisor : Dr. Drs. Sasangka Prasetyawan, MS.</span><br /><br /><span class="fullpost">Many of marine natural products that have anticancer activity against (Kamiya, et al 1987)., Antivirus (Rinehart et al., 1993), cytotoxic component (Schmitz et al 1993)., And the others. These studies indicate that the marine environment is a rich source of bioactive components, many of which have chemical structures that are not found in the sources of terestial environmental (Jadulco, 2002).</span><br /><br /><span class="fullpost">Indonesia has a very high potential of algae. Noted there are at least 555 species of algae in the waters of Indonesia. Sargassum is a multicellular brown algae (Phaeophyceae) suspected of secondary metabolic compounds such as alkaloids or flavonoids. This compound may be bioactive compounds that can be used in the medical world, such as anticancer.</span><br /><br /><span class="fullpost">The purpose of this study was isolation and identification of flavonoid compounds contained in Sargassum cristefolium and to know the toxicity potency of extracts of Sargassum cristaefolium as a pre-screening test for compounds that have potential as anticancer or antitumor early.</span><br /><br /><span class="fullpost">Have been isolation and identification of flavonoid compounds and the toxicity test of methanol extract of Sargassum cristaefolium. Extraction was done by maceration increased, so that the extract producted of chloroform, acetone and methanol extracts. All three extracts obtained were tested by animal test activities Brine shrimp Artemia salina L with BSLT method. Toxicity test is to extract the chloroform extract with LC50 values of 1.88 ppm, acetone extract with LC50 values of 3.97 ppm and the methanol extracts with LC50 value of 3.02 ppm. All three extracts are very potent of anticancer or antitumor compounds derived from natural ingredients, primarily from marine plants.</span><br /><br /><span class="fullpost">The Test groups of phytochemical compounds from methanol extracts of S. cristaefolium its contains several compounds including flavonoids, flavone, alkaloids, terpenoids and steroids. The isolation of methanol extract by Thin Layer Chromatography (TLC) qualitative and preparative with eluent is toluene: ether: acetic acid (10:10:2) and qualitative HPLC analysis. Identification of isolates by analysis of UV-vis spectrophotometer using a reagent shear and Infrared Spectrophotometry (FT-IR).</span><br /><br /><span class="fullpost">The Result analysis by UV-visual spectroscopy using a reagent shear and infrared spectroscopy (IR) suspected of flavonoids contained in the methanol extract of S. cristaefolium is a compound is 5,6,7,-dihidroflavonol isolates obtained from place to fourth in the qualitative TLC with Rf value is 0.77 cm. Spectrophotometry infrared analysis showed that the compound isolated has the possibility of functional group is -OH, C-H, C=O, C-O, = C-H and C-C (benzene ring).</span><br /><br /><span style="font-style: italic;" class="fullpost">Keyword : Isolation, Identification, Methanol, Toxicity Test, Flavonoids, Sargasssum cristaefolium, Dihidroflavonol.</span><br /></div><span class="fullpost"><br /><br /><br /><br /><br /><br /><br /><br /></span><div class="blogger-post-footer">MEMUSNAHKAN TANDA TANYA ANDA. THANKS BRO !</div>Thailand aik aikhttp://www.blogger.com/profile/10964108109700651247noreply@blogger.com0tag:blogger.com,1999:blog-2030866544649181977.post-42579553190202542222010-05-26T18:18:00.004+07:002010-05-26T19:10:50.644+07:00MARINE ALGAL POLYPHENOLICSPolyphloroglucinol phenolics are the best known example of chemical deterrents against herbivores in temperate marine systems. However, most of the research on these compounds has been done in North America, where phenolic levels in algae are often low. I show here that algae in the Orders Fucales and Laminariales in temperate Australia and New Zealand typically contain very high levels of polyphenolics-much higher than species in these orders in North America. The median value for the distribution of mean phenolic levels for 25 North American species is 1.33% total phenolics (dry wt.); for 37 Australasian species, the median is 6.20%. Significant spatial, temporal, and intraplant variation in phenolic content occurs in a number of species in Australasia, but this does not significantly alter my major conclusion.<br /><br />Phenolic levels in drift algae (an important food source for some herbivores) detached for up to two weeks are also not significantly different from living, attached plants. Many species in the Fucales in Australasia also contain non-polyphenolic secondary metabolites that are not found in North American species. Thus herbivores in Australasia face greater amounts, and a greater range,of putative chemical defenses in brown algae than do herbivores in similar systems in North America. Any general theory for the evolution of marine plant/herbivore interactions must take into account such broad-scale biogeographical (and taxonomic) patterns.<div><br /><a onblur="try {parent.deselectBloggerImageGracefully();} catch(e) {}" href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEjC7TYsvgZIU0kPVFgAMmppce68dx6Xuy2UZJ2mOtaNTDglSyVvJbXBqWURo3Tc_f3O1ujFhDVxYbGxAEheju08xVi8Z3mvU7WAuXhs4PkHMJ6E3DAk4v2o09nhNHLT4wBey-1ZHF7dM_4/s1600/alga-edit21.jpg"><img style="float:left; margin:0 10px 10px 0;cursor:pointer; cursor:hand;width: 400px; height: 220px;" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEjC7TYsvgZIU0kPVFgAMmppce68dx6Xuy2UZJ2mOtaNTDglSyVvJbXBqWURo3Tc_f3O1ujFhDVxYbGxAEheju08xVi8Z3mvU7WAuXhs4PkHMJ6E3DAk4v2o09nhNHLT4wBey-1ZHF7dM_4/s400/alga-edit21.jpg" border="0" alt="" id="BLOGGER_PHOTO_ID_5475546305999026802" /></a>The diversity and intensity of selection pressure on organisms has been described as varying predictably across biogeographic zones, generally increasing with decreasing latitude. Apparent effects of this increased selective pressure in the tropics include patterns in species diversity (Pianka 1966), diversity and quantity of allelochemicals (Bakus and Green 1974; Levin 1971, 1976; Levin and York 1978; Hay and Fenical 1988; Coley and Aide 1991; Hay and Steinberg in press), predation intensity, inferred antipredatory morphological structures (Vermeij 1978; Jeanne 1979; Bertness et al. 1981; Heck and Wilson 1987) and herbivory (Levin 1976; Lubchenco and Gaines 1981; Gaines and Lubchenco 1982; Steneck 1988; Hay and Steinberg in press). In the marine environment, herbivory is most intense at low latitudes (Vermeij 1978; Lubchenco and Gaines 1981 ; Steneck 1988 ; Hay and Steinberg in press). Algal chemical defenses generally Offprint requests to: N.M.<br /><span class="fullpost"><br />Targett parallel this latitudinal variation in herbivory with increasing concentration and diversity of allelochemicals with decreasing latitude (Hay and Fenical 1988; Hay and Steinberg in press). Phloroglucinol-based polyphenolics (phlorotannins, see Ragan and Glombitza 1986), antifeedant allelochemicals which occur exclusively in brown algae (Phaeophyta), have been reported as an exception to this trend, increasing in concentration with increasing latitude (Steinberg and Paul 1990; Van Alstyne and Paul 1990; Steinberg et al. 1991 ; Steinberg and Van Altena in press).<br /><br />This is in contrast to terrestrial data on condensed tannins for broad leaved forest species, which show that temperate species have lower phenolic concentrations than tropical ones (Coley and Aide, 1991 and references therein). In marine temperate regions, where considerable data exist on phlorotannin concentrations, brown algae are characterized as either high or low phenolic species. High phenolic species are defined as those with phenolic concentrations > 2% of their dry weight, the threshold level at which herbivory is typically deterred (Swain 1979; Geiselman and McConnell 1981 ; Steinberg 1988). However, a high degree of inter- and intraspecific variability in phenolic concentration has been observed (Ragan and Glombitza 1986; Steinberg 1986, 1988, 1989).<br /><br />Phenolic concentrations in tropical phaeophytes have been reported only from Indo-Pacific species; therefore, a less complete picture is available for tropical than for temperate browns (Hay and Fenical 1988; Steinberg and Paul 1990; Van Alstyne and Paul 1990; Steinberg 1986, 1989; Steinberg et al. 1991 ; Steinberg and Van Altena in press). In the Indo-Pacific, phenolic concentrations have been found to be low, although Padina spp. from Magnetic Island, Australia (Steinberg et al. 1991) and individual plants in two other genera (Lobophora and Dictyopteris) were noted as exceptions (Steinberg and Paul 1990). Although brown algal phenolic concentrations have not been determined for any Caribbean species, patterns of herbivore preference have been used to suggest that polyphenolics might be high in some species (Norris and Fenical 1982). We examined phenolic levels in tropical phaeophytes from both the Caribbean and western Pacific and in selected species from the temperate western Atlantic and eastern Pacific (i.e. both coasts of North America). These levels were compared to literature values to determine: 1. Are there latitudinal trends in phenolic concentrations? 2. Are there interoceanic differences between tropical Old World (Indo-Pacific)and Neotropical (Caribbean) phaeophyte phenolic concentrations? 3. Does the magnitude of intraspecific phenolic variability in tropical and temperate phaeophytes overshadow observed latitudinal trends?</span></div><div><span class="fullpost"><br /><a onblur="try {parent.deselectBloggerImageGracefully();} catch(e) {}" href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEi6p-sL-hkVI0RD4fFu8lexqWxFhMPPgalX_yqVCHtza8TMzwWcnm3alLB_vCFanPv-ssRP6feoHq-Lewx61N_1d_Cerzxqio5tHb8ar4FrOlt_BhhgfJDRxZTWNtum1m4HeMEznWLrv8A/s1600/Serotonin.png"><img style="float:left; margin:0 10px 10px 0;cursor:pointer; cursor:hand;width: 183px; height: 101px;" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEi6p-sL-hkVI0RD4fFu8lexqWxFhMPPgalX_yqVCHtza8TMzwWcnm3alLB_vCFanPv-ssRP6feoHq-Lewx61N_1d_Cerzxqio5tHb8ar4FrOlt_BhhgfJDRxZTWNtum1m4HeMEznWLrv8A/s400/Serotonin.png" border="0" alt="" id="BLOGGER_PHOTO_ID_5475546311133786498" /></a><br /><b>Tropical Species</b><br />The Caribbean phaeophytes (orders Fucales and Dictyotales) that we examined had phenolic concentration levels ranging from 1.34% to 14.92% dry weight. Caribbean Fucales all had high phenolic concentrations (> 2 %) and tested positive for phloroglucinol derivatives. Two of the four Caribbean Dictyotales examined (Stypopodium zonale and Lobophora variegata in each of its three forms, Coen and Tanner 1989) also had high phenolic concentrations. The dry weight phenolic concentration values for the Lobophora forms and for Stypopodium (8.33% 13.39% and 14.92% respectively) far exceeded all previously reported values for species in this order. Thus, our data from Caribbean phaeophytes in which six of eight species produced phenolic concentrations in excess of 2% (3.37%-14.92%) show that high phlorotannin concentrations are not limited to temperate species. Tropical interocean differences are evident when comparing phenolic concentration values for phaeophyte genera common to the Indo-Pacific and Caribbean. Lobophora variegata, the only species examined in this study that is common to the tropical areas listed, showed low phenolic values for Pacific (0.81%, Hawaii, Table 1) and Indo-Pacific (<2%, p="0.006)," p="0.002)"> 2% dry weight), while species in the orders Laminariales and Dictyotales typically have low levels (Steinberg 1985, 1989; Ragan and Glombitza 1986; Steinberg and Paul 1990; Van Alstyne and Paul 1990; Steinberg et al. 1991 ; Steinberg and Van Altena in press). Earlier studies also show that polyphenolic levels in tropical Fucales and Dictyotales from the Indo-Pacific are low (Steinberg 1986, 1989; Hay and Fenical 1988; Steinberg and Paul 1990; Van Alstyne and Paul 1990; Steinberg et al. 1991). Our results clearly demonstrate that species in the tropics can be high in phenolics. Data from our study and from the literature, where extraction and quantification procedures allow comparisons to be made, also indicate that intraspecific variability may be as high as interspecific variability. Of the phenolic values obtained, most striking were the values obtained for the three forms of Lobophora (Coen and Tanner 1989) and for Stypopodium (8.33-13.39% and 14.92% dry weight respectively). Phloroglucinol and a variety of phenolic acids have been reported from Lobophora variegata (form not specified) collected in Brazil (Legaz et al. 1985). Acetate-derived phenolic lipids have been described from Lobophora papenfussii (Gerwick and Fenical 1982) and their presence in Lobophora variegata (form unspecified) from the Florida Keys has been hypothesized (Paul and Hay 1986). However, higher-molecular-weight phlorotannins are also evident (Folin-Denis test, Lindt test, 1H NMR) in molecular sizing<br />experiments done on aqueous extracts from each of the three forms of Lobophora collected in Belize (Boettcher and Targett unpublished data). Fresh Stypopodium is known to contain a series of primarily mevalonatederived low-molecular-weight phenolic metabolites (<> 100,000Da (Boettcher and Targett unpublished data).<br /><br />The absence of a latitudinal phlorotannin trend between Caribbean tropical and temperate phaeophytes and the presence of site-specific phlorotannin variability within species suggests that other factors may play a more critical role within a biogeographic region in determining phenolic concentrations. Variability in phenolic concentration may be influenced by extrinsic factors such as salinity (Ragan and Glombitza 1986), nutrient availability (Ilvessalo and Tuomi 1989), herbivore intensity (Van Alstyne 1988) and season (Ragan and Jensen 1978 ; Ragan and Glombitza 1986). Intrinsic plant factors such as size (Denton et al. 1990), age (Pederson 1984), and tissue type (Steinberg 1984; Tugwell and Branch 1989; Tuomi et al. 1989) may also play a role. The magnitude of the variation in phenolic concentration is often high enough to alter the palatibility of plants to herbivores (Swain 1979; Geiselman and McConnell 1981; Steinberg 1988). Studies regarding the effect of plant phlorotannin concentration on marine tropical herbivores have yielded conflicting results. Van Alstyne and Paul (1990) showed that phlorotannins from temperate species are effective deterrents against some tropical herbivores when they are incorporated into tropical analogues at concentrations > 2% dry wt, while Steinberg et al. (1991) showed that quantitative variability in temperate and tropical algal phenolic levels do not correlate with the susceptibility of these algae to herbivory. These and other studies make supportive arguments based upon the assumption that all tropical phaeophytes are typically low in phenolics and invoke physiological and cost arguments as explanations for their low concentrations (Steinberg 1986; Hay and Fenical 1988; Van Alstyne 1988; Steinberg and Paul 1990; Van Alstyne and Paul 1990; Steinberg et al. 1991; Hay and Steinberg in press; Steinberg and Van Altena in press). Our study shows that phenolics can be present in high and variable concentrations in tropical Caribbean phaeophytes, and thus the assumption that phlorotannins are of little consequence in tropical marine plant-herbivore interactions because of their low concentrations (Steinberg 1986; Hay and Fenical 1988; Van Alstyne 1988; Steinberg and Paul 1990; Van Alstyne and Paul 1990; Steinberg et al. 1991) is premature. </span></div><div><span class="fullpost"><br /><a onblur="try {parent.deselectBloggerImageGracefully();} catch(e) {}" href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEir58foyaIOPVFEtAcOw6LmTKSvMDPaWiAr09qKIqaJHZ011lWnWnpAbdBES7HG0ZDnn2qKDg0sDsqfrGviOb6zeyE-EUfxpp_vTMHsMzwZnzP6c5SIqpvYxxbrM0B6FWaK3VwgM4FyhBk/s1600/spirulina.jpg"><img style="float:left; margin:0 10px 10px 0;cursor:pointer; cursor:hand;width: 100px; height: 189px;" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEir58foyaIOPVFEtAcOw6LmTKSvMDPaWiAr09qKIqaJHZ011lWnWnpAbdBES7HG0ZDnn2qKDg0sDsqfrGviOb6zeyE-EUfxpp_vTMHsMzwZnzP6c5SIqpvYxxbrM0B6FWaK3VwgM4FyhBk/s400/spirulina.jpg" border="0" alt="" id="BLOGGER_PHOTO_ID_5475546313525499362" /></a>Our results in combination with previously published data suggest that there is an interoceanic difference between phenolic concentrations in tropical Indo-Pacific phaeophytes and Caribbean phaeophytes. Grazing intensity is higher in the Pacific and Indian oceans than in ecologically similar communities in the Atlantic (Vermeij 1978; Estes and Steinberg 1988; Steinberg and Van A1-tena in press). Grazing intensity thus correlates negatively with our observations of phaeophyte phenolic concentrations and calls into question the role of phlorotannins in defense. However, other extrinsic and intrinsic factors may confound the interpretation and should be examined (Bernays et al. 1989). To explain these differences and those in temperate and tropical marine plant-herbivore interactions, it is now evident that more subtle within-plant (Zucker 1983; Gaines 1985; Lewis et al. 1987; Coen and Tanner 1989) and among-herbivore (Gaines 1985; Hay et al. 1987; Horn 1989) characteristics must be examined. These include phenotypic variation in phenolic concentrations, phlorotannin size distributions, induction of phenolics by herbivores, as well as herbivore features such as gut pH and the presence of gut surfactants. Studies such as these will allow a further comparison between the importance of biological/physical factors and geographic distribution in determining phlorotannin concentrations.<br /><br /></span></div><div><span class="fullpost">Keterangan Gambar :</span></div><div><span class="fullpost">1. Jenis Alga Laut</span></div><div><span class="fullpost">2. Struktur Serotonin</span></div><div><span class="fullpost">3. Spirulina salah satu hasil alga laut</span></div><div><span class="fullpost"><br /></span></div><div><span class="fullpost"><br />Nb* Dari banyak sumber bacaan.<br /></span></div><div><span class="fullpost"><br /></span></div><div class="blogger-post-footer">MEMUSNAHKAN TANDA TANYA ANDA. THANKS BRO !</div>Thailand aik aikhttp://www.blogger.com/profile/10964108109700651247noreply@blogger.com0tag:blogger.com,1999:blog-2030866544649181977.post-29149691373647072902010-05-26T17:40:00.003+07:002010-05-26T18:11:35.421+07:00Brown Alga Sargassum asperifoliumMarine organisms have yielded a variety of secondary metabolites that possess novel chemical structures and interesting pharmacological activities (Stonik and Elyalov, 1986). Recently, researchers have described a wide range of biological activities for algal compounds including antibiotic, anti-HIV, anticoagulant, anticonvulsant, anti-inflamnatory, antineoplastic, and antitumor (Ayyad et al., 2002; Lincolon et al., 1991). <div><br /><a onblur="try {parent.deselectBloggerImageGracefully();} catch(e) {}" href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEhli_ft_oe9WR9YqV6saXHttI_Csxq-6dRn2TmytKkkm_jPbdy99JDJUoyVeq8B9iB5G1AMLNDco-VTrfeozRRNensdwT59Q49puaER1bvBCkRleN345DXtDzGB29gWENRHCkpJhfm0J9o/s1600/Sargassum+asprifolium.jpg"><img style="float:left; margin:0 10px 10px 0;cursor:pointer; cursor:hand;width: 216px; height: 216px;" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEhli_ft_oe9WR9YqV6saXHttI_Csxq-6dRn2TmytKkkm_jPbdy99JDJUoyVeq8B9iB5G1AMLNDco-VTrfeozRRNensdwT59Q49puaER1bvBCkRleN345DXtDzGB29gWENRHCkpJhfm0J9o/s400/Sargassum+asprifolium.jpg" border="0" alt="" id="BLOGGER_PHOTO_ID_5475534110630656114" /></a>A number of diterpenes and sterols have been isolated from the brown algae (Ayyad et al., 2001; Banaigs et al.,1983; Combaut et al., 1980; Enoki et al., 1982; Faulkner et al., 1977; Franciso et al., 1977). In the course of our investigation on the biologically active components of the sargassaceae algae, we report, the isolation and characterization of a new saringosterone (3), a known saringosterol (4), and a known diterpene dictyone (1) from the brown alga Sargassum asperifolium.<br /><br />Abaout Sargassum<br /><span class="fullpost"><br />Where seen? The largest of our brown seaweeds, this golden leafy seaweed with strange air bladders is commonly encountered on our Southern shores, but rarely on our Northern shores. It grows on the rocky shores as well as on coral rubble. It appears to be seasonal, sometimes forming a luxuriant golden carpet that covers vast areas of the shore, and washing up on the high tide line in huge heaps. At other times, only short, sparsely bladed specimens are seen, on coral rubble or rocks.<br /><br />Features: Sargassum is the largest and most plant-like brown seaweed on our shores. The 'stems' grow to about 20cm or longer. Attached to the stems are leaf-shaped blades and inflated air bladders. The 'leaves' may be narrow, broad or very small (1-5cm long). The small round to oval air bladders interspersed among the 'leaves' are often mistaken for fruits. Seaweeds don't produce fruits like seagrasses do. The sargassum's air bladders help the seaweed stay afloat, closer to sunlight. Thus, long pieces often form floating rafts even after they have broken off from their holdfast. Some sargassum species can reproduce by producing new plants from horizontal creeping 'stems'. This is an adaptation to living on slippery rocks at the splash zone of rocky shores.<br /><br />According to AlgaeBase: there are more than 580 current Sargassum species.<br /><br />Sargassum forest: Sargassum seaweeds are often covered with other tiny seaweeds growing on or entangled among the blades. In this tangled mess, all kinds of small creatures lurk, hiding from predator or prey, or both.<br /><br />Human uses: Sargassum seaweeds are eaten by people, and used fish bait in basket traps, animal feed, fertiliser, insect repellent. Various species are used as medicine for ailments ranging from children's fever, cholesterol problems, cleansing the blood, skin ailments.<br /><br />In the tropics, sargassum seaweeds are a significant source of alginates. They are also used as a component in animal feed and liquid plant food or plant biostimulants. Supplies come from harvested seaweeds, the seaweeds are not farmed.<br /><br /><span style="font-weight:bold;">Detail Of Sargassum asperifolium</span><br /><br />Classification:<br /><br />Empire : Eukaryota<br />Kingdom : Chromista<br />Subkingdom : Chromobiota<br />Infrakingdom : Heterokonta<br />Phylum : Heterokontophyta<br />Class : Phaeophyceae<br />Order : Fucales<br />Family : Sargassaceae<br />Genus : Sargassum<br />Species : Sargassum asperifolium Hering & G. Martens ex J. Agardh<br /><br />Publication details<br />Sargassum asperifolium var. dissimile Grunow 1916: 27<br /><br />Original publication:<br />Grunow, A. (1916). Additamenta ad cognitionem Sargassorum. Verhandlungen der Kaiserlich-Königlichen Zoologisch-Botanischen Gesellschaft in Wien 66: 1-48, 136-185.<br /><br />Type species<br />The type species (holotype) of the genus Sargassum is Sargassum bacciferum (Turner) C. Agardh.<br /><br />Status of name<br />This name is of an entity that is currently accepted taxonomically.<br /><br />Synonym(s)<br />No synonyms are currently included in AlgaeBase.<br /><br />General environment<br />This is a marine species.<br /><br />Detailed distribution with sources<br />(as Sargassum asperifolium var. dissimile Grunow)<br />Africa: Ethiopia (Papenfuss 1968).<br /><br />NCBI Nucleotide Sequences<br />No sequences have been found on the NCBI site.</span></div><div><span class="fullpost"><br /></span></div><div><span class="fullpost">Nb* dari berbagai sumber bacaan.<br /><br /></span></div><div class="blogger-post-footer">MEMUSNAHKAN TANDA TANYA ANDA. THANKS BRO !</div>Thailand aik aikhttp://www.blogger.com/profile/10964108109700651247noreply@blogger.com2tag:blogger.com,1999:blog-2030866544649181977.post-70818258163236603942010-05-26T16:45:00.005+07:002010-05-26T17:38:26.214+07:00Investigation of the antifouling constituents from the brown alga Sargassum muticum (Yendo) FensholtBy. Alexandra Bazes1, 5, *, Alla Silkina1, Philippe Douzenel2, Fabienne Faÿ1, Nelly Kervarec3, Danièle Morin1, Jean-Pascal Berge4 and Nathalie Bourgougnon1<br /><br />1. Introduction<br />Engineered structures such as ships and marine platforms, as well as offshore rigs and jetties, are under constant attack from the marine environment. These structures need to be protected from the influences of the key elements of the marine environment such as saltwater, biological attack and temperature fluctuations. The settlement and accumulation of marine organisms on an inanimate substrate can cause large penalties to engineered structures. In heat exchangers, biofouling can clog systems and on ship hulls it can increase the hydrodynamic drag, lower the manoeuvrability of the vessel and increase the fuel consumption. This leads to increased costs within the shipping industry through the increased use of manpower, fuel, material and dry docking time (Abarzua & Jakubowski, 1995, Lambert et al., 2006, Chambers et al., 2006).<br /><br /><a onblur="try {parent.deselectBloggerImageGracefully();} catch(e) {}" href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEgtRmJ6NetK1bw33p19eGiZyU8Ck11wqaYos_k9FXJgg6XsTzlRZY2sfmNshflx7ZMwghuoKm3q_GbSclMwkYcyJMPFF_rMwUJbsQ7PVcDGuBOz8dcxqDpFsF2e4u_LpSBftiMH8BSRzSw/s1600/Sargassum_muticum_fs.jpg"><img style="float:left; margin:0 10px 10px 0;cursor:pointer; cursor:hand;width: 229px; height: 400px;" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEgtRmJ6NetK1bw33p19eGiZyU8Ck11wqaYos_k9FXJgg6XsTzlRZY2sfmNshflx7ZMwghuoKm3q_GbSclMwkYcyJMPFF_rMwUJbsQ7PVcDGuBOz8dcxqDpFsF2e4u_LpSBftiMH8BSRzSw/s400/Sargassum_muticum_fs.jpg" border="0" alt="" id="BLOGGER_PHOTO_ID_5475524390788580866" /></a>The process of biological fouling is often grouped in the literature into key growth stages which include an initial accumulation of adsorbed organics, the settlement and growth of pioneering bacteria creating a biofilm matrix and the subsequent succession of micro and macrofoulers (Wahl, 1989, Abarzua & Jakubowski, 1995, Yebra et al., 2004). Methods for inhibiting both organic and inorganic growth on wetted substrates are varied but most antifouling systems take the form of protective coatings. Unfortunately, operational profiles vary; hence the application of one universal coating to ship hulls is unlikely and specific coatings designed for the particular needs of certain exposure and operational profiles may need to be targeted individually. Heavy metals and booster biocides such as Irgarol 1051 and Diuron are not an environmentally acceptable alternative due to increased concerns over their toxicity, but do offer cost benefits (Chambers et al., 2006). The International Maritime Organisation (IMO) legislation and the increased legislation of local and regional pesticide control authorities are the largest driving forces for the design and implementation of nontoxic antifouling coatings (Chambers et al., 2006).<br /><span class="fullpost"><br />Biomimetics approach implies the use of the natural world as a model on which to base an engineering development. Marine organisms have been shown to use both physical and chemical methods to protect themselves from biofouling (Bakus et al., 1986, Davis et al., 1989, Wahl, 1989, Steinberg et al., 1998, Fusetani, 2004, Bazes et al., 2006).<br />The introduced macroalga Sargassum muticum (Yendo) Fensholt (Heterokonta, Fucales) is<br />found along the coasts of South Brittany (Critchley et al., 1990, Plouguerné et al., 2006). Similar to many other macroalgae, S. muticum may accumulate quantities of secondary metabolites (Hay & Fenical, 1988, Steinberg, 1992, Hay, 1996) generally assumed to be a chemical defence against grazers and bacterial colonisation (Sieburth & Conover, 1965, Hay & Fenical, 1988, Harlin, 1996, Plouguerné et al., 2006). The chemical composition of Sargassum has been studied extensively and phlorotannins (Kubo et al., 1992), phlorethols (Banaimoon, 1992), sterols (Harvey & Kennicutt, 1992) and dicotylpthalate (Sastry & Rao, 1995) have been isolated. Various extracts from this alga have shown biological activities, including bactericidal and fungicidal activities (Sastry & Rao, 1994, 1995, Hellio et al., 2001, Bazes, 2006).<br />In this paper we report on the isolation and identification of a potential natural antifouling compound from a dichloromethane extract of S. muticum.<br /><br />2. Material and methods<br />The brown alga Sargassum muticum (Yendo) Fensholt was harvested in Locmariaquer<br />(47.55°N-2.90°W, Brittany, France) in March 2004. After collection, the material was rinsed in 3 sterile seawater and 5 % ethanol in order to remove any associated microflora. Algae were then dried at room temperature under shade, and stored in the dark before use. Extraction was performed as previously described by Hellio et al (2001). The dried algae were suspended by stirring in ethanol 95° (2000 g/12 L). After decantation, the resultant pellet was re-extracted five times in the same way. The alcoholic extracts were combined and evaporated under vacuum at low temperature (35°C). Distilled water (4L) was then added and partitioned with dichloromethane (4x4L). The organic phases were collected, left dry in presence of Na2SO4 for 24 h, filtered and concentrated under vacuum at low temperature (dichloromethane extract). The resulting dichloromethane extract (A) was stored at 4°C before use. The extraction yield was 0.85%.<br /><br />Biocides commonly used in commercial antifouling paints were also evaluated on marine<br />bacteria, microalgae and macroalgae spores. Diuron, Irgarol 1051, Tolylfluanid and<br />Dichlofluanid were provided by Nautix, France. Binders and paints. The binder used was purchased from ZENECA. It is a mixture of an acrylic copolymer (polybutylmethacrylate-co-polymethylmethacrylate) with rosin. The relative amount of rosin influences the erosion properties of the final paints. Paints were formulated with this polymer (cf. table I). All the ingredients were dispersed under vigorous agitation (2000rpm) for 1h. Then the paints were filtered through a 100 m sieve.<br /><br />Immersion and test procedures. Test panels were coated by using an automatic film applicator (Sheen 1137). The wet films were 200m thick. After drying, plates were immersed in the harbour of Lorient (Britanny, France) for two months, July and August, when the fouling pressure is the highest. The plates were immersed under the surface, where most of the fouling organisms live. Purification of the active extract. For each step of purification, the different fractions were tested against three agents of microfouling. The most active fraction was retained for a further purification step. 1.5g of the dichloromethane extract (A) was added to a Solid Phase Extraction (SPE) column (Chromabond SiOH, 150 mL/50 g, Macherey-Nagel) previously conditioned with hexane. Elution was carried out using a gradient of CH2Cl2/MeOH from 99:1 to 0:100 (v/v). The resulting fractions were collected, evaporated and stored at 4 °C before use. The most active fraction (20 mg) was then laid on a preparative pre-coated TLC plate (SIL G-200, Macherey-Nagel) and eluted with CH2Cl2/MeOH 85:15 (v/v). After drying, part of the plate was revealed with sulphuric vanillin (1 g of vanillin in 100 mL of MeOH and 1 mL of concentrated sulphuric acid). Each spot was then scratched, dissolved in CH2Cl2/MeOH 85:15 (v/v), centrifuged and the supernatants were evaporated and stored at 4 °C before use. The active spot was investigated on a HPLC system (Dionex) with a 600E pump and an ASI-100 autosampler injector and UV detection at 215 nm. Separation was performed on an Econosil C18 (Alltech) column (10 mm ID x 250 mm L) heated at 30°C. A multi-step eluting gradient (MeOH/H2O 85:15 0-15 min, MeOH/H2O 100:0 15-30min, MeOH/H2O 85:15 30-40 min) was used at a flow rate of 3 mL.min-1. The volume used for each injection was 500μL. Each peak was collected, evaporated and stored at 4 °C before use. Identification of the active compound<br /><br />4. Mass spectrometry experiments. An Agilent Technologies 1100 Series vacuum<br />degasser, LC pump and autosampler (Hewlett-Packard, Germany) were used to analyse the<br />fraction isolated after C18 HPLC. Twenty microliters of sample solutions were applied onto an analytical C18 reversed-phase column (Hypersil ODS, 250×4.6 mm, particle size 5 μm). The elution procedure consisted of an isocratic profile of methanol–water (15:85, v/v) for 5 min, followed by a linear gradient from 85 to 100% methanol over 15 min, and an isocratic profile with 100% methanol over 20 min. The LC flow (0.4 mL.min-1) was split (1/12) using a microsplitter valve (Upchurch Scientific, USA). The post-column additive, a mixture of 5 mM ammonium acetate and 0.05% trifluoroacetic acid (TFA) (Analysis grade, Carlo Erba) in methanol–water (50:50, v/v), was added using a Cole-Parmer (USA) syringe pump and a 2.5 mL SGE syringe at a flow-rate 150 μL.h-1. The LC-separated compounds were detected by electrospray ionization ion trap mass spectrometry (ESI-MS) using a Bruker Esquire-LC spectrometer (Bruker Daltonic, Germany) under positive-ion conditions. For each compound, two ions were formed: the [M+H]+ and the [M+Na]+ ions. The [M+H]+ ions were isolated for<br />MS–MS fragmentation. The MS–MS chromatographic analysis is segmented for the isolation and fragmentation of the eluted [M+H]+ ion. The electrospray used nitrogen as a nebulizing gas (pressure set to 15 p.s.i.) and a drying gas (flow set to 7 mL.min-1). The drying temperature was 300°C. The helium pressure in the ion trap was 6 x 10−6 mbar. Full-scan mode detection was used with a scan range from m/z 50 to 700. The software used was Bruker Esquire-LC NT version 6.08 and Agilent Technologies ChemStation May 1998.<br /><br />NMR experiments. NMR experiments were performed at 25°C in a Bruker Avance DRX 500 spectrometer equipped with an indirect 5 mm triple TBI 1H/{BB}/13C probehead using standard pulse sequences available in the Bruker software. The samples were dissolved in 700 μL of 99.8% MeOD. 1D 1H spectra were recorded at 500.13Mhz with a 30° pulse, a delay D1 of 2s and 64 scans. Chemical shifts were expressed in ppm relative to TMS (Tetrametylsilane) as external standard. Double-quantum filtered 1H-1H correlated spectroscopy (DQF COSY), Heteronuclear multiple quantum coherence (HMQC), Heteronuclear multiple bond coherence (HMBC) with a 60 ms mixing time were performed according to standard pulse sequences to assign 1H and 13C resonances.</span><div><span class="fullpost"><br />Gas chromatography experiments. Active fraction was evaporated under nitrogen and<br />methylated by contact with methanol/sulphuric acid (98:2, v/v) in excess for one night at 50°C. After cooling, 2 mL of pentane and 1 mL of water were added and vortexed. The upper organic phase was assayed using GC-MS on a Hewlett-Packard model 6890 series II gas chromatograph attached to an Agilent model 5973N selective quadripole mass detector. GCMS was connected to a computer with Hewlett-Packard chemstation and the ionisation voltage used was 70 eV at 250°C. The temperature of injector and interface were maintained at 250°C and Helium was used as a carrier gas under constant flow (1 mL.min-1). Separation was realised on a CP-Sil 5 CB low bleed MS (Chrompack; 60 m x 0.25 mm i.d., 0.25 μm film thickness). The oven temperature was programmed from 80 to 170 °C at a rate of 30 °C/min, then from 170 at 295 °C with a rate of 3 °C.min-1.<br /><br />Bioassays<br />Antibacterial activities. The marine bacterial strain was obtained from the Culture Collection of the IUT of Quimper (LUMAQ, UBO, France) and identified by the CIMB (Institut Pasteur, Paris, France) as Rhodobacteraceae bacterium R11 A. This bacterium was associated with immersed surfaces and isolated from decomposing seaweeds (Hellio et al., 2004). Antibacterial evaluation of the extracts and fractions was performed in 96-well plates as previously described in Bazes et al (2006). Samples of cultures grown overnight (2 × 108 cells/mL) were incubated with extracts and biocides (at the concentration of 25, 50, 100, 200 and 300 μg mL− 1) for 48 h at 20 °C (Maréchal et al., 2004). All inhibition assays were carried out in triplicate. Growth was monitored by measuring OD600 with a Packard Spectracount microplate spectrophotometer and the percentage of inhibition was calculated for each concentration:</span></div><div><span class="fullpost"><br />%inhibition=(ODc−ODc)/ODc×100 </span></div><div><span class="fullpost"><br /></span></div><div><span class="fullpost">where ODc is the mean optical density of the bacterial controls and ODt is the mean optical density of the test samples. Control testing with the solvents and N-decane 1% was performed for every assay and showed no inhibition of the microbial growth. Seawater was used as a negative control.</span></div><div><span class="fullpost"><br />Inhibition of phytoplankton growth. </span></div><div>Cylindrotheca closterium (Diatomophyceae, AC515) was obtained from the Culture Collection of Algae of the University of Caen (France). It was used as a common fouling species (Jackson, 1991, Hellio et al., 2004). Screening for bioactivity was performed as described by Sawant et al. (1995) and modified in Bazes et al (2006). The effect of algal extracts and fractions (at the concentration of 25, 50, 100, 200 and 300 μg mL− 1) was assessed after 72 h by estimating the chlorophyll-a (Aminot, 1983). All the screening experiments were carried out in triplicate. The percentage of growth inhibition was calculated:</div><div><br /></div><div><span class="fullpost">%inhibition=(chlac−chlat)/chlac×100 </span></div><div><span class="fullpost"><br /></span></div><div><span class="fullpost">where chlac is the mean concentration of chlorophyll-a of the algal controls and chlat is the mean concentration of chlorophyll-a of the test samples. Control tests with the solvents and N-decane 1% were performed for every assay and showed no inhibition of the microalgal growth. Seawater was used as a negative control.<br /><br />Inhibition of germination of Ulva lactuca spores. Ulva lactuca (Ulvales, Chlorophyta) samples were collected in July and September 2004 at Locmariaquer, South Brittany, France (47°33’N, 02°56’W). Spores were obtained using the osmotic method (Fletcher, 1989). Tests of algal extracts and fractions on spores were performed as described by Hattori and Shiruzi (1996) and Bazes et al. (2006), by determining the percentage of inhibition of germination of spores (600/mL) in plastic Petri dishes after incubation for 5 days at 20 °C under 24 h light. All the screening experiments were carried out in triplicate. The percentage of growth inhibition was calculated:<br /><br />%inhibition=(gsc−gst)/gsc×100<br /><br />where gsc is the mean number of germinated spores for the controls and gst is the mean number of germinated spores for the test samples. Seawater was used as a negative control.<br /><br />Toxicity<br />Cytotoxicity evaluation by cell viability was performed by the neutral red dye method<br />(McLaren et al., 1983) on 3T3 as described in Bazes et al. (2006). Cellular suspensions (3,5.105 3T3 cells mL− 1 purchased from Eurobio) were incubated with various concentrations of algae extracts and biocides (10–300 μg mL− 1, 4 wells per concentration) in 96-well plates (72 h, 37 °C, 5%CO2) in Eagle's MEM 10% FCS. The same experiment has been conducted with Vero cells. All the cytotoxicity experiments were carried out in triplicate. The cytotoxic concentration (CC50) was expressed by a percentage of destruction:<br /><br />%destruction=(ODc−ODt)/ODc×100<br /><br />where ODc is the mean optical density of the cell controls at 540 nm and ODt is the mean optical density of the test samples at 540 nm.<br /><br />Statistical analysis<br />Percentage of growth inhibition was calculated for each microfouling organisms as described previously. The 50% effective concentrations (EC50) and cytotoxic concentrations (CC50) were estimated by regression analysis with Prism software, Version 4 (GraphPad Software, Inc.). All calculations were based on measured concentrations of extracts, and CC50 and EC50 were given when it was in the range of concentrations.<br /><br />3. Results<br />In situ testing<br />Results of the in situ tests are shown on Figure 1. No barnacles or mussels were observed on the test rack. The paint including only copper is less efficient than the paints including the crude extract. When copper and crude extract are included together in the paint, there is much less fouling than on the other coatings. 37% of the plate painted with crude extract of S. muticum and copper are covered with young thalli of Ulva sp., while 92% of the plate painted only with S. muticum extract, and 100% of the plate painted only with copper are covered with different green algae (mostly from the genus Ulva), and red algae (mostly from the genus Polysiphonia). Well-developed thalli of Ulva sp. were observed on those last two plates.<br /><br />Identification of the active compound<br />Solid Phase Extraction of the crude extract (A) allowed for the isolation of an active fraction in the CH2Cl2/MeOH 70:30 part (B) (91.5mg). The preparative TLC of that sample gave 8 fractions. Fraction no.5 (C) (22.8mg) was active and it was analysed by HPLC on a C18 column using a MeOH/H2O gradient as the eluent. After HPLC, ten fractions were isolated. The eighth one (D) (2.7mg of a pale green oil) was inhibitory to the growth of the three organisms tested. This last fraction was isolated in large quantities for the identification of bioactive molecules. MS on the D fraction showed a peak corresponding to two ions. The m/z 413.4 ion was found in majority while the m/z 391.4 ion was in minority, corresponding to the [M+H]+ and [M+Na]+ ions of the octyl phthalate. MS-MS detection was then used for dentification. The m/z 413.4 ion gave no signal in those conditions, while the m/z 391.4 ion produced a m/z 149 fragment, typically representative of phthalates.<br /><br />NMR on the D fraction showed that protons from terminal methyl groups show one badly<br />defined triplet at 0.88 ppm (mainly from 16:0 acyl chains). A multiplet at 1.2 ppm is assigned to the methylene protons. The multiplet at 2.36 ppm corresponds to the CaH2 group and the signal at 1.58 ppm to the CbH2 group (where a and b positions are relative to the carbonyl group). Those signals reveal that this fraction is mostly constituted of lipid chains. The integration and the lack of unsaturated signals at about 5.5 ppm confirm that most of the lipid chains are 16:0 (palmitic acid). The HMQC spectrum allowed the specific assignment of 1J carbons and HMBC sequencing determined the shift of the carbonyl group. To confirm to the results obtained by NMR, and determine the abundance of fatty acids, GC-MS analyses were performed on every sample.<br /><br />The fatty acid content of every sample is shown in Table 2. The crude extract contains 99% fatty acids and 1% contaminant. This table highlights that the different steps used during the purification process led to the loss of most of the fatty acids present in the crude extract, the only main one remaining in the D fraction. The analysis of fraction D confirmed the results obtained with NMR. As it was not possible to separate the two main compounds from the D fraction, palmitic acid and dioctyl phthalate were purchased from Sigma and were investigated separately for their antifouling activity in order to determine the role of each in the activity of the fraction<br /><br />Antifouling activities of the different isolated fractions.<br />The antifouling activities of the crude extract, the HPLC purified fraction, the palmitic acid and dioctyl phthalate (Sigma) and commercial biocides were evaluated and are presented in Table 3. The remaining active fraction after the HPLC step (D) contains at least 70% palmitic acid and shows a better activity on every fouling organism tested than the four chemical biocides. Moreover, this fraction showed no toxicity on 3T3 cells. Palmitic acid purchased from Sigma was also tested for its antifouling activities and showed good antibacterial activity against R. bacterium R11A with an EC50 at 44μg.mL-1. Besides this antibacterial activity, palmitic acid also inhibits the development of a microalgal strain (C. closterium) at 45.5μg.mL-1 and the germination of spores from U. lactuca at 3μg.mL-1. Myristic (14:0) or stearic (18:0) acids were also tested on fouling organisms and none of them showed antifouling activity (data not shown).<br /><br />Those results also show that palmitic acid has a better antibacterial activity than dioctyl phthalate while the dioctyl phthalate is inactive at concentrations up to 300μg.mL-1. However, the comparison of the activity of those two products on C. closterium shows that the dioctyl phthalate is more efficient than the palmitic acid with an EC50 lower than 25μg.mL-1. This EC50 is the same as for the crude extract. This suggests a synergetic effect between the dioctyl phthalate and the palmitic acid on the growth of C. closterium. The biocides tested here showed a low antibacterial activity. Diuron and Dichlofluanid showed an inhibition of Rhodobacteraceae bacterium R11 A at less than 200μg mL− 1, while Tolylfluanid showed no bacterial inhibition under 300μg mL− 1. Conversely, they all showed a good microalgal inhibition under 25μg mL− 1. Irgarol, Tolylfluanid and dichlofluanid showed less inhibition of the germination of the spores than the extracts and purified fractions, while Diuron was active at 25μg mL−1. The four biocides tested here showed high toxicity against 3T3 cells with a CC50 under 32μg mL−1, while no cytotoxicity was observed at oncentration lower than 300μg.mL-1 for the crude extract and purified fractions.<br /><br />4. Discussion<br />In 2000, a study on the antifouling activity of extracts from 30 marine algae has been conduced (Hellio, 2000). Statistical analysis of this study allowed the isolation promising potential antifouling of extracts from the brown seaweed Sargassum muticum. This study was confirmed and completed by the work of Hellio et al. (2004), and the study from Bazes (2006) showed that the most efficient extract was produced from S. muticum harvested in March. The chemical composition of Sargassum has been studied extensively but the present investigation was undertaken considering that there is no report regarding antifouling activity of purified compounds derived from S. muticum.Palmitic acid is a common fatty acid in brown algae and in the genus Sargassum it can represent 20 to 40% of the total fatty acids (Vaskovsky et al., 1996, Li et al., 2002, Hossain et al., 2003, Kornprobst, 2005). In S. muticum it was shown to constitute 21.5% of the total fatty acids (Vaskovsky et al., 1996). Fatty acids can be produced from triglycerides by action of lipases and have to be included in chemical ecology studies (Noguchi et al., 1979). The fats and fatty acids from marine organisms can play an important role due to the wide diversity of their biological characteristics and their oxidative enzymes leading to the formation of many other bioactive secondary metabolites (Ganti et al., 2006). Indeed, some fatty acids have shown antibacterial or bacteriostatic activities (C8-C12), while C4-C12 fatty acids have antifungal activities and C7-C12 fatty acids inhibit the growth of Chlorella sp (Noguchi et al., 1979). Active antibacterial extracts from different brown algae (Alaria marginata, Desmarestia ligulata, Dictyota pfaffii, Egregia menziesii, Eisenia arborea, Fucus distichus, Laminaria saccharina, Macrocystis integrifolia, Nereocystis luetkeana and Pleurophycus gardneri) have been found to be made up of saturated and unsaturated fatty acids, with a predominance of myristic, palmitic, oleic, arachidonic and eicosapentaenoic acids (Rosell & Srivastava, 1987, Barbosa et al., 2007). A mixture of fatty acids from a lipophilic fraction from Skeletonema costatum, has also shown an interesting level of inhibition on the growth of Vibrio anguillarum and other pathogens associated with the aquaculture industry (Naviner et al., 1999). Hexadecyl palmitate isolated from the alcyonacean soft coral Sinularia polydactyla was also shown to be active against Vibrio harveyi (Risk et al., 1997). The sulphoglycerolipid 1-O-palmitoyl-3-O(6′-sulpho-α-quinovopyranosyl)-glycerol isolated from the methanolic extract of the brown seaweed Sargassum wightii is active against Xanthomonas oryzae. This compound is mainly formed from palmitic acid (Arunkumar et al., 2005). </span></div><div><span class="fullpost"><br /></span></div><div><span class="fullpost">A method developed to control biofouling using polyglycol fatty ester has shown that pure palmitic acid may be used to inhibit bacteria from adhering to a submergible surface (Glover et al., 1997). Those studies confirm the biological activity of palmitic acid observed in our work. The type and amount of free fatty acids can then have a role in the overall defence against microbial colonisation (Benkendorff et al., 2005), but we have shown here that a fatty acid can have an effect on other microfouling organisms. However, we have also highlighted the presence of the 1,2 benzenedicarboxylic acid, bis(2-ethylhexyl) ester (or dioctyl phthalate; di-(2-ethylhexyl)-phthalate or DEHP), which is a plasticizer and constitutes 16% of the active fraction of S. muticum. Pthalate esters are likely contaminants from plastics in the laboratory encountered during the extraction or isolation process and are commonly found during natural products isolation. However, phthalate ester may also come from the coastal environment and/or reflect a phenomenon of bioaccumulation (Peakall, 1975). Phthalate esters have been found in soils, plants, and aquatic organisms (Morris, 1970, Peakall, 1975, Melancon & Lech, 1976, Noguchi et al., 1979, Wofford et al., 1981, Stales et al., 1997, Chen, 2004, Mackintosh et al., 2004, Cho et al., 2005). Because of their lipophilicity, they can be potentially bioaccumulated by organisms (Mackintosh et al., 2004). The biosynthesis of di-(2-ethylhexyl)-phthalate has been studied by Chen (2004), who has shown that the red alga Bangia atropurpurea was synthesising this compound de novo. In algae, di-(2-ethylhexyl)-phthalate has been isolated from Ceramium rubrum, but the origin of this phthalate had not been elucidated (Noguchi et al., 1979). Dioctyl<br />phthalate has also been isolated from the brown algae S. wightii (Sastry & Rao, 1995), Ishige okamurae (Cho et al., 2005) and S. confusum (Ganti et al., 2006). The dioctyl phthalate isolated from S. wightii has shown antibacterial activity against Staphylococcus aureus, Proteus vulgaris, E. coli, Salmonella typhi, S. paratyphi A, S. typhiridium and Pseudomonasaeruginosa (Sastry & Rao, 1995). This phthalate was isolated in a lipid fraction, not unlike in our study. The other extracts of algae studied by those authors and harvested at the same place did not show any antibacterial activity (Sastry & Rao, 1994) which suggested that the antibacterial compound of interest did not come from the environment. Di-n-octylphthalate (DNOP) has been isolated from Ishige okamurae and tested against the mussel Mytilus edulis and the green alga U. prolifera (Cho et al., 2005). Total repulsion of the fussel feet was induced by 0.3mM of DNOP, and 1mM of DNOP showed a reduction of 7.5% in spore fixation compared to a seawater control. Dioctyl phthalate also has been isolated from S.confusum and tested on spore attachment of U. pertusa (Ganti et al., 2006). Concentrations of 1 to 100 μg.mL-1 inhibited 53 to 86% of spore attachment.</span></div><div><span class="fullpost"><br />The role of the phthalate ester in the active fraction of S. muticum does not seem to be </span></div><div><span class="fullpost">important, except against the growth of the phytoplanktonic strain, but it would be interesting to determine its origin.<br /><br />In conclusion, fatty acid esters can then play an important role in the defence and protection against bacterial development, providing that they can be present in sufficient quantities on the considered surface (Benkendorff et al., 2005). The relevant literature leads us to believe that palmitic acid could be responsible for the antifouling activity observed in the active fraction isolated from S. muticum. Two patents (Glover et al., 1997, Risk et al., 1997) already showed the potential of pure palmitic acid as an antibacterial compound which could be used 9 in wood protection (Risk et al., 1997), or of one of its derivate, hexadecyl palmitate, which could inhibit bacterial colonisation of a submersed surface (Glover et al., 1997). The tests conducted with commercial palmitic acid on representative organisms of primary colonisation, show good activity at low concentrations. Moreover, no toxicity was observed on the cell models used. This compound has potential for the development of an environmentally friendly antifouling product. Furthermore, it can be easily purchased, so there is no need to carry out expensive and time-consuming extractions from S. muticum. New assays in paints for commercial palmitic acid and D fraction are currently under development to compare their activity in vivo.<br /><br />References<br />Abarzua S., Jakubowski S (1995). Biotechnological investigation for the prevention of<br />biofouling: I. Biological and biochemical principles for the prevention of biofouling. Mar. Ecol. Prog. Ser. 123: 301-312<br />Arunkumar K., Narayanan Selvapalam N., Rengasamy R. (2005). The antibacterial<br />compound sulphoglycerolipid 1-0 palmitoyl-3-0(6'-sulpho-alpha-quinovopyranosyl)-glycerol from Sargassum wightii Greville (Phaeophyceae) Bot. Mar. 48 (5): 441-445<br />Bakus G.J., Targett N.M. & Schulte B. (1986). Chemical ecology of marine organisms: an overview. J. Chem. Ecol. 12 (5): 951-987<br />Banaimoon S.A. (1992) Fatty acids in marine macroalgae from southern Yemen (Hadarmout) including occurrence of eicosatetraenoic (20:4) and eicosapentaenoic (20:5) acids. Bot. Mar. 35: 165–168.<br />Barbosa, J. P., Fleury B. G., da Gama B. A. P., Teixeira V.L., Pereira R.C. (2007). Natural products as antifoulants in the Brazilian brown alga Dictyota pfaffii (Phaeophyta, Dictyotales). Biochem. Syst. Ecol. 35 (8): 549-553.<br />Bazes A. (2006) Recherche et valorisation de principes actifs antifouling isolés à partir de trois macroalgues. Thèse de doctorat, Université de Bretagne-Sud.<br />Bazes A., Silkina A., Defer D., Bernède-Bauduin C., Quéméner E., Braud J-P., Bourgougnon N. (2006) Active substances from Ceramium botryocarpum used as antifouling products in aquaculture. Aquaculture 258 (1-4): 664-674<br />Benkendorff K., Davis A.R., Rogers C.N., Bremner J.B. (2005) Free fatty acids and sterols in the benthic spawn of aquatic molluscs, and their associated antimicrobial properties. J. Exp. Mar. Biol. Ecol. 316 (1): 29-44<br />Chambers L.D., Stokes K.R., Walsh F.C., Wood R.J.K. (2006) Modern approaches to marine antifouling coatings. Surf. Coat. Tech. 201 (6): 3642-3652<br />Chen C.Y. (2004) Biosynthesis of di-(2-ethylhexyl) phthalate (DEHP) and di-n-butyl phthalate (DBP) from red alga Bangia atropurpurea. Water Res. 38(4):1014-1018.<br />Cho J-Y, Choi J-S, Kang S-E, Kim J-K, Shin H-W, Hong Y-K . (2005) Isolation of antifouling active pyroglutamic acid, triethyl citrate and di-n-octylphthalate from the brown seaweed Ishige okamurae. J. Appl. Phycol. 17: 431-435<br />Critchley A.T., Farnham W.F., Yoshida T., Norton T.A. (1990) A bibliography of the invasive alga Sargassum muticum (Yendo) Fensholt (Fucales, Sargassaceae). Bot. Mar. 33: 551-562<br />Davis A.R., Targett N.M., Mc Connel O.J., Young C.M. (1989) Epibiosis of marine algae and benthic invertebrates : natural products chemistry and other mecanisms inhibiting settlement and overgrowth.In: Scheuer P.J., Editor, Bioorg. Mar. Chem. 3, Springer-Verlag, Berlin, pp. 85-114<br />Fletcher R.L. (1989) A bioassay technique using the marine fouling green alga Enteromorpha. Int. biodeterior. 25: 407-422<br />Fusetani N. (2004) Biofouling and antifouling. Natural Product Reports 21: 94–104<br />Ganti V.S., Kim K.H., Bhattarai H.D., Shin H.W. (2006) Isolation and characterisation of some antifouling agents from the brown alga Sargassum confusum. J. Asian Nat. Prod. Res. 2006, 8(4): 309-315<br />Glover D.E., Whittemore M.S., Bryant S.D. (1997) Methods and compositions for controlling biofouling using polyglycol fatty acid esters. International Patent Application WO 97/11912<br />Harlin M. (1996) Allelochemistry in marine algae. Crit. Rev. Plant. Sci. 5(3): 237-249<br />Harvey H.R., Kennicutt M.C. (1992) Selective alteration of Sargassum lipids in anoxic<br />sediments of the Orca basin. Org. Geochem. 18 (2):181-187<br />Hattori T., Shizuri Y. (1996) A screening method for antifouling substances using spores of the fouling macroalga Ulva conglobata Kjellman. Biofouling 8: 147-160<br />Hay M.E., Fenical W (1988) Marine Plant-Herbivore Interactions: The Ecology of Chemical Defense. Ann. Rev. Ecol. Syst. 19: 111-145<br />Hay M.E. (1996). Marine chemical ecology : what’s known and what’s next? J. Exp. Mar.<br />Biol. Ecol. 200: 103-134<br />Hellio C. (2000) Recherche de nouvelles substances à activité antifouling à partir de<br />macroalgues du Littoral Breton. Thèse de Doctorat Sciences de la Vie, Université de La Rochelle.<br />Hellio C., De La Broise D., Dufossé L., Le Gal Y., Bourgougnon N. (2001) Inhibition of marine bacteria by extracts of macroalgae: potential use for environmentally friendly antifouling paints. Mar. Environ. Res. 52: 231-247<br />Hellio C., Marechal J-P., Véron B., Bremer A.G., Clare A.S., Le Gal Y. (2004) Seasonal variation of antifouling activities of marine algae from the Brittany coast (France). Mar. biotechnol. 6(1): 67-82<br />Hossain Z., Kurihara H., Takahashi K. (2003) Biochemical composition and lipid compositional properties of the brown alga Sargassum horneri. Pakistan J. Biol. Sci. 6(17): 1497-1500<br />Jackson S.M. (1991) Microalgae: Their status as fouling organisms. Oebalia 17 (1): 295-303 Kornprobst J-M. Substances naturelles d’origine marine, Tome 1 : Généralités, microorganismes, algues. Tec & Doc, Paris, 2005.<br />Kubo I., Himejima M., Tsujmoto K., Muroi H., Ichikawa N. (1992) Antibacterial activity of crinitol and its potentiation. J. Nat. Products 55 (6):780–785.<br />Lambert S.J., Thomas K.V., Davy A.J. (2006) Assessment of the risk posed by the antifouling booster biocides Irgarol 1051 and diuron to freshwater macrophytes. Chemosphere 63(5): 734-743<br />Li X., Fan X., Han L., Lou Q. (2002) Fatty acids of some algae from the Bohai Sea.<br />Phytochemistry 59(2): 157-61<br />Mackintosh C.E., Maldonado J., Hongwu J., Hoover N, Chong A, Ikonomou MG, Gobas FA.<br />(2004) Distribution of phthalate esters in a marine aquatic food web: comparison to<br />polychlorinated biphenyls. Environ. Sci. Technol. 38(7): 2011-20<br />McLaren C., Ellis M. N., Hunter G. A. (1983) A colorimetric assay or the measurement of the sensitivity of Herpes simplex viruses to antiviral agents. Antivir. Res. 3: 223-234<br />Melancon M.J. Jr, Lech J.J. (1976) Distribution and biliary excretion products of di-2-ethylhexyl phthalate in rainbow trout. Drug Metab. Dispos. 4(2): 112-118<br />Morris RJ. (1970) Phthalic acid in deep sea jellyfish Atolla. Nature 227: 1264<br />Naviner M., Bergé J-P., Durand P., Le Bris H. (1999) Antibacterial activity of the marine diatom Skeletonema costatum against aquacultural pathogens. Aquaculture, 174: 15-24<br />Noguchi T., Ikawa M., Uebel J.J., Andersen K.K. (1979) Lipid constituents of the red algae Ceramium rubrum. A search for antimicrobial and chemical defense substances. In: Hoppa HA, Levring T., Tanaka Y., editors. Marine algae in pharmaceutical science. New York: Walter de Gruyter & co, pp. 711-718<br />Peakall DB. (1975) Phthalate esters: Occurence and biological effects. Residue Rev. 54: 1-41<br />Phillips D. (1977) The use of biological indicator organisms to monitor trace metal pollution in marine and estuarine environments-a review. Environ Pollut. 13 (4): 281-317<br />Plouguerne, E., Le Lann K., Connan S., Jechoux G., Deslandes E., Stiger-Pouvreau V.<br />(2006). Spatial and seasonal variation in density, reproductive status, length and phenolic content of the invasive brown macroalga Sargassum muticum (Yendo) Fensholt along the coast of Western Brittany (France). Aquat. Bot. 85 (4):337-346.<br />Risk M., Harrison P., Lewis J. (1997) Wood preserving composition. International Patent Application WO 97/34747<br />Rosell K, Srivastava L. (1987) Fatty acids as antimicrobial substances in brown algae. Hydrobiologia 151-152 (1): 471-475<br />Sastry V.M.V.S, Rao G.R.K. (1994) Antibacterial substances from marine algae : successive extraction using benzene, chloroform and methanol. Bot. Mar. 37 (4): 357-360<br />Sastry V.M.V.S, Rao G.R.K. (1995) Dioctyl phthalate and antibacterial compound from<br />marine brown alga Sargassum wightii. J. Appl. Phycol. 7: 185-186<br />Sawant, S.S., Sonak, S., Garg, A. (1995) Growth inhibition of fouling bacteria and diatoms by extract of terrestrial plant, Derris scandens (Dicotyledonae:Leguminocae). Indian J. Mar. Sci. 24 (4): 229-230<br />Sawidis T., Brown M.T., Zachariadis G., Sratis I.. (2001) Trace metal concentrations in marine macroalgae from different biotopes in the Aegean Sea. Environ Int. 27: 43-47<br />Sieburth, J.M, Conover J.T. (1965) Sargassum tannin, an anti-biotic which retards fouling. Nature 208: 52-53<br />Stales C.A., Peterson D.R., Parkerton T.F., Adams W.J. (1997) The environmental fate of phthalate esters: a literature review. Chemosphere 35(4): 667-749<br />Steinberg P.D. (1992) Geographical variation in the interaction between marine herbivores and brown algal secondary metabolites. In: V.J. Paul, Editor, Ecological Roles of Marine Natural Products, Cornell University Press, Ithaca pp. 51–92.<br />Steinberg P.D., de Nys, R., Kjelleberg, S. (1998) Chemical inhibition of epibiota by Australian seaweeds. Biofouling 12: 227-244<br />Subramonia Thangam T., Kathiresan K. (1991) Mosquito larvicidal effect of seaweed<br />extracts. Bot. Mar. 34 (5): 433–435.<br />Vaskovsky, V.E., Khotimchenko, S.V., Xia, B., Hefang L. (1996) Polar lipids and fatty acids of some marine macrophytes from the Yellow Sea. Phytochemistry 42: 1347-1356<br />Wahl M. (1989) Marine epibiosis : I. Fouling and antifouling : some basic aspects. Mar. Ecol. Prog. Ser. 58: 175-189<br />Wahl M., Kröger K., Lenz M. (1998) Non-toxic protection against epibiosis. Biofouling 12 (1-3): 205-226<br />Wofford H.W., Wilsey C.D., Neff G.S., et al. (1981) Bioaccumulation and metabolism of<br />phthalate esters by oysters, brown shrimp and sheepshead. Ecotox. Environ. Safe. 5(2): 202-210<br />Yebra D.M., Kiil S., Dam-Johansen K. (2004) Antifouling technology- past, present and future step towards efficient and environmentally friendly antifouling coatings. Prog. Org. Coat. 50: 75-104<br /><br /><span style="font-weight:bold;">Source :</span><br />Journal of Applied Phycology August 2009, Volume 21, Number 4, Pages 395-403<br />http://dx.doi.org/10.1007/s10811-008-9382-9<br />© 2009 Springer. Part of Springer Science+Business Media<br />The original publication is available at http://www.springerlink.com<br /><br /></span></div><div class="blogger-post-footer">MEMUSNAHKAN TANDA TANYA ANDA. THANKS BRO !</div>Thailand aik aikhttp://www.blogger.com/profile/10964108109700651247noreply@blogger.com0tag:blogger.com,1999:blog-2030866544649181977.post-52520560690323871402010-02-04T20:22:00.004+07:002010-02-04T20:45:44.405+07:00PHAGOCYTOSIS<a onblur="try {parent.deselectBloggerImageGracefully();} catch(e) {}" href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEgwjS3bnSxEIj-rxh-y-wKIaGfEFngihyphenhyphenp3VtDCk3tcbnSdq_dXrivgfRuyalNnKh4dLrZVmYLEOEJQed5ahJc48s44L6weaHULbH-_oRlfruFyCcfdoRu9WXIEJSRi0gx8wXfmgB8JF9I/s1600-h/phagocytosis+cell05.jpg"><img style="float:left; margin:0 10px 10px 0;cursor:pointer; cursor:hand;width: 320px; height: 284px;" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEgwjS3bnSxEIj-rxh-y-wKIaGfEFngihyphenhyphenp3VtDCk3tcbnSdq_dXrivgfRuyalNnKh4dLrZVmYLEOEJQed5ahJc48s44L6weaHULbH-_oRlfruFyCcfdoRu9WXIEJSRi0gx8wXfmgB8JF9I/s320/phagocytosis+cell05.jpg" border="0" alt="" id="BLOGGER_PHOTO_ID_5434383767376264066" /></a><br />Phagocytosis is the cellular process of Phagocytes and Protists of engulfing solid particles by the cell membrane to form an internal phagosome, which is a food vacuole, or pteroid. Phagocytosis is a specific form of endocytosis involving the vesicular internalization of solid particles, such as bacteria, and is therefore distinct from other forms of endocytosis such as pinocytosis, the vesicular internalization of various liquids. Phagocytosis is involved in the acquisition of nutrients for some cells, and in the immune system it is a major mechanism used to remove pathogens and cell debris. Bacteria, dead tissue cells, and small mineral particles are all examples of objects that may be phagocytosed.<br /><br />The process is only homologous to eating at the level of single-celled organisms; in multicellular animals, the process has been adapted to eliminate debris and pathogens, as opposed to taking in fuel for cellular processes, except in the case of the Trichoplax<br /><br />1. In immune system<br />Phagocytosis in mammalian immune cells is activated by attachment to Pathogen-associated molecular patterns (PAMPS), which leads to NF-κB activation. Opsonins such as C3b and antibodies can act as attachment sites and aid phagocytosis of pathogens.[1]<br />Engulfment of material is facilitated by the actin-myosin contractile system. The phagosome of ingested material is then fused with the lysosome, leading to degradation<br /><span class="fullpost"><br />Degradation can be oxygen-dependent or oxygen-independent.<br />• Oxygen-dependent degradation depends on NADPH and the production of reactive oxygen species. Hydrogen peroxide and myeloperoxidase activate a halogenating system which leads to the destruction of bacteria.<br />• Oxygen-independent degradation depends on the release of granules, containing proteolytic enzymes such as defensins, lysozyme and cationic proteins. Other antimicrobial peptides are present in these granules, including lactoferrin which sequesters iron to provide unfavourable growth conditions for bacteria.<br /><br />It is possible for cells other than dedicated phagocytes (such as dendritic cells) to engage in phagocytosis.[2]<br /><br />2. In Apoptosis<br />Following apoptosis, the dying cells need to be taken up into the surrounding tissues by macrophages in a process called Efferocytosis. One of the features of an apoptotic cell is the presentation of a variety of intracellular molecules on the cell surface, such as Calreticulin, Phosphatidylserine (From the inner layer of the plasma membrane), Annexin A1 and oxidised LDL. These molecules are recognised by receptors on the cell surface of the macrophage such as the Phosphatidylserine Receptor, or by soluble (free floating) receptors such as Thrombospondin 1, Gas-6 and MFG-E8, which then themselves bind to other receptors on the macrophage such as CD36 and Alpha-V Beta-3 Integrin.<br /><br />2. In protists<br />In many protists, phagocytosis is used as a means of feeding, providing part or all of their nourishment. This is called phagotrophic nutrition, as distinguished from osmotrophic nutrition, which takes place by absorption.<br />• In some, such as amoeba, phagocytosis takes place by surrounding the target object with pseudopods, as in animal phagocytes. In humans, Entamoeba histolytica can phagocytose red blood cells.[3] This process is known as "erythrophagocystosis", and is considered the only reliable way to distinguish Entamoeba histolytica from noninvasive species such as Entamoeba dispar.[4]<br />• Ciliates also engage in phagocytosis.[5] In ciliates there is a specialized groove or chamber in the cell where phagocytosis takes place, called the cytostome or mouth.<br />The resulting phagosome may be merged with lysosomes containing digestive enzymes, forming a phagolysosome. The food particles will then be digested, and the released nutrients are diffused or transported into the cytosol for use in other metabolic processes.<br /><br />Mixotrophy can involve phagotrophic nutrition and phototrophic nutrition.[6]<br /><br />CELL (BIOLOGY)<br /><br />often called the building bricks of life.[1] Some organisms, such as most bacteria, are unicellular (consist of a single cell). Other organisms, such as humans, are multicellular. (Humans have an estimated 100 trillion or 1014 cells; a typical cell size is 10 µm; a typical cell mass is 1 nanogram.) The largest known cell is an unfertilized ostrich egg cell.[2]<br /><br />In 1835 before the final cell theory was developed, a Czech Jan Evangelista Purkyně observed small "granules" while looking at the plant tissue through a microscope. The cell theory, first developed in 1839 by Matthias Jakob Schleiden and Theodor Schwann, states that all organisms are composed of one or more cells. All cells come from preexisting cells. Vital functions of an organism occur within cells, and all cells contain the hereditary information necessary for regulating cell functions and for transmitting information to the next generation of cells.[3]<br />The word cell comes from the Latin cellula, meaning, a small room. The descriptive name for the smallest living biological structure was chosen by Robert Hooke in a book he published in 1665 when he compared the cork cells he saw through his microscope to the small rooms monks lived in.[4]<br /><br />General Principles<br />Each cell is at least somewhat self-contained and self-maintaining: it can take in nutrients, convert these nutrients into energy, carry out specialized functions, and reproduce as necessary. Each cell stores its own set of instructions for carrying out each of these activities.<br /><br />All cells have several different abilities:[5]<br />• Reproduction by cell division: (binary fission/mitosis or meiosis).<br />• Use of enzymes and other proteins coded for by DNA genes and made via messenger RNA intermediates and ribosomes.<br />• Metabolism, including taking in raw materials, building cell components, converting energy, molecules and releasing by-products. The functioning of a cell depends upon its ability to extract and use chemical energy stored in organic molecules. This energy is released and then used in metabolic pathways.<br />• Response to external and internal stimuli such as changes in temperature, pH or levels of nutrients.<br />• Cell contents are contained within a cell surface membrane that is made from a lipid bilayer with proteins embedded in it.<br />Some prokaryotic cells contain important internal membrane-bound compartments,[6] but eukaryotic cells have a specialized set of internal membrane compartments.<br /><br />Anatomy of cells<br />There are two types of cells: eukaryotic and prokaryotic. Prokaryotic cells are usually independent, while eukaryotic cells are often found in multicellular organisms.<br /><br />Prokaryotic cells<br />eukaryotes. There are two kinds of prokaryotes: bacteria and archaea; these share a similar overall structure.<br /><br />A prokaryotic cell has three architectural regions:<br />• on the outside, flagella and pili project from the cell's surface. These are structures (not present in all prokaryotes) made of proteins that facilitate movement and communication between cells;<br />• enclosing the cell is the cell envelope - generally consisting of a cell wall covering a plasma membrane though some bacteria also have a further covering layer called a capsule. The envelope gives rigidity to the cell and separates the interior of the cell from its environment, serving as a protective filter. Though most prokaryotes have a cell wall, there are exceptions such as Mycoplasma (bacteria) and Thermoplasma (archaea)). The cell wall consists of peptidoglycan in bacteria, and acts as an additional barrier against exterior forces. It also prevents the cell from expanding and finally bursting (cytolysis) from osmotic pressure against a hypotonic environment. Some eukaryote cells (in plants and fungi) also have a cell wall;<br />• inside the cell is the cytoplasmic region that contains the cell genome (DNA) and ribosomes and various sorts of inclusions. A prokaryotic chromosome is usually a circular molecule (an exception is that of the bacterium Borrelia burgdorferi, which causes Lyme disease). Though not forming a nucleus, the DNA is condensed in a nucleoid. Prokaryotes can carry extrachromosomal DNA elements called plasmids, which are usually circular. Plasmids enable additional functions, such as antibiotic resistance.<br /><br />Eukaryotic cells<br />Eukaryotic cells are about 10 times the size of a typical prokaryote and can be as much as 1000 times greater in volume. The major difference between prokaryotes and eukaryotes is that eukaryotic cells contain membrane-bound compartments in which specific metabolic activities take place. Most important among these is the presence of a cell nucleus, a membrane-delineated compartment that houses the eukaryotic cell's DNA. It is this nucleus that gives the eukaryote its name, which means "true nucleus." Other differences include:<br />• The plasma membrane resembles that of prokaryotes in function, with minor differences in the setup. Cell walls may or may not be present.<br />• The eukaryotic DNA is organized in one or more linear molecules, called chromosomes, which are associated with histone proteins. All chromosomal DNA is stored in the cell nucleus, separated from the cytoplasm by a membrane. Some eukaryotic organelles such as mitochondria also contain some DNA.<br />• Eukaryotes can move using cilia or flagella. The flagella are more complex than those of prokaryotes.<br /><br />PHAGOCYTES<br /><br />Phagocytes are the white blood cells that protect the body by ingesting (phagocytosing) harmful foreign particles, bacteria and dead or dying cells. They are essential for fighting infections, and for subsequent immunity.[1] Phagocytes are important throughout the animal kingdom,[2] and are highly developed in vertebrates.[3] One liter of human blood contains about six billion phagocytes.[4] Their name comes from the Greek phagein, 'to eat or devour', and kutos, 'hollow vessel'.[5] Phagocytes were first discovered in 1882 by Ilya Ilyich Mechnikov while he was studying starfish larvae.[6] Mechnikov was awarded the 1908 Nobel Prize in Physiology or Medicine for his discovery.[7] Phagocytes occur in many species; some amoebae behave like macrophages which suggests that phagocytes appeared early in the evolution of life.[8]<br /><br />Phagocytes of humans and other animals are called professional or non-professional, depending on how effective they are at phagocytosis.[9] The professional phagocytes include cells called neutrophils, monocytes, macrophages, dendritic cells, and mast cells.[10] The main difference between professional and non-professional phagocytes is that the professional phagocytes have molecules called receptors on their surfaces that can detect harmful objects, such as bacteria, that are not normally found in the body.[11] Phagocytes are therefore crucial in fighting infections, as well as in maintaining healthy tissues by removing dead and dying cells that have reached the end of their life-span.[12]<br /><br />During an infection, chemical signals attract phagocytes to places where the pathogen has invaded the body. These chemicals may come from bacteria, or from other phagocytes already present. The phagocytes move by a method called chemotaxis. When bacteria touch a phagocyte, they bind to the receptors on the phagocyte's surface and are consumed.[13] When a pathogen enters some phagocytes, this can trigger a chemical attack by the phagocytes that uses oxidants and nitric oxide to kill the pathogen.[14] After phagocytosis, macrophages and dendritic cells can also participate in antigen presentation: this is when the phagocyte moves parts of the ingested material back to its surface. This material is then displayed to other cells of the immune system. Some phagocytes then travel to the body's lymph nodes and display the material to white blood cells called lymphocytes. This process is important in building immunity.[15] However, many pathogens have evolved methods to counter attacks by phagocytes.[1]<br /><br />History<br />The Russian zoologist Ilya Ilyich Mechnikov (1845–1916) first recognized that specialized cells were involved in defense against microbial infections. In 1882, he studied motile (freely moving) cells in the larvae of starfishes, believing they were important to the animals' immune defenses. To test his idea, he inserted small thorns from a tangerine tree into the larvae. After a few hours he noticed that the motile cells had surrounded the thorns.[16] Mechnikov traveled to Vienna and shared his ideas with Carl Friedrich Claus who suggested the name ‘‘phagocyte’’ (from the Greek words phagein, meaning 'to eat or devour', and kutos, meaning 'hollow vessel'[5]) for the cells that Mechnikov had observed.[17]<br />A year later, Mechnikov studied a fresh-water crustacean called Daphnia, a tiny transparent animal that can be examined directly under a microscope. He discovered that fungal spores that attacked the animal were destroyed by phagocytes. He went on to extend his observations to the white blood cells of mammals and discovered that the bacterium Bacillus anthracis could be engulfed and killed by phagocytes, a process that he called phagocytosis.[18] Mechnikov proposed that phagocytes were a primary defense against invading organisms.<br /><br />In 1903, Amroth Wright discovered that phagocytosis was reinforced by specific antibodies which he called opsonins, from the Greek "opson", a dressing or relish.[19] Mechnikov was awarded (jointly with Paul Ehrlich) the 1908 Nobel Prize in Physiology or Medicine for his work on phagocytes and phagocytosis.[7]<br />Although the importance of these discoveries slowly gained acceptance during the early twentieth century, the intricate relationships between phagocytes and all the other components of the immune system were not known until the 1980s.[20]<br /><br />Phagocytosis<br />Phagocytosis is the process of taking in particles such as bacteria, parasites, dead host cells and cellular and foreign debris by a cell.[21] It involves a chain of molecular processes.[22] Phagocytosis occurs after the foreign body, a bacterial cell for example, has bound to molecules called "receptors" that are on the surface of the phagocyte. Then the phagocyte stretches itself around the bacterium and engulfs it. Phagocytosis of bacteria by human neutrophils takes on average nine minutes.[23] Once inside this phagocyte, the bacterium is trapped in a compartment called a phagosome. Within one minute the phagosome merges with either a lysosome or a granule to form a phagolysosome. The imprisoned bacterium is then submitted to a formidable battery of killing mechanisms,[24] and is dead a few minutes later.[23] Dendritic cells and macrophages are not so fast and phagocytosis can take many hours in these cells. Macrophages are slow and untidy eaters but they engulf huge quantities of material and frequently release some undigested back into the tissues. This debris serves as a signal to recruit more phagocytes from the blood.[25] Phagocytes will eat almost anything; scientists have fed macrophages with iron filings and then used a small magnet to separate them from other cells in a mixture.[26]<br /><br />A phagocyte has many types of receptors on its surface that are used to bind material.[1] They include opsonin receptors, scavenger receptors, and Toll-like receptors. Opsonin receptors increase the phagocytosis of bacteria that have been coated with complement or IgG antibodies. Complement is the name given to a complex series of protein molecules found in the blood that destroy or mark cells for destruction.[27] Scavenger receptors bind to a large range of molecules on the surface of bacterial cells, and Toll-like receptors—so called because of their similarity to well-studied receptors in fruit flies that are encoded by the Toll gene—bind to more specific molecules. Binding to Toll-like receptors increases phagocytosis and causes the phagocyte to release a group of hormones that cause inflammation.[1]<br /><br />Methods of killing<br />The killing of microbes is a critical function of phagocytes,[28] and is either performed within the phagocyte (intracellular killing) or outside of the phagocyte (extracellular killing).<br /><br />Oxygen-dependent intracellular killing<br />When a phagocyte ingests bacteria (or any material), its oxygen consumption increases. The increase in oxygen consumption is called a respiratory burst, which produces reactive oxygen-containing molecules that are anti-microbial.[29] The oxygen compounds are toxic to both the invader and the cell itself, so they are kept in compartments inside the cell. This method of killing invading microbes by using the reactive oxygen-containing molecules is referred to as oxygen-dependent intracellular killing, of which there are two types.[14]<br /><br />The first type is the oxygen-dependent production of a superoxide,[1] which is an important, oxygen-rich, bacteria-killing substance.[30] The superoxide is converted to hydrogen peroxide and singlet oxygen by an enzyme called superoxide dismutase. Superoxides also react with the hydrogen peroxide to produce hydroxyl radicals which assist in killing the invading microbe.[1]<br />The second type involves the use of the enzyme myeloperoxidase from neutrophil granules.[31] When granules fuse with a phagosome, myeloperoxidase is released into the phagolysosome and this enzyme uses hydrogen peroxide and chlorine to create hypochlorite, a substance used in domestic bleach. Hypochlorite is extremely toxic to bacteria.[1] Myeloperoxidase contains a heme pigment, which makes secretions rich in neutrophils, such as pus and infected sputum, green.[32]<br /><br />Oxygen-independent intracellular killing<br />Phagocytes can also kill microbes by oxygen-independent methods, but these are not as effective as the oxygen-dependent ones. There are four main types: The first uses electrically charged proteins which damage the bacterium's membrane. The second type uses lysozymes; these enzymes break down the bacterial cell wall. The third type uses lactoferrins which are present in neutrophil granules and remove essential iron from bacteria.[33] The fourth type uses proteases and hydrolytic enzymes; these enzymes are used to digest the proteins of destroyed bacteria.[34]<br />Gambar 4. Micrograph of Gram-stained pus showing Neisseria gonorrhoeae bacteria inside phagocytes and their relative sizes<br /><br />Intracellular : In cell biology, molecular biology and related fields, the word intracellular means "inside the cell".<br />It is used in contrast to extracellular (outside the cell). The cell membrane (and, in plants, the cell wall) is the barrier between the two, and chemical composition of intra- and extracellular milieu can be radically different. In most organisms, for example, a Na+/K+ ATPase maintains a high potassium level inside cells while keeping sodium low, leading to chemical excitability.<br /><br />Extracellular killing<br />Interferon-gamma—which was once called macrophage activating factor—stimulates macrophages to produce nitric oxide. The source of interferon-gamma can be CD4+ T cells, CD8+ T cells, Natural Killer cells, B cells, Natural Killer T cells, monocytes, macrophages, or dendritic cells.[35] Nitric oxide is then released from the macrophage and, because of its toxicity, kills microbes near the macrophage.[1] Activated macrophages produce and secrete tumor necrosis factor. This cytokine—a class of signaling molecules[36]—kills cancer cells and cells infected by viruses, and helps to activate the other cells of the immune system.[37]<br />In some diseases, e.g. the rare chronic granulomatous disease, the efficiency of phagocytes is impaired and recurrent bacterial infections are a problem.[38] In this disease there is an abnormality affecting different elements of oxygen-dependent killing. Other rare congenital abnormalities, such as Chediak-Higashi Syndrome, are also associated with defective killing of ingested microbes.[39]<br /><br />Extracellular : In cell biology, molecular biology and related fields, the word extracellular (or sometimes extracellular space) means "outside the cell". This space is usually taken to be outside the plasma membranes, and occupied by fluid. The term is used in contrast to intracellular (inside the cell).<br />The composition of the extracellular space includes metabolites, ions, proteins, and many other substances that might affect cellular function. For example, hormones act by travelling the extracellular space towards biochemical receptors on cells. Other proteins that are active outside the cell are the digestive enzymes.<br />The term 'extracellular' is often used in reference to the extracellular fluid (ECF) which composes about 15 litres of the average human body. The cell membrane (and, in plants and fungi, the cell wall) is the barrier between the two, and chemical composition of intra- and extracellular milieu can be radically different. In most organisms, for example, a Na+/K+-ATPase pump maintains a high concentration of sodium ions outside cells while keeping that of potassium low, leading to chemical excitability. Many cold-tolerant plants force water into the extracellular space when the temperature drops below 0 degrees Celsius, so that when it freezes, it does not lyse the plants' cells. [1]<br /><br />Two compartments comprise the extracellular space: the vascular space and the interstitial space.[2]<br /><br />Viruses<br />Viruses can only reproduce inside cells and they gain entry by using many of the receptors involved in immunity. Once inside the cell, viruses use the cell's biological machinery to their own advantage—forcing the cell to make hundreds of identical copies of themselves. Although phagocytes and other components of the innate immune system can, to a limited extent, control viruses, once they are inside cells the adaptive immune responses, particularly the lymphocytes, are more important for defense.[40] At the sites of viral infections, lymphocytes often vastly outnumber all the other cells of the immune system; this is common in viral meningitis.[41] Virus infected cells that have been killed by lymphocytes are cleared from the body by phagocytes.[42]<br /><br />Role in apoptosis<br />Animals' cells constantly die and are replaced by cell division. In adults, the number of cells is kept relatively constant. Cells are usually replaced when they malfunction or become diseased, but cell proliferation must be offset by cell death.[12] There are two different ways a cell can die: by necrosis or by apoptosis. In contrast to necrosis, which often results from disease or trauma, apoptosis—or programmed cell death—is a normal healthy function of cells. The body has to rid itself of millions of dead or dying cells every day and phagocytes play a crucial role in this process.[43]<br /><br />Dying cells that undergo the final stages of apoptosis[44] display molecules, such as phosphatidylserine, on their cell surface to attract phagocytes.[45] Phosphatidylserine is normally found on the cytosolic surface of the plasma membrane, but is redistributed during apoptosis to the extracellular surface by a hypothetical protein known as scramblase.[46] These molecules mark the cell for phagocytosis by cells that possess the appropriate receptors, such as macrophages.[47] The removal of dying cells by phagocytes occurs in an orderly manner without eliciting an inflammatory response and is an important function of phagocytes.[48]<br />Gambar 5. Apoptosis—phagocytes clear fragments of dead cells from the body<br /><br />Interactions with other cells<br />Phagocytes are not bound to any particular organ but move through the body, interacting with the other phagocytic and non-phagocytic cells of the immune system. They can communicate with other cells by producing chemicals called cytokines, which recruit other phagocytes to the site of infections or stimulate dormant lymphocytes.[49] Phagocytes form part of the innate immune system which animals, including humans, are born with. Innate immunity is very effective but non-specific in that it does not discriminate between different sorts of invaders. On the other hand, the adaptive immune system of jawed vertebrates—the basis of acquired immunity—is highly specialized and can protect against almost any type of invader.[50] The adaptive immune system is dependent on lymphocytes, which are not phagocytes, but produce protective proteins called antibodies which tag invaders for destruction and prevent viruses from infecting cells.[51] Phagocytes, in particular dendritic cells and macrophages, stimulate lymphocytes to produce antibodies by an important process called antigen presentation.[52]<br /><br />Antigen presentation<br />Antigen presentation is a process in which some phagocytes move parts of engulfed materials back to the surface of their cells and "present" them to other cells of the immune system.[53] There are two "professional" antigen-presenting cells: macrophages and dendritic cells.[54] After engulfment, foreign proteins (the antigens) are broken down into peptides inside dendritic cells and macrophages. These peptides are then bound to the cell's major histocompatibility complex (MHC) glycoproteins, which carry the peptides back to the phagocytes surface where they can be "presented" to lymphocytes.[15] Mature macrophages do not travel far from the site of infection, but dendritic cells can reach the body's lymph nodes where there are millions of lymphocytes.[55] This enhances immunity because the lymphocytes respond to the antigens presented by the dendritic cells just as they would at the site of the original infection.[56] But dendritic cells do not always co-operate with lymphocytes and will destroy them if necessary to protect the body. This is seen in a process called tolerance.[57]<br /><br />Immunological tolerance<br />Dendritic cells also promote immunological tolerance,[58] which stops the body attacking itself. The first type of tolerance is central tolerance: when T cells first depart from the thymus, dendritic cells destroy the T cells that carry antigens that would cause the immune system to attack itself. The second type of immunological tolerance is peripheral tolerance. Some T cells that possess antigens that would cause them to attack "self" slip through the first process of tolerance, some T cells develop self-attacking antigens later in life, and some self-attacking antigens are not found in the thymus; because of this dendritic cells will work, again, to restrain the activities of self-attacking T cells outside of the thymus. Dendritic cells can do this by destroying them or by recruiting the help of regulatory T cells to inactivate the harmful T cells' activities.[59] When immunological tolerance fails, autoimmune diseases can follow.[60] On the other hand, too much tolerance allows some infections, like HIV, to go unnoticed.[59]<br /><br />Professional phagocytes<br />Phagocytes of humans and other jawed vertebrates are divided into "professional" and "non-professional" groups based on the efficiency with which they participate in phagocytosis.[9] The professional phagocytes are the monocytes, macrophages, neutrophils, tissue dendritic cells and mast cells.[10] One liter of human blood contains about six billion phagocytes.[4]<br />Gambar 7. Phagocytes derive from stem cells in the bone marrow<br /><br />Activation<br />All phagocytes, and especially macrophages, exist in degrees of readiness. Macrophages are usually relatively dormant in the tissues and proliferate slowly. In this semi-resting state they clear away dead host cells and other non-infectious debris and rarely take part in antigen presentation. But during an infection they receive chemical signals—usually interferon gamma—which increases their production of MHC II molecules and which prepares them for presenting antigens. In this state, macrophages are good antigen presenters and killers. However, if they receive a signal directly from an invader they become "hyperactivated", stop proliferating and concentrate on killing. Their size and rate of phagocytosis increases—some become large enough to engulf invading protozoa.[61]<br />In the blood, neutrophils are inactive but are swept along at high speed. When they receive signals from macrophages at the sites of inflammation, they slow down and leave the blood. In the tissues they are activated by cytokines and arrive at the battle scene ready to kill.[62]<br /><br />Migration<br />When an infection occurs, a chemical "SOS" signal is given off to attract phagocytes to the site.[63] These chemical signals may include proteins from invading bacteria, clotting system peptides, complement products, and cytokines that have been given off by macrophages located in the tissue near the infection site.[1] Another group of chemical attractants are cytokines which recruit neutrophils and monocytes from the blood.[13]<br /><br />To reach the site of infection, phagocytes leave the blood stream and enter the affected tissues. Signals from the infection cause the endothelial cells that line the blood vessels to make a protein called selectin which neutrophils stick to on passing by. Other signals called vasodilators loosen the junctions connecting endothelial cells, allowing the phagocytes to pass through the wall. Chemotaxis is the process by which phagocytes follow the cytokine "scent" to the infected spot.[1] Neutrophils travel across epithelial cell-lined organs to sites of infection and although this is an important component of fighting infection, the migration itself can result in disease-like symptoms.[64] During an infection millions of neutrophils are recruited from the blood but they die after a few days.[65]<br /><br />Monocytes<br />Monocytes develop in the bone marrow and reach maturity in the blood. Mature monocytes have large, smooth, lobed nuclei and abundant cytoplasm that contains granules. Monocytes ingest foreign or dangerous substances and present antigens to other cells of the immune system. Monocytes form two groups: a circulating group and a marginal group which remain in other tissues (approximately 70% are in the marginal group). Most monocytes leave the blood stream after 20–40 hours to travel to tissues and organs, and in doing so transform into macrophages[66] or dendritic cells depending on the signals they receive.[67] There are about 500 million monocytes in one liter of human blood.[4]<br /><br />magnification<br />Macrophages<br />Mature macrophages do not travel far but stand guard over those areas of the body that are exposed to the outside world. There they act as garbage collectors, antigen presenting cells, or ferocious killers depending on the signals they receive.[68] They derive from monocytes, granulocyte stem cells, or the cell division of pre-existing macrophages.[69] Human macrophages are about 21 micrometers in diameter.[70]<br />This type of phagocyte does not have granules but contains many lysosomes. Macrophages are found throughout the body in almost all tissues and organs (e.g., microglial cells in the brain and alveolar macrophages in the lungs) where they silently lie in wait. A macrophage's location can determine its size and appearance. Macrophages cause inflammation through the production of interleukin-1, interleukin-6, and TNF-alpha.[71] Macrophages are usually only found in tissue and are rarely seen in blood circulation. The life-span of tissue macrophages has been estimated to range from four to fifteen days.[72]<br /><br />Macrophages can be activated to perform functions that a resting monocyte cannot.[71] T helper cells (also known as effector T cells or Th cells), a sub-group of lymphocytes, are responsible for the activation of macrophages. Th1 cells activate macrophages by signaling with IFN-gamma and displaying the protein CD40 ligand.[73] Other signals include TNF-alpha and lipopolysaccharides from bacteria.[71] Th1 cells can recruit other phagocytes to the site of the infection in several ways. They secrete cytokines that act on the bone marrow to stimulate the production of monocytes and neutrophils and they secrete some of the cytokines and that are responsible for the migration of monocytes and neutrophils out of the blood stream.[74] Th1 cells come from the differentiation of CD4 T cells once they have responded to antigen in the secondary lymphoid tissues.[71] Activated macrophages play a potent role in tumor destruction by producing TNF-alpha, IFN-gamma, nitric oxide, reactive oxygen compounds, cationic proteins, and hydrolytic enzymes.[71]<br />Gambar 10. Pus oozing from an abscess caused by bacteria—pus contains millions of phagocytes<br /><br />Neutrophils<br />Neutrophils are normally found in the bloodstream and are the most abundant type of phagocyte, constituting 50% to 60% of the total circulating white blood cells.[75] One liter of human blood contains about five billion neutrophils,[4] which are about 10 micrometers in diameter,[76] and live for only about five days.[37] Once they have received the appropriate signals, it takes them about thirty minutes to leave the blood and reach the site of an infection.[77] They are ferocious eaters and rapidly engulf invaders coated with antibodies and complement, and damaged cells or cellular debris. Neutrophils do not return to the blood; they turn into pus cells and die.[77] Mature neutrophils are smaller than monocytes, and have a segmented nucleus with several sections; each section is connected by chromatin filaments—neutrophils can have 2–5 segments. Neutrophils do not normally exit the bone marrow until maturity but during an infection neutrophil precursors called myelocytes and promyelocytes are released.[78]<br /><br />The intra-cellular granules of the human neutrophil have long been recognized for their protein-destroying and bactericidal properties.[79] Neutrophils can secrete products that stimulate monocytes and macrophages. Neutrophil secretions increase phagocytosis and the formation of reactive oxygen compounds involved in intracellular killing.[80] Secretions from the primary granules of neutrophils stimulate the phagocytosis of IgG antibody-coated bacteria.[81]<br />Gambar 11. A neutrophil with a segmented nucleus (center and surrounded by erythrocytes), the intra-cellular granules are visible in the cytoplasm (Giemsa stained high magnification)<br /><br />Dendritic cells<br />Dendritic cells are specialized antigen-presenting cells that have long outgrowths called dendrites,[82] which help to engulf microbes and other invaders.[83][84] Dendritic cells are present in the tissues that are in contact with the external environment; mainly the skin, the inner lining of the nose, lungs, stomach and intestines.[85] Once activated, they mature and migrate to the lymphoid tissues where they interact with T cells and B cells to initiate and orchestrate the adaptive immune response.[86] Mature dendritic cells activate T helper cells and cytotoxic T cells.[87] The activated helper T cells interact with macrophages and B cells to activate them in turn. In addition, dendritic cells can influence the type of immune response produced; when they travel to the lymphoid areas where T cells are held they can activate T cells which then differentiate into killer T cells or helper T cells.[88]<br /><br />Mast cells<br />Mast cells have Toll-like receptors and interact with dendritic cells, B cells, and T cells, to help mediate adaptive immune functions. Mast cells express MHC class II molecules and can participate in antigen presentation; however, the mast cell's role in antigen presentation is not very well understood.[89] Mast cells can consume and kill gram-negative bacteria (e.g., salmonella), and process their antigens.[90] They specialize in processing the fimbrial proteins on the surface of bacteria, which are involved in adhesion to tissues.[91][92] In addition to these functions, mast cells produce cytokines that induce an inflammatory response.[93] This is a vital part of the destruction of microbes because they attract more phagocytes to the site of infection.[90]<br /><br />Non-professional phagocytes<br />Dying cells and foreign organisms are consumed by cells other than the "professional" phagocytes.[95] These cells include epithelial cells, endothelial cells, fibroblasts, and mesenchymal cells. They are called non-professional phagocytes, to emphasize that, in contrast to professional phagocytes, phagocytosis is not their principal function.[96] Fibroblasts, for example, only make ineffective attempts to ingest foreign particles.[97]<br /><br />Non-professional phagocytes are more limited limited than professional phagocytes in the type of particles they can take up. This is due to their lack of efficient phagocytic receptors, particularly opsonins—which are antibodies and complement attached to invaders by the immune system.[11] Additionally, most nonprofessional phagocytes do not produce reactive oxygen-containing molecules in response to phagocytosis.[98]<br /><br />Pathogen evasion and resistance<br />A pathogen is only successful in infecting an organism if it can get past its defenses. Pathogenic bacteria and protozoa have developed a variety of methods to resist attacks by phagocytes and many actually survive and replicate within phagocytic cells.[99][100]<br /><br />Avoiding contact<br />There are several ways bacteria avoid contact with phagocytes. First, they can grow in sites that phagocytes are not capable of traveling to (e.g., the surface of unbroken skin). Second, bacteria can suppress the inflammatory response; without this response to infection phagocytes cannot respond adequately. Third, some species of bacteria can inhibit the ability of phagocytes to travel to the site of infection by interfering with chemotaxis.[99] Fourth, some bacteria can avoid contact with phagocytes by tricking the immune system into "thinking" that the bacteria are "self". Treponema pallidum—the bacterium that causes syphilis—hides from phagocytes by coating its surface with fibronectin,[101] which is produced naturally by the body and plays a crucial role in wound healing.[102]<br /><br />Avoiding engulfment<br />Bacteria often produce proteins or sugars that coat their cells and interfere with phagocytosis; these are called capsules.[99] An example is the K5 capsule and O75 O antigen found on the surface of Escherichia coli,[103] and the exopolysaccharide capsules of Staphylococcus epidermidis.[104] Streptococcus pneumoniae produces several types of capsule which provide different levels of protection,[105] and group A streptococci produce proteins such as M protein and fimbrial proteins to block engulfment. Some proteins hinder opsonin-related ingestion; Staphylococcus aureus produces Protein A to block antibody receptors which decreases the effectiveness of opsonins.[106]<br /><br />Survival inside the phagocyte<br />Bacteria have developed ways to survive inside phagocytes, where they continue to evade the immune system.[107] To get safely inside the phagocyte they express proteins called "invasins". When inside the cell they remain in the cytoplasm and avoid toxic chemicals contained in the phagolysosomes.[108] Some bacteria prevent the fusion of a phagosome and lysosome, to form the phagolysosome.[99] Other pathogens, such as Leishmania, create a highly-modified vacuole inside the phagocyte, which helps them persist and replicate.[109] Legionella pneumophila produces secretions which cause the phagosome to fuse with vesicles other than the ones that contain toxic substances.[110] Other bacteria are capable of living inside of the phagolysosome. Staphylococcus aureus, for example, produces the enzymes catalase and superoxide dismutase which break down chemicals—such as hydrogen peroxide—produced by phagocytes to kill bacteria.[111] Bacteria may escape from the phagosome before the formation of the phagolysosome: Listeria monocytogenes can make a hole in the phagosome wall using a enzymes called listeriolysin O and phospholipase C.[112]<br /><br />Killing<br />Bacteria have developed several ways of killing phagocytes.[106] These include: cytolysins which form pores in the phagocyte's cell membranes; streptolysins and leukocidins which cause neutrophils' granules to rupture and release toxic substances,[113][114] and exotoxins which reduce the supply of a phagocyte's ATP, needed for phagocytosis. After a bacterium is ingested it may kill the phagocyte by releasing toxins that travel through the phagosome or phagolysosome membrane to target other parts of the cell.[99]<br /><br />Disruption of cell signaling<br />Some survival strategies often involve disrupting cytokines and other methods of cell signaling to prevent the phagocyte's responding to invasion.[115] The protozoan parasites Toxoplasma gondii, Trypanosoma cruzi and Leishmania infect macrophages and each has unique ways of taming them. Some species of Leishmania alter the infected macrophage's signalling and repress the production of cytokines and microbicidal molecules—nitric oxide and reactive oxygen species—and compromise antigen presentation.[116]<br /><br />Host damage by phagocytes<br />Macrophages and neutrophils, in particular, play a central role in the inflammatory process, by releasing proteins and small-molecule inflammatory mediators that both control infection and can damage host tissue. In general phagocytes aim to destroy pathogens by engulfing them and subjecting them to battery of toxic chemicals inside a phagolysosome. If a phagocyte fails to engulf it's target, these toxic agents can be released into the environment (an action referred to as "frustrated phagocytosis"). As these agents are also toxic to host cells they can cause extensive damage to healthy cells and tissues.[97]<br />When neutrophils release their granule contents in the kidney, the contents of the granule (reactive oxygen compounds and proteases) degrade the extracellular matrix of host cells and can cause damage to glomerular cells, affecting their ability to filter blood and causing changes in shape. In addition, phospholipase products (e.g., leukotrienes) intensify the damage. This release of substances promotes chemotaxis of more neutrophils to the site of infection and glomerular cells can be damaged further by the adhesion molecules during the migration of neutrophils. The injury done to the glomerular cells can cause renal failure.[117]<br />Neutrophils also play a key role in the development of most forms of acute lung injury (ALI).[118] In ALI, activated neutrophils release the contents of their toxic granules into the lung environment.[119] Experiments have shown that a reduction in the number of neutrophils lessens the effects of ALI,[120] but treatment by inhibiting neutrophils is not clinically realistic, as it would leave the host vulnerable to infection.[119] Damage by neutrophils can contribute to liver dysfunction and injury in response to the release of endotoxins produced by bacteria, sepsis, trauma, alcoholic hepatitis, ischemia, and hypovolemic shock resulting from acute hemorrhage.[121]<br />Chemicals released by macrophages can also damage host tissue. TNF-α is an important chemical that is released by macrophages that causes the blood in small vessels to clot to prevent an infection from spreading.[122] However, if a bacterial infection spreads to the blood, TNF-α is released into vital organs which can cause vasodilation and a decrease in plasma volume; these in turn can be followed by septic shock. During septic shock, TNF-α release causes a blockage of the small vessels that supply blood to the vital organs, and the organs may fail. Septic shock can lead to death.[13]<br /><br />Evolutionary origins<br />Phagocytosis is common and probably appeared early in evolution,[123] evolving first in unicellular eukaryotes.[124] Amoebae, are unicellular protists that separated from the tree leading to metazoa shortly after the divergence of plants, but they share many specific functions with mammalian phagocytic cells. [124] Dictyostelium discoideum, for example, is an amoeba that lives in the soil and feeds on bacteria. Like animal phagocytes, it engulfs bacteria by phagocytosis mainly through Toll-like receptors and has other biological functions in common with macrophages.[125] Dictyostelium discoideum is social and aggregates when starved to form a migrating slug. This multicellular organism eventually produces a fruiting body with spores that are resistant to environmental dangers. Before the formation of fruiting bodies, the cells can migrate as slug-like organisms for several days. During this time, exposure to toxins or bacterial pathogens have the potential to compromise survival of the amoebae by limiting spore production. Some of the amoebae engulf bacteria and absorb toxins while circulating within the slug and these amoebae eventually die. They are genetically identical to the other amoebae in the slug and their sacrificing themselves to protect the other amoebae from bacteria is similar to the self-sacrifice by the phagocytes seen in the immune system of higher organisms. This innate immune function in social amoebae suggests an ancient cellular foraging mechanism that may have been adapted to defense functions well before the diversification of the animals.[126] But a common ancestry with mammalian phagocytes has not been proven. Phagocytes occur throughout the animal kingdom,[2] from marine sponges to insects and lower and higher vertebrates.[127][128] The ability of amoebae to distinguish between self and non-self is a pivotal one which is the root of the immune system of many species.[8]<br /><br />NB. From Any Soerce Refference<br /><br /></span><div class="blogger-post-footer">MEMUSNAHKAN TANDA TANYA ANDA. THANKS BRO !</div>Thailand aik aikhttp://www.blogger.com/profile/10964108109700651247noreply@blogger.com1tag:blogger.com,1999:blog-2030866544649181977.post-39489776760782076402010-02-04T20:07:00.004+07:002010-02-04T20:21:56.360+07:00MARGA SARGASSUM DI PERAIRAN INDONESIA<a onblur="try {parent.deselectBloggerImageGracefully();} catch(e) {}" href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEgxlGjrcOyy2uKoBQpYE6Ha6sLRY9KD_qICK118zAJBNn-JJ97EE3WhU20ErD60g6l5YdUD91aJY_L0BVTi9YHHcdNdi-gPzjfeoxHwG1j9FsEIr-3cgqBLg9kRU8VNE_FZJchItOEgbY8/s1600-h/Sargassum+cristaefolium.jpg"><img style="float:left; margin:0 10px 10px 0;cursor:pointer; cursor:hand;width: 304px; height: 320px;" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEgxlGjrcOyy2uKoBQpYE6Ha6sLRY9KD_qICK118zAJBNn-JJ97EE3WhU20ErD60g6l5YdUD91aJY_L0BVTi9YHHcdNdi-gPzjfeoxHwG1j9FsEIr-3cgqBLg9kRU8VNE_FZJchItOEgbY8/s320/Sargassum+cristaefolium.jpg" border="0" alt="" id="BLOGGER_PHOTO_ID_5434377682058999698" /></a><br />Algae Sargassum merupakan salah satu marga Sargassum termasuk dalam kelas Phaeophyceae. Ada 150 jenis Marga Sargassum yang dijumpai di daerah perairan tropis, subtropis dan daerah bermusim dingin (NIZAMUDDIN 1970). Habitat algae Sargassum tumbuh diperairan pada kedalaman 0,5 – 10 m ada arus dan ombak. Pertumbuhan algae ini sebagai makro algae bentik melekat pada substrat dasar perairan. Di daerah tubir tumbuh membentuk rumpun besar, panjang thalli utama mencapai 0,5-3 m dengan untaian cabang thalli terdapat kantong udara (bladder), selalu muncul di permukaan air.<br /><br />Di perairan Indonesia diperkirakan terdapat lebih dari 15 jenis algae Sargassum dan yang telah dikenal mencapai 12 jenis. Sedangkan di perairan Indo-Pasifik tercatat 58 jenis ( BOSSE 1928). Kehadiran marga Sargassum di berbagai daerah di Indonesia mempunyai sebutan nama yang berbeda-beda. Di kepulauan Seribu disebut oseng dan di Banten dinamakan kembang karang. Algae Sargassum tumbuh sepanjang tahun, tumbuhan ini bersifat “perenial” atau setiap musim barat maupun timur dapat dijumpai di berbagai perairan.<br /><span class="fullpost"><br />Algae Sargassum secara ekologis ikut andil dalam pembentukan ekosistem terumbu karang dan merupakan tempat asuhan bagi biota kecil, termasuk untuk perlindungan benih ikan dan benur udang serta sarang melekatnya telur cumi-cumi. Jenis Sargassum yang telah dipasarkan di daerah Jawa Barat dari jenis Sargassum polycystum, Sargassum binderi dan Sargassum duplicatum. Marga Sargassum mengandung bahan alginat dan iodin, bermanfaat sebagai bahan industri makanan, farmasi, kosmetik dan tekstil.<br /><br /><span style="font-weight:bold;">HABITAT DAN SEBARAN</span><br /><br />Lingkungan tempat tumbuh algae Sargassum terutama di daerah perairan yang jernih yang mempunyai substrat dasar batu karang, karang mati, batuan vulkanik dan benda-benda yang bersifat massive yang berada di dasar perairan. Algae Sargassum tumbuh dari daerah intertidal, subtidal sampai daerah tubir dengan ombak besar dan arus deras. Kedalaman untuk pertumbuhan dari 0,5 – 10 m. Marga Sargassum termasuk dalam kelas Phaeophyceae tumbuh subur pada daerah tropis, suhu perairan 27,25 – 29,30 oC dan salinitas 32–33,5 %o. Kebutuhan intensitas cahaya matahari marga Sargassum lebih tinggi dari pada marga algae merah. BONEY (1965) menyatakan pertumbuha Sargassum mebutuhkan intensitas cahaya matahari berkisar 6500 – 7500 lux. Algae Sargassum tumbuh berumpun dengan untaian cabang-cabang. Panjang thalli utama mencapai 1 – 3 m dan tiap-tiap percabangan terdapat gelembung udara berbentuk bulat yang disebut “Bladder,” berguna untuk menopang cabang-cabang thalli terapung ke arah permukaan air untuk mendapatkan intensitas cahaya matahari,<br /><br />1. Sebaran lokal.<br />Kehadiran algae Sargassum tumbuh di bentangan perairan pantai di zona paparan terumbu (reef flats) mulai dari garis pantai sampai ujung tubir termasuk dalam perairan intertidal dan subtidal (Gambar 1.) antara lain :<br /><br />a). Daerah pantai (beach/tide pool area)<br />Daerah Pantai merupakan zona yang dimanfaatkan untuk tempat kegiatan rekreasi kadang-kadang mempunyai substrat bervariasi pada umumnya berpasir, namun apabila substrat terbentuk dari campuran batu karang akan tumbuh berbagai jenis makro algae. Pada saat surut rendah yang lama akan mengalami kekeringan. Di Pantai bersubstrat pasir pada umumnya sedikit dijumpai pertumbuhan marga Sargassum, sedangkan di pantai bersubstrat batu karang merupakan habitat algae Sargassum yang ideal. Di beberapa pantai dapat dijumpai termasuk pantai selatan Pulau Jawa, Selat Sunda, sebagian pulau di perairan Batam dan Bangka-Belitung. Algae Sargassum yang tumbuh banyak diperoleh dari jenis Sargassum polycystum.<br /><br />b). Paparan Terumbu (reef flats).<br />Daerah paparan terumbu merupakan bagian habitat algae Sargassum. Di perairan Indonesia paparan terumbu ada yang berpunggung terumbu dan tidak berpunggung terumbu didaerah perairan tubir langsung dalam (drop off). Di substrat paparan yang berbatu karang merupakan tempat untuk melekatkan thalli selama pertumbuhan berlangsung dan sebagai tempat melekat perkecambahan spora. Paparan terumbu yang berasal dari batuan vulkanik dan batu karang boulder sering dijumpai lekukan dan parit (moat) daerah ini berombak besar dan arus deras. Pertumbuhan Sargassum kebanyakan dari jenis Sargassum binderi dan Sargassum duplicatum, biasanya kerangka thalli sangat kuat, thalli utama berbentuk gepeng, permukaan halus dan licin. Secara umum bahwa pertumbuhan algae Sargassum yang dominan didaerah paparan terumbu adalah jenis Sargassum polycystum, Sargassum echinocarpum dan Sargassum crassifolium.<br /><br />c). Punggung terumbu (ridge)<br />Di perairan pantai di Indonesia punggung terumbu kadang-kadang ada yang berpunggung terumbu dan tidak berpunggung terumbu. Punggung terumbu ini terbentuk dari algae kalkareous dari marga Porolithon atau terbentuk dari bongkahan karang yang telah mati. Daerah sekitar dinding punggung terumbu ini merupakan tempat tumbuh algae Sargassum, banyak dijumpai dari jenis Sargassum polycystum dan Sargassum echinocarpum. Pada waktu surut rendah rumpunan Sargassum mengalami perebahan dan saling bertumpang tindih dengan rumput laut jenis lainnya.<br /><br />d). Tubir (reef slope)<br />Daerah tubir merupakan tempat tumbuh algae Sargassum dari jenis yang berthalli panjang 1 – 3 m. Pertumbuhan berasosiasi dengan karang hidup dan bonggol thalli (holdfast) menempel pada bagian karang yang telah mati dan lapuk. Pola pertumbuhan algae Sargassum di daerah tubir thalli dalam rumpun yang besar secara “Heliocentris” tertuju ke arah permukaan untuk mendapatkan sinar matahari yang lebih banyak. Pada waktu air surut keberadaan Sargassum di daerah tubir dapat diketahui dengan melihat gerombolan cabang thalli yang terapung di atas permukaan air. Kemampuan daya apung ini didukung oleh kantong gelembung udara yang terletak diketiak percabangan thalli utama. Pada umumnya algae Sargassum tumbuh di daerah tubir mempunyai karakteristik thalli utama sangat kuat, bentuk pipih dan daun licin halus berlendir. Jenis yang tumbuh di daerah tubir meliputi Sargassum binderi, Sargassum cinereum, Sargassum plagyophyllum dan Sargassum crassifolium.<br /><br />e). Goba (lagoon)<br />Daerah goba merupakan tempat hidup dari semua jenis makro algae yang kebanyakan tumbuh di bibir goba terutama karang mati yang telah lapuk. Makro algae banyak yang berasosiasi dengan karang hidup, lamun dan biota lainnya. Perairan goba juga merupakan daerah interaksi dalam siklus rantai antar flora dan fauna yang hidup bersama baik sebagai “produkser” maupun “predator”. Marga Sargassum termasuk rumpun yang paling besar diantara marga rumput laut, sehingga keberadaan dalam perairan goba merupakan tempat asuhan dan berlindung biota kecil, karena arus dan ombak relatip tenang. Di daerah goba pertumbuhan makro algae reproduksinya melalui spora. Algae Sargassum yang tumbuh dominan diperairan ini meliputi Sargassum polycystum, Sargassum echinocarpum, Sargassum molleri dan Sargassum gracilimum.<br /><br />2. Sebaran wilayah<br />Hasil penelitian makro algae di Indonesia menunjukan sebaran yang luas dan bervariasi. Algae Sargassum termasuk tumbuhan yang dominan dan distribusinya ada di seluruh perairan Indonesia.<br /><br />a). Perairan Indonesia Bagian Barat.<br />Di perairan Indonesia Bagian Barat berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan diperoleh 3 – 7 jenis Sargassum. Di perairan Laut Jawa yang berada di kepulauan Seribu ada 6 jenis (ATMADJA dan SULISTIJO 1980). Di Selat Sunda dan Teluk Lampung diperoleh 7 jenis. Di kepulauan Anambas, Natuna dan Batam ada 4 jenis. Kehadiran ini juga diperoleh dari perairan Selatan pulau Jawa di Binuangeun, Pameungpeuk, Pangandaran 6 jenis di perairan pantai Wonosari Krakal terdapat 3 jneis (KADI dan ATMADJA 1988). Algae Sargassum juga diperoleh dari Teluk Klabat, kepulauan Bangka, Belitung dan Karimata 2 jenis (KADI 2005). Di daerah perairan laut China Selatan di Singapura ada 7 jenis (WEI & CHIN 1983). Di Sabah Malaysia tercatat 8 jenis (Ismail 1981). Keberadaan makro algae Sargassum yang berada di negara tetangga dan di Indonesia Bagian Barat dan sekitarnya ada kesamaan jenis dengan populasi jenis tidak jauh berbeda.<br /><br />b). Perairan Indonesia bagian Tengah.<br />Perairan pantai di beberapa pulau di Indonesia bagian tengah mempunyai paparan terumbu pendek dan terjal (drop off), kondisi ombak besar dan arus deras. Kehadiran algae Sargassum yang diperoleh berkisar 2 – 4 jenis, terdapat di paparan terumbu di Tanjung Benoa Bali 4 jenis dan di perairan pulau-pulau Sulawesi Selatan dan Tenggara 3 jenis (ATMADJA dan SULISTIJO 1980). Di perairan Pulau Lombok diperoleh 2 jenis. Sebaran algae terdapat di perairan sebelah utara di wilayah Indonesia bagian tengah meliputi Teluk Kwandang, Manado, pulau Ruang, Tagulandang, Pasige dan pulau Sangir Talaud terdapat 2 jenis. Di perairan Philippina merupakan daerah terdekat perairan Sulawesi Utara terdapat 5 jenis (TRONO & GANZON 1988).<br /><br />c). Perairan Indonesia Bagian Timur.<br />Kondisi umum paparan terumbu di pulau-pulau Indonesia bagian Timur berbeda dengan Bagian Barat dan Tengah. Perbedaan substrat dan kondisi lingkungandi Indonesia Bagian Timur lebih banyak dipengaruhi oleh perairan Samudera Pasifik. Algae Sargassum yang tumbuh sebagian jenisnya berasal dari Samudera Pasifik. Di perairan Maluku terdapat 4 jenis Sargassum yang berbeda dengan jenis yang berada di perairan Samudera Hindia maupun laut China Selatan. ATMADJA dan SULISTIJO (1980) memperoleh 4 jenis Sargassum di pulau-pulau Kai Besar dan Seram. Keberadaan jenis ini terdapat pula di Kepulauan Maisel, pulau-pulau Penyu. Sebaran algae Sargassum di jumpai 2 jenis di perairan pulau Ternate, Bacan dan sekitarnya. Di pulau-pulau yang terletak di lautan Pasifik di Pulau-pulau Hawaii terdapat 3 jenis (MAGRUDER & HUNT 1979). Sebaran algae Sargassum tersebut sebagian jenisnya berada di perairan Indonesia.<br /><br />REPRODUKSI MARGA SARGASSUM<br /><br />Perkembangbiakan atau reproduksi marga Sargassum yang termasuk bangsa Fucales, marga Sargassaceae dikenal dua cara yaitu; Reproduksi asexual (vegetatif) dan sexual (generatif). Reproduksi vegetatif dilakukan melalui fragmentasi yaitu potongan thallus berkembang melakukan pertumbuhannya. Cara ini banyak dilakukan untuk usaha budidaya. Reproduksi generatif yaitu perkembangan individu melalui organ jantan (antheridia) dan organ betina (oogenia). Organ-organ tersebut terjadi dan berada dalam satu lobang yang disebut koseptakel. Antheridia maupun oogonia berada di atas sel tangkai yang tertanam pada dasar konseptakel. Dinding antheridia terdiri dua lapis di sebelah luar (exochite) dan sebelah dalam (endochite). Dinding oogonium terdiri tiga lapis di sebelah luar (exochite), bagian tengah (mesochite) dan bagian dalam (endochite). Secara umum reproduksi seksual makro algae coklat termasuk marga Sargassum ada beberapa tipe daur hidup antara lain :<br /><br />1). Haplobiontik diploid yakni individu melakukan daur hidup secara diploid. Meiosis terjadi pada gamet (gametik meiosis) berkembang menjadi individu dewasa tipe daur hidup semacam ini banyak terdapat pada makro algae coklat dan hijau.<br /><br />2). Diplobiontik yaitu dalam proses pembiakan terdapat dua individu dalam daur hidup gametophyte (gametofit) haploid yang menghasilkan gamet, dan sporophyte (sporofit) diploid yang menghasilkan spora. Tipe daur hidup ini lebih umum terdapat pada makro algae coklat, merah dan hijau. Pertemuan antara dua gamet jantan dan betina akan membentuk zigot yang kemudian berkembang menjadi sporofit. Individu baru inilah yang mengeluarkan spora dan berkembang melalui meiosis dan sporagenesis menjadi gametofit.<br /><br />KANDUNGAN BAHAN KIMIA<br /><br />Algae Sargassum mudah diperoleh di perairan Indonesia, kandungan bahan kimia utama sebagai sumber alginat dan mengandung protein, vitamin C, tannin, iodine, phenol sebagai obat gondok, anti bakteri dan tumor (TRONO & GANZON 1988), sebagai berikut :<br /><br />1. Algin<br />Algin merupakan asam alginik, Alginik dalam bentuk derivat garam dinamakan garam alginat terdiri dari sodium alginat, potasium alginat dan amonium alginat. Garam alginat tidak larut dalam air, tetapi larut dalam larutan alkali. Asam alginik tersusun dari asam D-Manuronik dan asam L – Guluronik (Gambar 5.).<br /><br />2. Manfaat alginat.<br />Kandungan koloid alginat dari algae Sargassum (Gambar 6.) dalam industri kosmetik digunakan sebagai bahan pembuat sabun, pomade, cream bodylotion, sampo dan cat rambut. Di industri farmasi sebagai bahan pembuat kapsul obat, tablet, salep, emulsifier, suspensi dan stabilizer. Di bidang pertanian sebagai bahan campuran insektisida dan pelindung kayu. Di industri makanan sebagai bahan pembuat saus dan campuran mentega. Manfaat lainnya dalam industri fotografi, kertas, tekstil dan keramik. Di bidang kesehatan iodine digunakan sebagai obat pencegah penyakit gondok.<br /><br />PENUTUP<br /><br />Di Indonesia sebaran makro algae Sargassum berada di pulau besar maupun kecil, dan jumlah jenisnya ada 12. Tumbuh di lingkungan perairan pantai yang jernih dengan substrat batu karang, karang mati dan benda bersifat massive yang berada di dasar perairan. Keberadaan Sargassum di perairan ikut membentuk ekosistem terumbu karang dan merupakan tempat asuhan bagi biota kecil. Kandungan koloid algin Sargassum bermanfaat sebagai bahan baku alginat dan industri.<br /><br /><span style="font-style:italic;">NB. Banyak sumber bacaan. </span><br /><br /></span><div class="blogger-post-footer">MEMUSNAHKAN TANDA TANYA ANDA. THANKS BRO !</div>Thailand aik aikhttp://www.blogger.com/profile/10964108109700651247noreply@blogger.com3tag:blogger.com,1999:blog-2030866544649181977.post-42651191500407061372010-01-08T20:53:00.005+07:002010-01-08T21:25:09.779+07:00Phytochemicals<a onblur="try {parent.deselectBloggerImageGracefully();} catch(e) {}" href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEiMLpXXUDgElDZbTMf_F-AzZTolWpHitrABE9DvdoATYyMWHH9o7WmDRm0U9sm6MIVeKUhiCmGiJ8GVdkDLkTwdqYBl-aSOPWiEHZW2OjAwPGIWTvL5L9UgIruCU2i20MP9QCbPiNBj8E0/s1600-h/TheMolecularStructureOfEachGroupOfFlavonoids.jpg"><img style="float:right; margin:0 0 10px 10px;cursor:pointer; cursor:hand;width: 200px; height: 157px;" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEiMLpXXUDgElDZbTMf_F-AzZTolWpHitrABE9DvdoATYyMWHH9o7WmDRm0U9sm6MIVeKUhiCmGiJ8GVdkDLkTwdqYBl-aSOPWiEHZW2OjAwPGIWTvL5L9UgIruCU2i20MP9QCbPiNBj8E0/s200/TheMolecularStructureOfEachGroupOfFlavonoids.jpg" border="0" alt="" id="BLOGGER_PHOTO_ID_5424374739294060738" /></a><br />Phytochemicals<br /><br />What are phytochemicals?<br />Phytochemicals are non-nutritive plant chemicals that have protective or disease preventive properties. There are more than thousand known phytochemicals. It is well-known that plant produce these chemicals to protect itself but recent research demonstrate that they can protect humans against diseases. Some of the well-known phytochemicals are lycopene in tomatoes, isoflavones in soy and flavanoids in fruits. They are not essential nutrients and are not required by the human body for sustaining life.<br /><br />How do phytochemicals work?<br />There are many phytochemicals and each works differently. These are some possible actions:<br /><span class="fullpost"><br />•Antioxidant - Most phytochemicals have antioxidant activity and protect our cells against oxidative damage and reduce the risk of developing certain types of cancer. Phytochemicals with antioxidant activity: allyl sulfides (onions, leeks, garlic), carotenoids (fruits, carrots), flavonoids (fruits, vegetables), polyphenols (tea, grapes).<br />•Hormonal action - Isoflavones, found in soy, imitate human estrogens and help to reduce menopausal symptoms and osteoporosis.<br />•Stimulation of enzymes - Indoles, which are found in cabbages, stimulate enzymes that make the estrogen less effective and could reduce the risk for breast cancer. Other phytochemicals, which interfere with enzymes, are protease inhibitors (soy and beans), terpenes (citrus fruits and cherries).<br />•Interference with DNA replication - Saponins found in beans interfere with the replication of cell DNA, thereby preventing the multiplication of cancer cells. Capsaicin, found in hot peppers, protects DNA from carcinogens.<br />•Anti-bacterial effect - The phytochemical allicin from garlic has anti-bacterial properties.<br />•Physical action - Some phytochemicals bind physically to cell walls thereby preventing the adhesion of pathogens to human cell walls. Proanthocyanidins are responsible for the anti-adhesion properties of cranberry. Consumption of cranberries will reduce the risk of urinary tract infections and will improve dental health.<br /><br />How do we get enough phytochemicals?<br />Foods containing phytochemicals are already part of our daily diet. In fact, most foods contain phytochemicals except for some refined foods such as sugar or alcohol. Some foods, such as whole grains, vegetables, beans, fruits and herbs, contain many phytochemicals. The easiest way to get more phytochemicals is to eat more fruit (blueberries, cranberries, cherries, apple,...) and vegetables (cauliflower, cabbage, carrots, broccoli,...). It is recommended take daily at least 5 to 9 servings of fruits or vegetable. Fruits and vegetables are also rich in minerals, vitamins and fibre and low in saturated fat.<br /><br />Future of phytochemicals<br />Phytochemicals are naturally present in many foods but it is expected that through bioengineering new plants will be developed, which will contain higher levels. This would make it easier to incorporate enough phytochemicals with our food.<br /><br />List of phytochemicals<br />======================<br />Alkaloids<br />•Caffeine<br />•Theobromine<br />•Theophylline<br /><br />Anthocyanins<br />•Cyanidin<br />•Malvidin<br /><br />Carotenoids<br />•Beta-Carotene<br />•Lutein<br />•Lycopene<br />.Coumestans<br /><br />Flavan-3-Ols<br />Flavonoids<br />•Epicatechin<br />•Hesperidin<br />•Isorhamnetin<br />•Kaempferol<br />•Myricetin<br />•Naringin<br />•Nobiletin<br />•Proanthocyanidins<br />•Quercetin<br />•Resveratrol<br />•Rutin<br />•Tangeretin<br /><br />Hydroxycinnamic Acids<br />•Chicoric acid<br />•Coumarin<br />•Ferulic acid<br />•Scopoletin<br /><br />Isoflavones<br />•Daidzein<br />•Genistein<br /><br />Lignans<br />•Silymarin<br /><br />Monophenols<br />Hydroxytyrosol<br />Monoterpenes<br />•Geraniol<br />•Limonene<br /><br />Organosulfides<br />•Allicin<br />•Glutathione<br />•Indole-3-Carbinol<br />•Isothiocyanates<br />•Sulforaphane<br /><br />Other Phytochemicals<br />•Damnacanthal<br />•Digoxin<br />•Phytic acid<br /><br />Phenolic Acids<br />•Capsaicin<br />•Ellagic Acid<br />•Gallic acid<br />•Rosmarinic acid<br />•Tannic Acid<br /><br />Phytosterols<br />•Beta-Sitosterol<br /><br />Saponins<br /><br />Triterpenoids<br />•Ursolic acid<br /><br />Xanthophylls<br />•Astaxanthin<br /><br />Beta-Cryptoxanthin<br /><br />Flavonoids<br /><br />Description<br />Flavonoids are water soluble polyphenolic molecules containing 15 carbon atoms. Flavonoids belong to the polyphenol family. Flavanoids can be visualized as two benzene rings which are joined together with a short three carbon chain. One of the carbons of the short chain is always connected to a carbon of one of the benzene rings, either directly or through an oxygen bridge, thereby forming a third middle ring, which can be five or six-membered. The flavonoids consist of 6 major subgroups: chalcone, flavone, flavonol, flavanone, anthocyanins and isoflavonoids.<br />Together with carotenes, flavanoids are also responsible for the coloring of fruits, vegetables and herbs.<br /><br />Distribution<br />Flavonoids are found in most plant material. The most important dietary sources are fruits, tea and soybean. Green and black tea contains about 25% percent flavonoids. Other important sources of flavonoids are apple (quercetin), citrus fruits (rutin and hesperidin),<br /><br />Properties<br />Flavonoids have antioxidant activity. Flavonoids are becoming very popular because they have many health promoting effects. Some of the activities attributed to flavonoids include: anti-allergic, anti-cancer, antioxidant, anti-inflammatory and anti-viral. The flavonoids quercetin is known for its ability to relieve hay fever, eszema, sinusitis and asthma.<br />Epidemiological studies have illustrated that heart diseases are inversely related to flavonoid intake. Studies have shown that flavonoids prevent the oxidation of low-density lipoprotein thereby reducing the risk for the development of atherosclerosis.<br />The contribution of flavonoids to the total antioxidant activity of components in food can be very high because daily intake can vary between 50 to 500 mg.<br />Red wine contains high levels of flavonoids, mainly quercetin and rutin. The high intake of red wine (and flavonoids) by the French might explain why they suffer less from coronary heart disease then other Europeans, although their consumption of cholesterol rich foods is higher (French paradox). Many studies have confirmed that one or two glasses of red wine daily can protect against heart disease.<br />Tea flavonoids have many health benefits. Tea flavonoids reduce the oxidation of low-density lipoprotein, lowers the blood levels of cholesterol and triglycerides.<br />Soy flavonoids (isoflavones) can also reduce blood cholesterol and can help to prevent osteoporis. Soy flavonoids are also used to ease menopausal symptoms.<br /><br />Research Reviews<br />A flavonoid fraction from cranberry extract inhibits proliferation of human tumor cell lines<br />Flavonoids and Heart Health: Proceedings of the ILSI North America Flavonoids Workshop, May 31-June 1, 2005, Washington (USA)<br /><br />Epicatechin<br /><br />Description<br />Pure epicatechin is an odorless white powder. Epcatechin is a flavonol belonging to the group of flavonoids.<br /><br />Distribution<br />Epicatechin is present in many plants. High quantities can be found in cocoa, tea and grapes.<br /><br />Properties<br />Epicatechin is a strong antioxidant, has insulin mimic action and improves heart health. Dr. Norman Hollenberg of Harvard Medical School found that Kuna indians, who live on the San Blas Island Chain in Panama and drink high quantities of cocoa drinks, have a lower risk of stroke, heart failure, cancer and diabetes compored to the Indians living on the mainland. Dr. Norman Hollenberg even suggests to consider epicatechin as a vitamin.<br /><br />Attenuation of diabetes<br />Studies show that epicatechin and other flavonoids exert a protective role on osmotic fragility of cells, similar to that of insulin. The mechanism of action of epicatechin is different to that of insulin and remains speculative. In diabetic red blood cells epicatechin causes an increase in acetylcholinesterase activity. This activity is significantly lower in type 2 diabetic patients.<br /><br />Heart health<br />Epicatechin reduces lipid peroxidation and inhibits platelet aggregation. Epicatechin cause blood vessel dilation by regulating nitric oxide, a molecule secreted by the blood vessel endothelium to signal surrounding muscle to relax.<br /><br />Research Reviews<br />Dietary Polyphenols and Health: Proceedings of the 1ste International Conference on Polyphenols and Health<br /><br />Synonyms<br />(2R,3R)-2-(3,4-Dihydroxyphenyl) -3,4-dihydro-1(2H) -benzopyran-3,5,7-triol; cis-3,3',4',5,7-Pentahydroxyflavane; Epicatechol; epi-Catechin;epi-Catechol;<br /><br />Ellagic Acid<br /><br />Description<br />Ellagic acid is a fused four-ring polyphenol. Pure ellagic acid is a cream to light yellow crystalline solid.<br /><br />Distribution<br />Ellagic acid is present in many red fruits and berries, including raspberries, strawberries, blackberries, cranberries, pomegranate and some nuts including pecans and walnuts. The highest levels of ellagic acid are found in raspberries. In plants ellagic acid is present in the form of ellagitannin, which is ellagic acid bound to a sugar molecule.<br /><br />Properties<br />Ellagic acid has antioxidant, anti-mutagen and anti-cancer properties. Studies have shown the anti-cancer activity on cancer cells of the breast, oesophagus, skin, colon, prostate and pancreas. More specifically, ellagic acid prevents the destruction of P53 gene by cancer cells. Ellagic acid can bind with cancer causing molecules, thereby making them inactive. In their studie The effects of dietary ellagic acid on rat hepatic and esophageal mucosal cytochromes P450 and phase II enzymes. Ahn D et al showed that ellagic acid causes a decrease in total hepatic mucosal cytochromes and an increase in some hepatic phase II enzyme activities, thereby enhancing the ability of the target tissues to detoxify the reactive intermediates. Ellagic acid showed also a chemoprotective effect against various chemically induced cancers.<br />A study by Thresiamma KC and Kuttan R.Indian (Indian Journal Physiology and Pharmacology, 1996 October) indicate that oral administration of ellagic acid by rats can circumvent the carbon tetrachloride toxicity and subsequent fibrosis of the liver. Ellagic acid has also antiviral and antibacterial activities.<br />Facts about Ellagic Acid<br />Plants produce ellagic acid to protect themselves from microbiological infection and pests.<br /><br />Research Reviews<br />Pomegranate Juice Ellagitannin Metabolites Are Present in Human Plasma and Some Persist in Urine for Up to 48 Hours<br />Chemoprevention of esophageal tumorigenesis by dietary administration of lyophilized black raspberries.<br /><br />Synonyms<br />Benzoaric acid, eleagic acid, elagostasine, gallogen.<br /><br />Curcumin<br /><br />Description<br />Curcumin is a a water soluble orange-yellow coloured powder. Curcumin is one of three curcuminoids of turmeric. The other two curcuminoids are demethoxycurcumin and bisdemethoxycurcumin.<br /><br />Distribution<br />Curcumin is obtained by solvent extraction from dried turmeric roots.<br /><br />Properties<br />Curcumin has antioxidant, anti-inflammatory, antiviral and antifungal actions. Studies have shown that curcumin is not toxic to humans. Curcumin exerts anti-inflammatory activity by inhibition of a number of different molecules that play an important role in inflammation. Turmeric is effective in reducing post-surgical inflammation. Turmeric helps to prevent atherosclerosis by reducing the formation of bloods clumps.<br />Curcumin inhibits the growth of Helicobacter pylori, which causes gastric ulcers and has been linked with gastric cancers.<br />Curcumin can bind with heavy metals such as cadmium and lead, thereby reducing the toxicity of these heavy metals. This property of curcumin explains its protective action to the brain. Curcumin acts as an inhibitor for cyclooxygenase, 5-lipoxygenase and glutathione S-transferase.<br /><br />Facts about Curcumin<br />Curcumin is used many foods as colouring, including mustard, margarine, processed cheese, cakes, curry powder, soft drinks and sweets.<br /><br />Synonyms<br />1,7-Bis(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-1,6-heptadiene-3,5-dione, turmeric yellow<br /><br />Coumarin<br /><br />Description<br />Coumarin is a phytochemical with a vanilla like flavour. Coumarin is a oxygen heterocycle. Coumarin can occur either free or combined with the sugar glucose (coumarin glycoside).<br /><br />Distribution<br />Coumarin is found in several plants, including tonka beans, lavender, licorice, strawberries, apricots, cherries, cinnamon, and sweet clover.<br /><br />Properties<br />Coumarin has blood-thinning, anti-fungicidal and anti-tumor activities. Coumarin should not be taken while using anticoagulants. Coumarin increases the blood flow in the veins and decreases capillary permeability. Coumarin can be toxic when used at high doses for a long period<br /><br />Facts about Coumarin<br />Coumarin seems to work as a pesticide in the plants that produce it. Coumarin is responsible for the sweet smell of new mown hay.<br /><br />Synonyms<br />1,2-Benzopyrone, 2H-1-Benzopyran-2-one<br /><br />Caffeine<br /><br />Description<br />Caffeine is a water-soluble alkaloid. Pure caffeine is a white odourless crystalline powder with a very bitter taste. Caffeine is closely related to other alkaloids such as theophylline (mainly found in tea) and theobromine (mainly found in cacao beans). The difference between these three molecules is the position of the methyl groups.<br /><br />Distribution<br />Caffeine is found in many everyday products, including tea, cola nuts, coffee, chocolate, mate and guarana. It is also found in some softdrinks (mainly colas and energy drinks) where it is artificially added.<br /><br />Properties<br />Caffeine acts on the nervous system by blocking adenosine receptor thereby slowing down nerve cell acitivity. Caffeine stimulates the central nervous system, respiration and blood circulation. Caffeine also acts as a diuretic. Caffeine increases the circulation and oxidation of fatty acids. This is why caffeine is used by sportsmen to increase fatty acid metabolism. Caffeine is often used in combination with aspirin to treat headaches. Caffeine can also have negative impact on health, especially if overdosed. There is evidence that too much caffeine can reduce bone density and caffeine is not recommended for pregnant women. Moderation is the key to caffeine consumption.<br /><br />Facts about Caffeine<br />Caffeine containing plants have been used by different cultures over centuries. Tea from caffeine containing plants was used to treat headaches, coughs and even plague. Only recently caffeine is used to stay awake and relieve fatigue. Caffeine is now one of the most widely used phytochemical.<br />Caffeine is not addictive but it can be habbit forming. Although caffeine is not toxic to humans in normal levels, it is very toxic to animals, such as dogs and horses.<br /><br />Synonyms<br />1,3,7-Trimethylxanthin<br /><br />Beta-Sitosterol<br /><br />Description<br />Beta-sitosterol is a phytosterols or plant sterol. The structure of beta-sitosterol is similar to that of cholesterol. Beta-sitosterol differs from cholesterol by the presence of an extra ethyl group<br /><br />Distribution<br />There are many plant sources of beta-sitosterol, but the most important are wheat germ, rice bran, flax seeds, peanuts, soybeans, pumpkin seeds and corn oil. Muli and co-workers showed that a plant-based diet, rich in fibre, soy and flax seed, can increase serum levels of beta-sitosterol.<br /><br />Properties<br />Beta-sitosterol is mainly known and used for its cholesterol lowering property. But studies have shown that the phytochemical may have other health benefits: easing symptoms of benign prostatic enlargement, reducing risk of cancer and prevention of oxidative damage through its antioxidant activity.<br /><br />Anti-cancer<br />Epidemiological and experimental studies have suggested a protective role of beta-sitosterol in the development of some types of cancer such as breast, colon and prostate cancer. In-vivo studies have shown that the phytochemical inhibited proliferation and induce apoptosis in human solid tumors such as colon and breast cancers. The studies about the protective effect of beta-sitosterol on breast cancer only involved in-vitro experiments using cultured breast cancer cells. These studies clearly show that the phytochemicals kills breast cancer cells and is not toxic to normal cell. Clinical studies linking beta-sitosterol and breast cancer are still missing but some scientists suggest that it may improve the efficiency of tamoxifen, a drug often used to treat breast cancer.<br /><br />Antioxidant<br />Beta-sitosterol is an antioxidant able to reduce DNA damage, reduce the level of free radical in our cells and to increase the level of typical antioxidant enzymes.<br /><br />Atherosclerosis<br />Regular intake of beta-sitosterol may reduce blood cholesterol levels by directly inhibiting the absorption of cholesterol. Beta-sitosterol also prevents the oxidation of LDL cholesterol thereby reducing the risk of atherosclerosis.<br /><br />Prostate enlargement<br />Clinical studies have confirmed the beneficial effects of beta-sitosterol in patients with prostate enlargement. The phytochemical decreases post-void residual urinary volume and increases urinary flow rate in these patients.<br /><br />Synonyms<br />(3beta)-stigmast-5-en-3-ol, 22:23-dihydrostigmasterol, alpha-dihydrofucosterol, cinchol, cupreol, rhamnol, quebrachol and sitosterin.<br /><br />Beta-Carotene<br /><br />Description<br />Beta-carotene is the most common form of carotene and belongs to the group of terpenoids. Pure beta-carotene is red to purple colored oil. It is not soluble in water. Beta-carotene which is used in drinks is encapsulated with starch or gelatin to make it soluble.<br /><br />Distribution<br />Beta-carotene occurs in colored fruits and vegetables such as mango, apricot, sweet potatoes, carrots, kale, broccoli, spinach, turnip greens, winter squash and collard greens.<br /><br />Properties<br />Beta-carotene has received a lot of attention as potential anti-cancer and anti-aging phytochemical. Beta-carotene is a powerful antioxidant, protecting the cells of the body from damage caused by free radicals. Studies indicate that diets low in beta-carotene can increase the body's susceptibility to damage from free radicals, resulting in an increased risk of chronic diseases like heart disease and cancers. Beta-carotene supplements may help reduce sun induced skin damage. Smokers should avoid large doses of beta carotene supplements. Beta-carotene is one of the many carotenoids that our body can convert into vitamin A (retinol).<br /><br />Anti-cancer<br />Beta-carotene acts as an anti-cancer agent through its antioxidant property but it also seems to stimulate cell to cell communication. Poor communication between cells may eventually lead to cancer. However, beta-carotene may cause adverse effects on smokers. Two studies indicate that heavy smokers and drinkers may have an increased risk of lung cancer or heart disease, when taking daily more than 20 mg synthetic beta-carotene as supplements. A study by Harvard School of Public Health published in January 2004 issue of Cancer Epidemiology Biomarkers and Prevention indicates that beta-carotene consumed as part of natural foods has no such negative effects.<br /><br />Skin protection<br />Studies have demonstrated that beta-carotene may be used for skin protection: it reduces UV-induced redness of the skin and improves melasma. Beta-carotene is often use in supplements or topical creams to protect our skin. Too much intake of beta-carotene can result in carotenodermia, a condition that shows a yellowish discoloration of the skin. This is reversible and harmless.<br /><br />Heart health<br />Epidemiological studies show that beta-carotene may improve our heart health by decreasing blood pressure. Beta-carotene may also help to prevent arteriosclerosis by inhibiting the oxidation of lipids.<br /><br />Facts about Beta-Carotene<br />Beta-Carotene is a yellow pigment naturally occurring in fruits and vegetables. It also known as a provitamin because it can be converted in our body into vitamin A after oxidative cleavage by beta-carotene 15, 150-dioxygenase. In plants, beta-carotene, acts as an anti-oxidant and neutralizes singlet oxygen radicals formed during photosynthesis. Cooking improves the availability of carotenoids in foods. However, prolonged cooking should be avoided to prevent the formation of change of beta-carotene into the cis-configuration.<br /><br />Synonyms<br />Pro-vitamin A<br /><br />Astaxanthin<br /><br />Description<br />Astaxanthin is a red carotenoid pigment. Astaxanthin is similar in structure than beta-carotene. The small differences in structure causes large differences in the chemical properties<br /><br />Distribution<br />Astaxanthin is produced by microscopic small plants: the micro-alga Haematococcus pluvialis. Haematococcus algae can contain up to 30 g of astaxanthin per kg dried algae. These micro-alga are eaten by marine animals including fish, crawfish, crabs and lobster. The Astaxanthin is responsible for the red colour of these animals. Another commercial source is from the ink coloured yeast Xanthophyllomyces dendrorhous.<br /><br />Properties<br />Astaxanthin is a powerful antioxidant. The free radical scavenging activity of astaxanthin protects lipids from peroxidation and reduces oxidative damage of LDL-cholesterol (thereby reducing arterial plaque formation), cells, cell membranes, mitochondrial membranes. Astaxanthin increases strength and endurance.<br />Astaxanthin seems to improve the immune system by increasing the number of antibody producing cells. Astaxanthin enhances antibody production by exerting actions on T-cells and T-helper cells. Astaxanthin is used to treat neurodegenerative conditions such as Alzheimer's and Parkinson?s disease.<br />Astaxanthin protects the eyes and skin from sun radiation damage by quenching singlet and triplet oxygen. Studies with rats show that astaxanthin reduces retinal injury.<br />Studies have shown the anti-cancer effects of astaxanthin in rodents. The inhibitory effect of astaxanthin on cancer is stronger han that of beta-carotene.<br /><br />Facts about Astaxanthin<br />Most Astaxanthin is not extracted from the marine plants but is chemically produced. In commercial fish and crustacean farms, chemically produced astaxanthin is added to feeds in order to improve the colour.<br /><br />Synonyms<br />3,3'-Dihydroxy-b,b-carotene-4,4'-dione<br /><br />Allicin<br /><br />Description<br />Allicin is garlic's defence mechanism against attacks by pests. When the garlic plant is attacked or injured it produces allicin by an enzymatic reaction. The enzyme alliinase, converts the chemical alliin to allicin, which is toxic to insects and microorganisms. The antimicrobial acivity of allicin was discovered in 1944 by Cavallito. Purified allicin is not sold commercially because it is not stable and has an offensive odour. Allicin extracted from garlic loses its beneficial properties within hours and turns into other sulphur containing compounds. Diallyl trisulfade, which is similar to allicin but is chemically produced, is stable and is used for treatment bacterial, fungal and parasitic infections.<br /><br />Distribution<br />Allicin is the predominant thiosulfinate in garlic (Allium sativum). Allicin is the chemical responsible for the typical and offensive odor of garlic.<br /><br />Properties<br />The antimicrobial effect of allicin is due to its chemical reaction with thiol groups of various enzymes.<br />The incidence of gastric ulcers is lower in populations with high garlic intake. Studies have confirmed that allicin has inhibitory activity on Helicobacter pylori, a bacteria responsible for the development of gastric ulcers. The sensitivity of Helicobacter pylori to allicin might also explain the lower risk of stomach cancer in people with high garlic intake. A study by Ankri et al (1997) demonstrated that allicin inhibited the ability of the parasite Entamoeba histolytica to destroy monolayers of baby hamster kidney cells.<br />Allicin is not bioavailable and will not get absorbed in the blood, even after ingesting large amounts of allicin.<br /><br />Research Reviews<br />Intake of Garlic and its Bioactive Components<br />The influence of heating on the anticancer properties of garlic.<br />Pharmacologic activities of aged garlic extract in comparison with other garlic preparations.<br /><br />Synonyms<br />Diallyl thiosulfinate<br /><br />Geraniol<br /><br />Distribution<br />Bergamot, carrot, coriander, lavender, lemon, lime, nutmeg, orange, rose, blueberry and blackberry.<br /><br />Properties<br />Geraniol is a natural antioxidant. Geraniol has been suggested to help prevent cancer. Carnesecchi S. et al demonstrated in his study "Geraniol, a component of Plant Essential Oils, Inhibits Grwoth and Polyamine Biosyntehsis in Human Colon Cancer Cells", (Pharmacology, July 2001) that geraniol caused a 50% increase of ornithine decarboxylase activity, which is enhances during cancer growth. Geraniol inhibits DNA synthesis.<br />Burk YD concluded in his study "Inhibition of Pancreatic Cancer Growth by the dietary isoprenoids farnesol and geraniol" (Lipids, February 1997) that geraniol, farnesol and perilll alcohol suppress pancreatic tumor growth.<br />Other animal studies have also demonstrated the anticancer effects of geraniol.<br /><br />Facts about Geraniol<br />Geraniol is mainly used in perfumery and flavouring.<br /><br />Synonyms<br />Lemonol, beta-Geraniol, trans-3,7-Dimethyl-2,6-octadien-1-ol<br /><br />Hydroxytyrosol<br /><br />Description<br />Hydroxytyrosol is believed to be the antioxidant with the highest free radical scavenging capacity: double that of quercetin and more than 3 times that of epicatechin. The wastewaters generated during olive processing contain a high levels hydroxytyrosol, most of which can be recovered to produce hidroxytyrosol extracts. Studies by Visioli et al (2000) showed that a low dose of hydroxytyrosol reduces the consequences of sidestream smoke-induced oxidative stress in rats.<br /><br />Distribution<br />Hydroxytyrosol is the main polyphenol found in olives.<br /><br />Properties<br />Hydroxytyrosol has the same health promoting properties than other polyphenols: prevention of atherosclerosis, promotion of intestinal and respiratory health and prevention of cancer. Hydroxytyrosol also reduces the oxidative stress caused by smoking.<br /><br />Abstracts<br />Benefits of Hydroxytyrosol<br />In Vivo Studies about Antioxidant Properties of Hydroxytyrosol<br />In Vitro Studies about Antioxidant Properties of Hydroxytyrosol<br />Cancer and Hydroxystyrosol<br />Influence of Hydroxystyrol on Heart Disease<br /><br />Indole-3-Carbinol<br /><br />Description<br />Pure indole-3-Carbinol is an off-white solid belonging to the group of indoles. Indole-3-carbinol is only formed in these vegetable after crushing or during cooking.<br /><br />Distribution<br />The phytochemical indole-3-carbinol is found in cruciferous vegetables such as cabbage, cauliflower, broccoli, kale and brussels sprouts. Indole-3-carbinol is made from indole-3-glucosinolate by the enzyme myrosinase. This enzyme is only activated after maceration of the vegetables.<br /><br />Properties<br />Indole-3-carbinol and its main metabolite diindoylmethane modulates several nuclear transcription factors resulting in a variety of biological and biochemical effects. Indole-3-carbinol works as a strong antioxidant, thereby protecting the DNA and other cell structures.<br /><br />Chemopreventive<br />Indole-3-carbinol has chemopreventive activity and stimulates the production of detoxifying enzymes. The phytochemical protects against carcinogenic effect of pesticides and other toxins.<br /><br />Anticancer<br />The anticancer effects of indole-3-carbinol and its metabolite diindoylmethane are the result of specific activities: inducing enzymes that metabolize carcinogens, enhancing DNA repair, inducing G1 cell cycle arrest and apoptosis. Indole-3-carbinol blocks estrogen receptor sites on the membranes of breast and other cells, thereby reducing the risk of cervical and breast cancer. Indole-3-carbinol increases the ratio of 2-hydroxyestrone to 16 alpha-hydroxyestrone and inhibits the 4-hydroxylation of estradiol. This is a favourable action of indole-3-carbinol because 16 alpha-hydroxyestrone and 4-hydroxyestrone have carcinogenic action. The estrogen metabolite 2-hydroxyestrone has protective against several types of cancer. Studies with animals have demonstrated that indole-3-carbinol reduced the carcinogenic affects of aflatoxins. The influence of indole-3-carbinol on the development of prostate cancer is less clear. Most studies report protective effects but a few studies indicate that indole-3-carbinol may promote prostate cancer formation. Treatment of skin cancer cells with ultraviolet-B results in the apoptosis of their apoptosis, a favorable effect that seems to be stimulated by indole-3-carbinol. Some studies also show a beneficial effect on the treatment of skin cancer.<br />Heart health<br />A few studies demonstrate the beneficial effects of indole-3-carbinol on lipid synthesis and platelet aggregation, suggesting that this phytochemical could help to improve heart health.<br /><br />Synonyms<br />I3C, 3-hydroxymethyl indole, 3-indole methanol<br /><br />Limonene<br /><br />Description<br />Pure limonene is a clear liquid. Limonene is a monoterpene, made up of two isoprene units. Limonene occurs in two optically active forms, l-limonene and d-limonen. Both isomers have different odours: l-limonene smells piney and turpentine like and d-limonene has a pleasing orange scent.<br /><br />Distribution<br />Limonene is found in the essential oils of citrus fruits and many other plant species. Industrial limonene is produced by by alkali extraction of citrus residues and steam distillation. This distillate contains more than 90% d-limonene.<br /><br />Properties<br />Studies have shown that limonene have anti- cancer effects. Limonen increase the levels of liver enzymes involved in detoxifying carcinogens. The Glutathione S-transferase (GST) is a system which eliminates carcinogens. Limonene seems to promote the GST system in the liver and small bowel, thereby decreasing the damaging effects of carcinogens. Animal studies demonstrated that dietary limonene reduced mammary tumor growth.<br /><br />Facts about Limonene<br />Limonene is also used as a solvent and cleaner. It can replace white spirit and other solvents.<br /><br />Synonyms<br />Methyl-4-isopropenyl cyclohexene, Cajaputene, Carvene, Cinene, Dipentene, Efchole<br /><br />Lutein<br /><br />Description<br />Lutein is an antioxidant, which belongs to the carotenoid family. Lutein is a yellow coloured pigment. Although lutein is not categorized as a vitamin, dietary lutein is believed to be an essential nutrient for normal vision. Because lutein is fat soluble, a deficiency may occur if fat digestion is impaired.<br /><br />Distribution<br />Lutein is found in egg yolk and many plants and vegetables, including red peppers, mustard, broccoli, zucchini, corn, garden peas, spinach, leek, collard greens and kale. Lutein is responsible for the colouring of many fruits and vegetables.<br /><br />Properties<br />Lutein is an antioxidant which is believed to be an essential nutrient for normal vision. The protective role of lutein against eye damage is well document. Studies have also indicated that lutein improves heart health, protects our skin against UV damage, reduces diabetes induced oxidative stress, and possesses anti-inflammatory and anti-cancer properties.<br /><br />Eye protection<br />The central part of the retina, called the macula, contains macular pigments in which lutein is concentrated. The yellow coloured pigments protect the retina from damage of the photo-oxidative affect of high-energy light. Lutein offers eye protection by lowering the risk of age related vision loss, which causes gradual loss of central vision. Age related vision loss or age related macular degeneration is caused by steady damage of the retina.<br /><br />Heart health<br />Lutein can also reduce the risk for artery diseases. Studies have shown that persons with the highest lutein intake showed the lowest artery wall thickening. Lutein also reduces the oxidation of LDL cholesterol thereby reducing the risk of artery clogging.<br /><br />Skin protection<br />Lutein can also reduce the risk of skin cancer and sunburn. Under influence of sunlight, free radicals are formed inside the skin. These free radicals can damage the DNA of cells. Lutein can protect against the damaging effects of UV-B radiation.<br /><br />Lycopene<br /><br />Description<br />Lycopene belongs to the family of carotenoids. It has a structure that consists of a long chain of conjugated double bonds, with two open end rings. The structure lycopene is the longest of all carotenoids<br /><br />Distribution<br />Lycopene is the red pigement of ripe tomatoes. Tomatoes contribute over 85% of the lycopene intake by women (Chug-Ahuja, 1993). Lycopene is also found in guava, pink grapefruit, red oranges and watermelon<br /><br />Properties<br />Lycopene is a very efficient antioxidant, which can neutralize oxygen derived free radicals. The oxidative damage caused by these free radicals has been linked to many degenerative diseases such as cardiovascular diseases, premature aging, cancer and cataracts. In many countries it is legally allowed to advertise foods containing tomato lycopene as "containing antioxidants for the maintenance and support of healthy cells". Lycopene is generally known for its protective action against prostate cancer.<br /><br />Anti-cancer<br />In vitro-studies have shown the anti-cancer properties of lycopene against many cancer cells, including cancer cells of prostate, stomach, lung, colon and skin. There are numerous studies about the effect of lycopene on cancer and prostate cancer in particular. Using Pubmed as a retrieval base, more than 80 scientific studies have the names lycopene and prostate in their title. Most of the in-vitro experiments using cultured prostate cancer cells demonstrate a protective effect. However, most literature review studies or clinical studies are less conclusive and often contradictory. Lycopene also shows anti-mutagenic action against chemically induced DNA damage.<br /><br />Antibacterial and antifungal<br />Lycopene possesses antibacterial and antifungal properties. Lycopene can help to reduce inflammation of the gums and can help to fight infections of Candida albicans.<br /><br />Diabetes<br />Diabetes patients may suffer from complications as vascular disease, diabetic neuropathies or infections. Lycopene helps to protect diabetes patients against cardiovascular disease and may improve the immune response.<br />However, the consumption of lycopene seems not to reduce the risk of diabetes mellitus type 2.<br /><br />Antioxidant<br />Lycopene has a structure similar to that of the well-known antioxidant beta-carotene, but its antioxidant activity is much stronger. Treatment of cells will lycopene protects cells against DNA damage and lipid peroxidation.<br /><br />Arteriosclerosis<br />Lycopene inhibits platelet aggregation and reduces the production of foam cells which play an important role in the development of arteriosclerosis. Lycopene helps to prevent arteriosclerosis by reducing inflammatory agents in rats increased risk of venous thrombosis.<br /><br />Antitoxic<br />In laboratory conditions, lycopene shows antitoxic properties against many toxins such as aflatoxin, cyclosporine and cadmium.<br /><br />Phytic acid<br /><br />Description<br />In plants phytic acid is the principal store of phosphate. Phytic acid is a natural plant antioxidant<br /><br />Distribution<br />Phytic acid can be found in most grains, seeds and beans. Rich sources of phytic acid are wheat bran and flaxseed (3 % phytic acid).<br /><br />Properties<br />Phytic acid has been considered as an anti-nutritional component in cereals, seeds and beans. Research has traditionally focused on its structure that gives it the ability to bind minerals, proteins and starch, and the resulting lower absorption of these elements. However, resent research have shown that phytic acid has many health benefits. Phytic acid has antioxidant, anticancer, hypocholesterolemic and hypolipidemic effects.<br /><br />Anticancer effect of phytic acid<br />In animal studies phytic acid showed a protective action in carcinogenesis. This action could be explained by its mineral chelating potential. Some studies suggest that phytic acid acts as anti-cancer agent by reversing the proliferative effects of carcinogens.<br /><br />Benificial for diabetic patients<br />Phytic acid may have health benefits for diabetes patients. It lowers blood glucose response by reducing the rate of starch digestion and slowing the gastric emptying.<br /><br />Other effects<br />Phytic acid releases inositol that during digestion. Although inositol is not an essential nutrient it might reduce depressions. Studies also show that phytic acid may reduce inflammation.<br /><br />Synonyms<br />Inositol-phosphate<br /><br />Quercetin<br /><br />Description<br />Quercetin is the most abundant of the flavonoids. Quercetin belongs to the flavonoids family and consist of 3 rings and 5 hydroxyl groups. Querctin is also a building block for other flavonoids. Quercetin occurs in food as a aglycone (attached to a sugar molecule). Only a small percentage of the ingested quercetin will get absorbed in the blood.<br /><br />Distribution<br />Quercetin is found in many common foods including apple, tea, onion, nuts, berries, cauliflower and cabbage.<br /><br />Properties<br />Quercetin has many health promoting effects, including improvement of cardiovascular health, reducing risk for cancer. Quercetin has anti-inflammatory and anti-allergic effects. All these activities are caused by the strong antioxidant action of quercetin. It will help to combat free radicals molecules, which can damage cells.<br />As many other flavonoids, quercetin prevents the oxidation of LDL (bad) cholesterol.<br />The anti-inflammatory action of quercetin is caused by the inhibition of enzymes, such as lipoxygenase, and the inhibition of inflammatory mediators. Quercetin also inhibits the release of histamine, which causes congestion, by basophils and mast cells.<br />Studies have shown that quercetin reduces the cancer risk of prostate, ovary, breast, gastric and colon cells.<br />Quercetin also seems to reduce the production of uric acid, by inhibiting the xanthine oxidase, thereby easing gout symptoms.<br />Studies have shown an improved lung function and lower risk of certain respiratory diseases (asthma and bronchitis) for people with high apple (rich in quercetin) intake.<br /><br />Research Reviews<br />Dietary Intakes of Flavonols, Flavones and Isoflavones by Japanese Women and the Inverse Correlation between Quercetin Intake and Plasma LDL Cholesterol<br />Concentration<br /><br />Tissue Distribution of Quercetin in Rats and Pigs<br />The Effect of Quercetin on SW480 Human Colon Carcinoma Cells: a Proteomic StudyQuercetin inhibits eNOS, microtubule polymerization, and mitotic progression in bovine aortic endothelial cells.<br />Rat Gastrointestinal Tissues Metabolize Quercetin<br /><br />Resveratrol<br /><br />Description<br />Resveratrol is a flavonol belonging to the group of flavonoids. It is produced by the plant as a defence against diseases.<br /><br />Distribution<br />Resveratrol is present in many plants and fruits, including red grapes, eucalyptus, spruce, blueberries, mulberries, peanuts, giant knotweed. Also red wine contains a lot of it. The longer the grape juice is fermented with the grape skins the higher the resveratrol content will be.<br /><br />Properties<br />Resveratrol is an antioxidant but its antioxidant properties are weaker that those of quercetin and epicatechin. It has anticancer properties and inhibits lipid peroxidation of low-density lipoprotein and prevents the cytotoxicity of oxidized LDL. Resveratrol also increases the activity of some antiretroviral drugs in vitro.<br /><br />Antioxidant<br />In vitro studies have shown that resveratrol inhibits the oxidative damage caused by the heavy metal cadmium. The antioxidant activity of resveratrol reduces damage to endothelial cells exposed to nitrite radicals and protects skin cells against damage caused by UV radiation.<br /><br />Anticancer<br />The antioxidant action of resveratrol helps to prevent damage to DNA but it also influences the transcriptions of genes responsible for redox metabolism and inhibits proliferartion of cancer cells. Resveratrol appears to decrease tumor promotion activity by inhibiting the enzyme cyclooxygenase-1, which converts arachidonic acid to substances that promote tumor growth.<br /><br />Benefits for diabetes<br />Resveratrol may be benificial for diabetes. Administration of resveratrol may protect against oxidative damage caused by high glucose levels. It also reduces diabetic neuropathic pain.<br /><br />Heart health<br />Resveratrol protects our heart and blood vessels by directly scavenging oxidants, which could cause oxidation of lipids, and by preventing apoptosis of endothelial cells. It may also help to prevent heart damage after a cardiac arrest. Reduced platelet aggregation has been attributes to resveratrol, thereby reducing the risk of atherosclerosis.<br /><br />Increase of lifespan<br />Tests with animals have shown that that high food intake reduces lifespan. One study showed that resveratrol was able to able to increase the life span of mice on a high calorie diet.<br /><br />Antitoxic<br />Many studies on animals have shown antitoxic effects of resveratrol. Resveratrol was able to reverse damages caused by the administration of the chemotherapeutic drug bleomycin. Resveratrol also helped to reduce brain damage and oxidative damage of the liver during ethanol intoxication. It also reduced kidney damage of rats treated with the antibiotic gentamicin.<br /><br />Facts about Resveratrol<br />Resveratrol explains partly the French Paradox: the low incidence of heart disease among French people, who eat relatively a lot of unhealthy fat but drink resveratrol containing red wine.<br /><br />Research Reviews<br />Resveratrol Promotes Clearance of Alzheimer's Disease<br />Resveratrol Inhibits TNF-alpha?Induced Proliferation and Matrix Metalloproteinase Expression in Human Vascular Smooth Muscle Cells<br /><br />Synonyms<br />Trans-3,5,4'-trihydroxystilbene<br /><br />Rutin<br /><br />Description<br />Rutin is a bioflavonoid. Pure rutin is yellow or yellow-green colored needle-shaped crystal. Rutin is a flavonol glycoside comprised of the quercetin and the disaccharide rutinose (rhamnose and glucose).<br /><br />Distribution<br />Rutin is found in many plants, fruits and vegetables. The richest source is buckwheat. Rutin is also found in citrus fruits, noni, black tea, apple peel. During digestion much of the rutin is metabolized to its aglycone, quercetin.<br /><br />Properties<br />Rutin has strong antioxidant properties. Rutin has also the property to chelate metal ions, such as iron, thereby reducing the Fenton reaction (production damaging oxygen radicals). Rutin also seems to stabilize vitamin C. If rutin is taken together with vitamin C, the activity of ascorbic will be intensified.<br />Rutin is important because it strengthens capillaries and can help people who bruise or bleed easily. Studies have demonstrated that rutin can help to stop venous edema, that is an early sign of chronic venous disease of the leg.<br />Rutin has anti-inflammatory effects. Animal studies have shown that rutin has preventive and healing effects.<br />There are indications that rutin can inhibit some cancerous and pre-cancerous conditions.<br />Rutin may help to prevent atherogenesis and reduce the cytotoxicity of oxidized LDL-cholesterol.<br /><br />Synonyms<br />Rutoside, quercetin-3-rutinoside and sophorin<br /><br />Silymarin<br /><br />Description<br />Silymarin is a polyphenolic flavonoid derived from milk thistle. Silymarin consists of three phytochemicals: silybin, silidianin and silicristin. Silybin is the most active phytochemicals and is largely responsible for the claimed benefits of silymarin.<br /><br />Distribution<br />Simylarin is found in milk thistle.<br /><br />Properties<br />Silmarin is a antioxidant or free radical scavenger. Skin care products often contain silymarin because it antioxidant activity may reduce the risk for skin cancer risk. Silymarin provides protection against different stages of UVB-induced carcinogenesis. Silymarin protects the liver by promoting the growth of new liver cells. By inhibiting lipid peroxidation silymarin helps to reduce or prevent liver damage caused by alcohol, poisonous mushrooms, drugs and other toxins. Silymarin also helps with the digestion of fats.<br />Silymarin is also used against HIV but there?s no evidence that silymarin is effective.<br />Studies indicate that silymarin decreasing endogenous insulin overproduction and the need for exogenous insulin administration. Silymarin has also anti-atherosclerotic activity, by inhibiting the expression of adhesion molecules.<br />Pharmacological studies show that silymarin is not toxic.<br /><br />Abstracts<br />Health Benefits of Silymarin<br />Synonyms<br />Silibinin<br /><br />Theobromine<br /><br />Description<br />Theobromine is an alkaloid belonging to the methylxanthines. The structure of theobromine is similar to that of caffeine.<br /><br />Distribution<br />Theobromine is mainly found in cocoa beans (about 25 g/kg), and consequently in chocolate. Theobromine levels are highest in dark chocolates (about 10 g/kg). Milk chocolates contains about 2 to 5 g theobromine per kg. (1-5 g/kg). Theobromine is also present in tea and cola nuts.<br /><br />Properties<br />Theobromine has a similar effect than caffeine, but about 10 times weaker. Theobromine has diuretic, stimulant and relaxing effects. Theobromine can lower the blood pressure because it can to dilate blood vessels.<br />Theobromine has stimulant properties, similar to caffeine. Unlike caffeine theobromine does not affect the central nervous system.<br />Theobromine can also relax bronchi muscles in the lungs. Theobromine can be used as cough medicine. Studies indicate that theobromine acts on the vagus nerve, which runs from the lungs to the brain.<br /><br />Facts about Theobromine<br />Although theobromine does not cause harmful effects with humans, it is highly toxic to some domestic animals, including dogs and horses. With the animals, theobromine can lead to cardiac arrhythmias and seizures.<br />Theobromine has a bitter flavour, which gives dark chocolate its typical bitter taste.<br /><br />Synonyms<br />3,7-dimethylxanthine, 3,7-dihydro-3,7-dimethyl-1H-purine-2,6-dione<br /><br />Ursolic acid<br /><br />Description<br />Ursolic acid is a is a pentacyclic triterpenoid.<br /><br />Distribution<br />Ursolic acid is present in many plants, including apples, bilberries, cranberries, elder flower, peppermint, lavender, oregano, thyme, hawthorn, prunes.<br /><br />Properties<br />Ursolic acid has medicinally action, both topically and internally. Ursolic acid is used in many cosmetic preparations for its anti-inflammatory, antitumor and antimicrobial properties.<br />Ursolic acid has antibacterial and antifungal activity. Tests have shown that Ursolic acid inhibits the growth of Candida albicans and Microsporium lenosum.<br />Ursolic acid has anti-inflammatory properties and is used in ointments to treat burns.<br />Topical application of ursolic acid inhibited TPA-induced initiation and promotion of tumor growth.<br /><br />Synonyms<br />Malol, micromerol, urson, prunol, (3b)-3-hydroxyurs-12-en-28-oic acid<br /><br />Hesperidin<br /><br />Description<br />Hesperidin is a flavanone glycoside consisting of the flavone hesperitin bound to the disaccharide rutinose. The sugar cause hesperidin to be more soluble than hesperitin.<br /><br />Distribution<br />The phytochemical hesperidin is mainly found in citrus fruits such as lemons and oranges. The highest concentration of hesperidin can be found in the white parts and pulps of the citrus peels. Hesperidin can also be found in green vegetables.<br /><br />Properties<br />Hesperidin has antioxidant, anti-inflammatory, hypolipidemic, vasoprotective and anticarcinogenic and cholesterol lowering actions. Hesperdin can inhibit following enzymes: phospholipase A2, lipoxygenase, HMG-CoA reductase and cyclo-oxygenase.<br />Hesperidin improves the health of capillaries by reducing the capillary permeability.<br />Hesperidin is used to reduce hay fever and other allergic conditions by inhibiting the release of histamine from mast cells. The possible anti-cancer activity of hesperidin could be explained by the inhibition of polyamine synthesis.<br />A study 'Hesperidin, a citrus flavonoids, inhibits bone loss and decreases serum and hepatic lipids in ovariectomized mice' by Hiroshige Chiba et al (J. Nutrition, June 2003) showed that hesperidin added to the died not only lowered serum and hepatic cholesterol, but also inhibited bone loss by decreasing osteoclast number in ovariectomized mice. The molecular mechanism of the inhibitory effect of hesperidin on bone resorption is not clear.<br /><br />Synonyms<br />Hesperetin 7-rhamnoglucoside, hesperetin-7-rutinoside<br /><br />Isorhamnetin<br /><br />Description<br />Isorhamnetin is a flavonoid, which occurs naturally in plants, but is also a metabolite of quercetin (isorhamnetin is methylated quercetin).<br /><br />Distribution<br />Red turnip, goldenrod, mustard leaf, ginkgo biloba.<br /><br />Properties<br />Isorhamnetin is not that much studied than quercetin. However, the few that exist indicate that isorhamnetin has similar health benefits: it may reduce the risk of cancer, improve heart health and ease diabetes complications.<br /><br />Anti-cancer<br />The anti-cancer effect of isorhamnetin has been demonstrated in in-vivo and in-vitro tests. In-vitro tests with lung cancer cells, liver cancer cells and esophageal cancer cells showed that isorhamnetin induces apoptosis of these cells. An in-vivo experiment with mice that were injected with isorhamnetin showed a reduced tumor weight.<br /><br />Heart health<br />Both quercetin and isorhamnetin help to improve heart health. They improve the endothelial function through their antioxidant action and reduce the oxidation of HDL, resulting in a decreased risk of arteriosclerosis. Isorhamnetin is a potential candidate to explain the reduction of blood pressure and vascular protective effects observed in animal models of hypertension.<br /><br />Diabetes complications<br />Some studies have focused on the ability of isorhamnetin to attenuate diabetes complications, such as diabetic cataract, lipid peroxidation and high blood glucose levels.<br /><br />Synonyms<br />3,5,7-Trihydroxy-2-(4-hydroxy-3-metoxyphenyl)benzopyran-4-on; 3,5,7-Trihydroxy-2-(4-hydroxy-3-<br />methoxyphenyl)-4H-1-benzopyran-4-one<br /><br />Myricetin<br /><br />Description<br />Myricetin is flavonol, consisting of 3-hydroxyflavone backbone and 6 hydroxyl groups. Pure myricetin is a yellow-beige powder crystalline powder. Myricetin mainly occurs in nature in the form of glycosides.<br /><br />Distribution<br />Myricetin is found in several foods such as walnuts, onions, berries, herbs and red grapes.<br /><br />Properties<br />Myricetin exerts a wide variety of biological effects, including antioxidant and free radical-scavenging activities. Reports indicate that myricetin has anti-cancer and anti-inflammatory properties and may improve bone-health.<br /><br />Anticancer<br />Myricetin has strong anticancer and antimutagenic properties, but it has been shown to promote mutagenesis with the use of the Ames Test. Although the anticancer property of myricetin has been attributed mainly to its antioxidant action, it has additional protective mechanisms.<br /><br />Anti-inflammatory<br />Myricetin has been shown to inhibit the expression of tumor necrosis factor-alpha, a cytokine that promotes the inflammatory response and is involved in inflammatory diseases. Myricetin glucuronide is an inhibitor of lipoxygenase 5-LOX and cyclooxygenases COX-1 and Cox-2.<br /><br />Heart health<br />Myricetin and other flavonoids may improve heart health by prevening LDL oxidation and reducing the uptake of oxidized LDL by macrophages.<br /><br />Diabetes<br />Studies showed that myricetin inhibits the uptake of methylglucose by adipocytes, reduces oxidative injury in diabetes related bone diseases and reduces glucose plasma level in diabetic rats.<br /><br />Brain health<br />Myricetin may offer benefits to person with brain diseases such as Parkinson and Alzheimer's. Myricetin inhibits ROS production caused by glutamate and reduces glutamate-induced activation of caspase-3. Myricetin restored dopamine level in laboratory animals with induced Parkinsonism. Myricetin may also inhibit beta-amyloid fibril formation in Alzheimer patients.<br /><br />Synonyms<br />3,3',4',5,5',7-hexahydroxyflavone, Cannabiscetin, Myricetol, Myricitin<br /><br />Naringin<br /><br />Description<br />Naringin belongs to the group of flavonoids. Pure naringin is a yellowish powder. Naringin is a conjugate of a sugar molecule with naringenin. The structure of naringin is very similar to that of hesperidin.<br /><br />Distribution<br />Naringin is mainly found in grapefruits. It is the compound that gives grapefruit its typical bitter flavour.<br /><br />Properties<br />Naringin has antioxidant, anti-carcinogenic and cholesterol lowering activity.<br />Studies have shown that naringin has a cholesterol-lowering effect, reduces LDL oxiation and can help to prevent hypercholesterolemia. Gorinstein S et al of the The Hebrew University-Hadassah Medical School, Jerusalem, studied the changes in plasma lipid and antioxidant activity in rats as a result of naringin and red grapefruit supplementation. They found that diets supplemented with red grapefruit juice and to a lesser degree with naringin improved the plasma lipid levels mainly in rats fed cholesterol and increased the plasma antioxidant activity. They concluded that naringin has plasma lipid lowering and plasma antioxidant activity increasing activity.<br />Naringin is an aldose reductase inhibitor which means that it can help to fight retinal disease linked to diabetics.<br />Naringin (and grapefruit) can interfere with certain drugs including calcium channel blockers, sedatives, cholesterol lowering drugs, caffeine and estrogen. Naringin stimulates the effect of caffeine and could therefore increase its fat burning action.<br /><br />Synonyms<br />4,5,7-Trihydroxyflavanone 7-rhamnoglucoside, Naringenin-7-neohesperidoside<br /><br />Nobiletin<br /><br />Description<br />Nobiletin is a citrus flavonoids with a structure similar to that of tangeretin. It has the typical flavonoid structure and contains 6 methoxyl groups, one more than tangeretin. This high level of methoxylation increases the hydrophobic character of tangeretin. Pure nobiletin has the appearance of colorless needles and has a bitter taste.<br /><br />Distribution<br />Peels of citrus fruits.<br /><br />Properties<br />Nobiletin seems to be a very noble phytochemical with many potential health benefits. The most studied properties of nobiletin are its anti-inflammatory and anti-cancer activities. Nobiletin also helps to lower cholesterol levels and some studies indicate that it may improve impaired memory loss and treat acne.<br /><br />Anti-inflammatory<br />Numerous in-vivo and in-vitro studies have demonstrated the anti-inflammatory activity of nobiletin and its metabolites. Nobiletin acts directly as an antioxidant but also interferes with biological inflammatory processes. It inhibits the expression of genes involved in inflammation by blocking the binding of NF-kappaB with DNA. One study showed that nobiletin reduced airway inflammation of asthmatic rats. Treatment of skin cells with nobiletin also reduced inflammation caused by ultraviolet-B radiation.<br /><br />Anti-cancer<br />The anti-cancer properties of nobiletin are supported by many scientific studies. Nobiletin act by its antiproliferation effect without being toxic to normal cells. Favourable results have been obtained on cancer cell lines of the liver, stomach, prostate and colon.<br /><br />Cholesterol lowering<br />A study with cultured macrophages demonstrated the cholesterol lowering and atherosclerosis inhibiting properties of nobiletin. Nobiletin also inhibits the formation of macrophage foam cells, macrophages loaded wit lipids, which build up on artery walls.<br /><br />Memory loss<br />One study on a mice model showed that nobiletin my help to improve memory loss. The brains of the mice were chirurgically altered to obtain models of Alzheimer disease. It is not known if nobiletin improves the condition of human Alzheimer patients.<br />Acne treatment<br />We found one study showing that nobiletin inhibited sebum production on hamsters and inhibited the proliferation of sebocytes, the cells that form the sebaceous gland. This observation led the researchers to conclude that nobiletin could be used as a drug for acne treatment.<br /><br />Synonyms<br />3',4',5,6,7,8-hexamethoxyflavone<br /><br />Proanthocyanidins<br /><br />Description<br />Proanthocyanidins are oligomeric flavonoids, mainly found in grapes. They are dimers (see picture) or oligomers of catechin and epicatechin and their gallic acid esters.<br /><br />Distribution<br />Proanthocyanidins are mainly found in the skin and seeds of grapes. They are also present in red wine. During the production of red wine, the juice is left to ferment with the seeds and skins during a few days. During this fermentation process, the formed alcohol will extract the proanthocyanidins from the seeds and skins. Other rich sources are cocoa, apples, peanuts, almonds, cranberries, blueberries and bark of the maritime pine.<br /><br />Properties<br />Consumption of red wine, red grape juice, grape skin and grape seeds has been linked to many health benefits. There are mainly two grape phytochemicals responsible for these benefits: proanthocyanidins and resveratrol. Proanthocyanidins are in the first place very strong antioxidants. Studies have shown that proanthocyanidins act as anti-cancer and anti-allergic agents, and that they improve heart health.<br />Antioxidant<br />Proanthocyanidins protect against oxidative damage and could reduce the damage caused by tobacco smoking, pollution and free radical form in our body during normal metabolism.<br /><br />Hearth Disease<br />Many studies have shown that proanthocyanidins help to prevent the oxidation of LDL cholesterol, reduce blood pressure and improve fat metabolism. The inhibitory action against LDL cholesterol appears to increase with the degree of polymerization of the proanthocyanidin molecules. Proanthocyanidins may prevent cardiovascular disease by reducing the risk associated with high blood cholesterol. Tests with rabbits showed that an extract of grape seed proanthocyanidins significantly reduced the development of aortic atherosclerosis. Grape seed proanthocyanidins have a cardioprotective effect and protect the heart against myocardial injuries induced by isoproterenol, a drug used as an inhaled aerosol to treat asthma.<br /><br />Anti-Cancer<br />Studies have shown that proanthocyanidins have anti-cancer and anti-tumour activity. The study by entitled Grape Seed Proanthocyanidins Induce Apoptosis and Inhibit Metastasis of Highly Metastatic Breast Carcinoma Cells (Carcinogenesis. 2006 August) concluded that grape seed proanthocyanidins may possess chemotherapeutic activity against breast cancer.<br />Anti-Allergic Proanthocyanidins inhibit enzymes that produce histamine and help to ease of allergies.<br /><br />Facts about Proanthocyanidins<br />Many plants produce proanthocyanidins in their fruits, bark, leaves and seeds to protect them from predation. Proanthocyanidins give the typical astringency to foods such as wine and teas.<br /><br />Research Reviews<br />Protective Effect of Grape Seed Polyphenols against High Glucose-Induced Oxidative Stress.<br /><br />Abstracts<br />Proanthocyanidins as Antioxidant<br />Anticancer Activity of Proanthocyanidins<br />Effect of Procyanidins on Anticancer Drug Doxorubicin<br />Synonyms<br />Pycnogenol, OPC, Oligomeric Procyanidins<br /><br />Tangeretin<br /><br />Description<br />Tangeretin is a citrus flavonoids. It has the typical flavonoid structure and contains 5 methoxyl groups. This high level of methoxylation increases the hydrophobic character of tangeretin. It has a very bitter taste.<br /><br />Distribution<br />Tangeretin can be found in the peel (albedo) of most citrus fruits. The whole orange fruit can contain up to 30 ppm tangeretin, but also orange juice contains some quantity. Commercial tangeretin is extracted from citrus peels.<br /><br />Properties<br />Only recently have scientists studied the biological activity of tangeretin. They found that tangeretin is readily absorbed in tissues and that it has many beneficial properties such lowering of cholesterol, anti-tumor activity and neuroprotective action.<br /><br />Cholesterol lowering<br />Animal studies have indicated that tangeretin has cholesterol lowering properties. One such found that rats fed with a diet containing tangeretin showed a significantly reduced (up to 40%) serum levels of LDL cholesterol.<br /><br />Anti-tumor<br />In-vitro test have shown that tangeretin acts as an antitumor agent. It induced apoptosis in leukemia cells without being toxic to normal cells. Tangeretin stops the growth of cancer cell in the G1 phase. On the other hand, tangeretin seems to counteract the anticancer drug tamoxifen and to suppress the activity of natural killer cells.<br /><br />Neuroprotection<br />A study with a rat model of Parkinson's disease showed that tangeretin increased the levels of dopamine and has potential neuroprotective activity.<br /><br />Synonyms<br />5,6,7,8-tetramethoxy-2-(4-methoxyphenyl)-4H-1-benzopyran-4-one 5,6,7,8,4'-pentamethoxyflavone<br /><br /><br /><br />Sumber: http://www.phytochemicals.info/phytochemicals/flavonoids.php<br /><br /></span><div class="blogger-post-footer">MEMUSNAHKAN TANDA TANYA ANDA. THANKS BRO !</div>Thailand aik aikhttp://www.blogger.com/profile/10964108109700651247noreply@blogger.com0tag:blogger.com,1999:blog-2030866544649181977.post-63951024324661095802009-12-24T03:34:00.003+07:002009-12-28T19:10:35.137+07:00SEA URCHINS (BULU BABI)<a onblur="try {parent.deselectBloggerImageGracefully();} catch(e) {}" href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEgxYNPtUCAg3M7tUtFjHf2J6sdJCweABukRYB1xjj2M1FukL2Z9DJ2dvxByxhhfu2PXscKGX6ANaAY0R1FZGgKmIRh3cRid7M-AZ40so7mzX2PKOH0dqzM9virXJ0iS-Lq3Ki9uHB5bY5k/s1600-h/sea.urchin.jpg"><img style="float:right; margin:0 0 10px 10px;cursor:pointer; cursor:hand;width: 200px; height: 200px;" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEgxYNPtUCAg3M7tUtFjHf2J6sdJCweABukRYB1xjj2M1FukL2Z9DJ2dvxByxhhfu2PXscKGX6ANaAY0R1FZGgKmIRh3cRid7M-AZ40so7mzX2PKOH0dqzM9virXJ0iS-Lq3Ki9uHB5bY5k/s200/sea.urchin.jpg" border="0" alt=""id="BLOGGER_PHOTO_ID_5420258275223779250" /></a><br /><span style="font-weight:bold;">By. Muhammad Fahri*</span><br />* Mahasiswa Perikanan<br /><br />Bulu babi atau urchin adalah binatang kecil, berbentuk bulat, bertulang belakang, yang merupakan bagian dari kelas Echinoidea. Bulu babi ditemukan seluruh samudra di dunia. Kulit atau "Test", mebentuk putaran dan bertulang belakang, secara khas dari 3 sampai 10 cm berhadapan. Warna umum hitam dan paduan dari hijau olive,, zaitun, coklat, ungu, dan merah. Pergerakkan pelan, Makanan kebanyakan dari ganggang. Berang-Berang Laut, Ikan belut Serigala, dan pemangsa lain merupakan predator bulu babi. Bulu babi juga dipanen oleh manusia dan rusa kecil sebagai makan yang lezat.<br /><span class="fullpost"> <br />Bulu babi adalah anggota phylum Echinodermata, meliputi bintang laut, ketimun laut, bintang rapuh, dan crinoids. Seperti echinoderms lain bulu babi mempunyai bentuk lima simetri (disebut pentamerisme) dan pergerakkan denga pertolongan ratusan tiny kecil, transparan, melekat " kaki tabung ". Pentamerous simetri tidak jelas nyata pada peristiwa kebetulan tetapi mudah dilihat di kulit bulu babi kering atau test.<br />Bersama dengan ketimun laut (Holothuroidea), menyusun subphylum Echinozoa, yang digambarkan terutama mempunyai bentuk globoid tanpa lengan atau memproyeksikan sinar. Ketimun Laut dan echinoids irregular mempunyai perubahan bentuk berbeda. Walaupun banyak ketimun laut mempunyai lengan bercabang disekeliling pembukaan mulutnya, ini berasal dari modifikasi kaki tabung dan tidak sama dengan lengan dari crinoids, bintang laut dan bintang rapuh.<br /><br />Anatomi Dan Fisiologi<br /><br />Pada mulanya, bulu babi sering terlihat sessile (diam), yaitu. tidak mampu untuk yang bergerak. Kadang-kadang tanda kehidupan yang paling menyolok adalah tulang belakang, yang dipasang pada dasar ke sendi peluru dan dapat menunjuk ke segala arah. <br /><br />Kebanyakan bulu babi, sentuhan cahaya menimbulkan gerakan dan reaksi yang dapat terlihat dari tulang belakang, yang memusat ke arah titik yang disentuh. Bulu babi tidak punya mata yang dapat melihat, kaki, atau alat bergerak, tetapi dapat bergerak dengan bebas di atas permukaan atas pertolongan pelekatan kaki tabungnya, bekerja bersama dengan tulang belakang.<br /><br />Diatas permukaan mulut bulu babi yaitu lokasi pertengahan mulut dapat menyusun lima gigi kalsium karbonat yang dipersatukan atau jaws, dengan struktur seperti lidah di dalam. Keseluruhan organ pengunyahan dikenal sebagai Lentera Aristotle's, nama yang berasal dari deskripsi akurat Aristotle's dalam Story of Animals nya:<br /><br /> … bulu babi mempunyai apa yang disebut kepala dan mulut menurun, and ditempatkan untuk isu residu atas di atas. Bulu babi juga mempunyai, lima gigi berongga di dalam, dan pada pertengahan gigi ini terdapat unsur gemuk yang melayani lidah. Kemudian kerongkongan, dan kemudian perut, dibagi menjadi lima bagian, dan terisi dengan kotoran ekskresi, semua lima bagian dipersatukan pada lubang anal, di mana kulit dilubangi untuk suatu saluran pembuangan... Pada kenyataannya anggota mulut bulu babi berlanjut dari suatu akhir ke lain, tetapi pada penampilan luar tidak demikian, tetapi kelihatan seperti suatu lentera tanduk dengan kaca tanduk dihilangkan. (Tr. D'Arcy Thompson)<br /><br />Bulu babi membangun spicules, dari kristal yang tajam "tulang" itu yang mendasari endoskeleton pada fase larval. Spicule secara penuh dibentuk terdiri atas kristal tunggal dengan marfologi tidak biasa. tidak punya segi dan di dalam 48 jam dari asumsi pembuahan menjadi bentuk yang terlihat sangat mirip dengan Logo Mercedes-Benz.<br /><br />Tulang belakang, dalam beberapa jenis adalah panjang dan tajam, berfungsi untuk melindungi bulu babi dari pemangsa. Tulang belakang dapat menimbulkan luka menyakitkan pada manusia jika terinjak diatasnya, tetapi tidak berbahaya serius, dan tidak dijelaskan bahwa tulang belakang sangat beracun (tidak sama dengan pedicellariae antara tulang belakang, yang beracun).<br /><br />Bulu babi secara khas mempunyai tulang belakang yang panjangnya antara 1 sampai 3 cm, tebal 1 sampai 2 mm, dan tidak tajam. Diadema Antillarum, umum dikenal dengan Caribbean, mempunyai tulang belakang tipis, berpotensi berbahaya yang dapat mencapai panjang 10 sampai 30 cm. Beberapa tulang belakang bulu babi adalah beracun.<br /><br />Ekologi<br /><br />Makanan Bulu babi sebagian besar adalah ganggang, tetapi dapat juga hidup dengan cakupan luas dari hewan tak bertulang punggung seperti kupang, spons / bunga-karang, bintang rapuh dan crinoids. (Baumiller, Tomasz K. 2008) Bulu babi adalah salah satu dari makanan favorit berang-berang laut dan juga sumber nutrisi utama untuk ikan belut serigala. Jika tidak dikendalikan, bulu babi akan merusak lingkungan yang diciptakan oleh ahli biologi yang disebutsea urchin barren, tanpa macroalgae dan asosiasi fauna. Di mana berang-berang laut direintrodusikan di British Columbia, kesehatan ecosystem pantai meningkatkan secara dramatis<br /><br />Bulu babi adalah salah satu dari model organisme tradisional dalam pengembangan biologi. Penggunaan bulu babi didalam konteks ini memulai dari era 1800an, ketika pengembangan embrio dari bulu babi mudah diamati dengan mikroskop. Bulu babi merupakan jenis pertama di mana sel sperma terbukti berperan penting didalam reproduksi oleh pembuahan sel telur.<br /><br />Dengan peruntunan (sequencing) genome terbaru dari bulu babi, homology telah ditemukan antara bulu babi dan gen sistem kekebalan pada hewan bertulang belakang. Kode Bulu babi sedikitnya 222 gen Toll-like receptor (TLR) dan lebih dari 200 gen berhubungan dengan Nod-Like-Receptor (NLR) yang ditemukan pada keluarga vertebrates (Rast, JP et al. 2006). Ini membuat bulu babi menjadi organisme model berharga untuk para ahli immunologis untuk mempelajari evolusi dari imunitas bawaan.<br /><br />Anatomi dewasa: Bulu babi dewasa mempunyai lima sisi simetri radial. Kulit keras, plat berkapur, disebut test. Bulu babi mempunyai badan berbentuk bulat dan tulang belakang yang panjang menyebar dari badan. Tulang belakang digunakan untuk perlindungan, untuk bergerak, dan untuk mengapung mengerat ganggang untuk makanan. Di antara tulang belakang terdapat lima dipasang baris dari tabung kecil kaki dengan pengisap yang membantu penggerakan, menangkap makanan, dan menempel pada dasar laut. Pedicellarines kecil struktur untuk menyengat yang digunakan untuk pertahanan dan untuk memperoleh makanan. Seperti semua echinoderms, bulu babi tidak mempunyai otak. Mulut seperti kuku dan terletak pada bagian bawah mempunyai 5 plat seperti gigi yang menunjuk ke arah dalam disebut Lentera Aristotle's. Anus dan pori-pori genital bulu babi berada di atas.<br /><br />Diet: Bulu babi makan tumbuhan dan binatang, mencakup tumbuhan laut yang besar, bahan hasil pembusukan, ganggang, ikan mati, bunga-karang, kupang, dan teriti).<br /><br />Pemangsa : Bulu babi dimangsa oleh ketam, bintang laut, keong, berang-berang laut, beberapa burung-burung, pemakan ikan (teramsuk ikan belut serigala), dan manusia.<br /><br />Reproduksi: Pembuahan eksternal. Bulu Babi betina melepaskan beberapa juta telor kecil yang dibungkus cairan gel pada waktu yang sama. Telor atau sperma dilepaskan melalui lima gonopores. Perkembanga, larva kecil (disebut pluteus, mempunyai bi-lateral simetri) berenang di laut dan sperti komponen zooplankton. Setelah beberapa bulan bulu babi muda terbentuk. Waktu dari pembuahan sampai usia dewasa reproduktif adalah dari 2sampai 5 tahun.<br /><br />Klasifikasi: Kerajaan Animalia (Binatang), Phylum Echinodermata (echinoderms), Kelas Echinoidea (Bulu Babi).<br /><br /></span><div class="blogger-post-footer">MEMUSNAHKAN TANDA TANYA ANDA. THANKS BRO !</div>Thailand aik aikhttp://www.blogger.com/profile/10964108109700651247noreply@blogger.com0tag:blogger.com,1999:blog-2030866544649181977.post-9935061922490187122009-12-24T01:01:00.004+07:002009-12-28T23:07:41.060+07:00Penyakit Tumor Dan Kanker<a onblur="try {parent.deselectBloggerImageGracefully();} catch(e) {}" href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEg6tkQdjQMkx12j23pZiaxAU23sBQJv38bx_zJRP-XMXlFZehyaZ66-3SfsyCyOXjGRU6sHlFapAOGHstaCKwVKuWVt339KL7llRssly7kvXiBB8zmAyYHbO8Wj2BEM2aIPG39onyRd1qY/s1600-h/proses+angiogenesis.jpg"><img style="float:right; margin:0 0 10px 10px;cursor:pointer; cursor:hand;width: 200px; height: 136px;" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEg6tkQdjQMkx12j23pZiaxAU23sBQJv38bx_zJRP-XMXlFZehyaZ66-3SfsyCyOXjGRU6sHlFapAOGHstaCKwVKuWVt339KL7llRssly7kvXiBB8zmAyYHbO8Wj2BEM2aIPG39onyRd1qY/s200/proses+angiogenesis.jpg" border="0" alt=""id="BLOGGER_PHOTO_ID_5420319335620794802" /></a><br />by. Muhammad Fahri*<br /><br />Tumor atau kanker merupakan suatu penyakit sel yang ditandai dengan hilangnya fungsi kontrol sel terhadap regulasi daur sel maupun fungsi homeostatis sel pada organisme multiseluler. Dengan kegagalan tersebut, sel tidak dapat berproliferasi secara normal. Akibatnya, sel akan berproliferasi terus-menerus sehingga menimbulkan pertumbuhan jaringan yang abnormal (tidak terkendali).<br /><br /><span class="fullpost"><br /><br />Perkembangan tumor berupa invasi merupakan langkah awal untuk metastasis kanker yang meliputi motilitas sel, perlekatan permukaan dan aktivitas ekstraselular protease. Untuk invasi sel kanker memerlukan peningkatan migrasi, berbagai perubahan sitofisiologik yang meliputi hilangnya perlekatan sel-sel bersama dengan meningkatnya perlekatan sel-matrik, dan meningkatnya ekspresi dan aktivasi ekstraseluler protease untuk mendegradasi ekstraseluler matrik dan mengijinkan sel berinvasi dan metastasis. (Chen, P. N et al., 2006).<br /><br />Sel-sel pada hati akan memperbanyak diri untuk menggantikan sel-sel yang rusak karena luka atau karena sudah tua. Seperti proses pembentukan sel lain di dalam tubuh, proses ini juga dikontrol oleh gen-gen tertentu dalam sel. Kanker hati berasal dari satu sel yang mengalami perubahan mekanisme kontrol dalam sel yang mengakibatkan pembelahan sel yang tidak terkontrol. Sel abnormal tersebut akan membentuk jutaan kopi, yang disebut klon. Mereka tidak dapat melakukan fungsi normal sel hati dan terus menerus memperbanyak diri. Sel-sel tidak normal ini akan membentuk tumor (Anonim, 2004).<br /><br />Karakteristik Sel Kanker<br /><br />Sel tumor ganas bersifat abnormal dalam berbagai cara di samping proliferasi yang berlebihan. Sel itu mungkin memiliki jumlah kromosom yang tidak biasa. Metabolismenya mungkin dikacaukan, dan sel itu berhenti berfungsi dengan cara konstruktif. Akibat perubahan abnormal pada permukaan sel, sel itu juga kehilangan pelekatan dengan sel di sebelahnya dan dengan matriks ekstraseluler, dan dapat menyebar ke jaringan di dekatnya. Sel kanker dapat juga berpisah dari tumor asli, dan memasuki pembuluh darah dan pembuluh limfa pada system peredaran tubuh, menyerang bagian tubuh lainnya dimana sel itu berproliferasi untuk membentuk tumor baru. Penyebaran sel kanker di luar dari tempat asalnya disebut metatesis. Jika tumor bermetatesis, pengobatan mungkin melibatkan radiasi energi tinggi dan kemoterapi dengan obat beracun yang sangat berbahaya bagi sel yang sedang aktif membelah.<br /><br />Menurut Hanahan dan Weinberg (2000), sel tumor atau kanker memiliki karakteristik sebagai berikut :<br /><br />Sel kanker mampu mencukupi kebutuhan sinyal pertumbuhannya sendiri. Sinyal pertumbuhan diperlukan agar sel dapat terus membelah. Berbeda dari sel normal, sel kanker dapat tetap dan terus tumbuh.<br /><br />Tidak sensitif terhadap sinyal antipertumbuhan. Sel kanker tidak merespon adanya sinyal yang dapat menghentikan terjadinya pertumbuhan dan pembelahan sel. Dengan demikian, sel kanker dapat terus membelah.<br /><br />Sel kanker mampu menghindar dari mekanisme apoptosis. Apoptosis merupakan program bunuh diri sel ketika sel tersebut mengalami kerusakan, baik struktural maupun fungsional, yang tidak dapat ditolerir lagi. Namun sel kanker dapat menghindar dari kematian dengan mengeblok jalur terjadinya apoptosis di dalam sel.<br /><br />Sel kanker memiliki potensi tak terbatas untuk mengadakan replikasi.<br /><br />Sel kanker mampu menginduksi angiogenesis untuk mencukupi kebutuhannya akan oksigen dan nutrisi. Pada tahap perkembangan tumor yang hiperproliferatif, sel-sel tumor akan mengekspresikan protein proangiogenik sehingga akan terbentuk cabang baru pada pembuluh darah yang menuju sel kanker yang kemudian akan mensuplai kebutuhan nutrisi dan oksigen dari sel kanker.<br /><br />Sel kanker mampu menginvasi jaringan di sekitarnya dan membentuk anak sebar .<br /><br />Sedangkan menurut Pecorino (2005) terdapat enam (6) karakter sel kanker (The six hallmark of cancer) adalah sebagai berikut ini :<br /><br />Growth signal autonomy :<br />-Sel normal memerlukan sinyal eksternal untuk pertumbuhan dan pembelahannya<br />-Sel kanker mampu memproduksi growth factors dan growth factor receptors sendiri.<br />-Dalam proliferasinya sel kanker tidak tergantung pada sinyal pertumbuhan normal.<br />-Mutasi yang dimilikinya memungkinkan sel kanker untuk memperpendek Growth Factor pathways .<br /><br />Evasion Growth inhibitory signals :<br />-Sel normal merespon sinyal penghambatan pertumbuhan untuk mencapai homeostasis. Jadi ada waktu tertentu bagi sel normal untuk proliferasi dan istirahat.<br />-Sel kanker tidak mengenal dan tidak merespon sinyal penghambatan pertumbuhan.<br />-Keadaan ini banyak disebabkan adanya mutasi pada beberapa gen (proto-onkogen) pada sel kanker.<br /><br />Evasion of Apoptosis Signals :<br />-Sel normal akan dikurangi jumlahnya dengan mekanisme apoptosis, bila ada kerusakan DNA yang tidak bisa lagi direparasi.<br />-Sel kanker tidak peka terhadap sinyal apoptosis (padahal sel kanker membawa acumulative DNA error yang sifatnya irreversible)<br />-Kegagalan sel kanker dalam merespon sinyal apoptosis lebih disebabkan karena mutasinya gen-gen regulator apoptosis dan gen-gen sinyal apoptosis.<br /><br />Unlimited replicative potential :<br />-Sel normal mengenal dan mampu menghentikan pembelahan selnya bila sudah mencapai jumlah tertentu dan mencapai pendewasaan. Pengitungan jumlah sel ini ditentukan oleh pemendekan telomere pada kromosom yang akan berlangsung setiap ada replikasi DNA.<br />-Sel kanker memiliki mekanisme tertentu untuk tetap menjaga telomere tetap panjang, hingga memungkinkan untuk tetap membelah diri.<br />-Kecacatan dalam regulasi pemendekan telomere inilah yang memungkinkan sel kanker memiliki unlimited replicative potential.<br /><br />Angiogenesis (formation of blood vessels) :<br />-Sel normal memiliki ketergantungan terhadap pembuluh darah untuk mendapatkan suplay oksigen dan nutrient yang diperlukan untuk hidup. Namun, arsitektur pembuluh darah sel normal lebih seherhana atau konstan sampai dengan sel itu dewasa.<br />-Sel kanker mampu menginduksi angiogenesis, yaitu pertumbuhan pembuluh darah baru di sekitar jaringan kanker. Pembentukan pembuluh darah baru ini diperlukan untuk survival sel kanker dan ekspansi ke bagian lain dari tubuh (metastase).<br />-Kecacatan pada pengaturan keseimbangan induser angiogenik dan inhibitornya dapat mengaktifkan angiogenic switch.<br /><br />Invasion and metastasis :<br />-Normal sel memiki kepatuhan untuk tidak berpindah ke lokasi lain di dalam tubuh.<br />-Perpindahan sel kanker dari lokasi primernya ke lokasi sekunder atau tertiernya merupakan faktor utama adanya kematian yang disebabkan karena kanker.<br />-Mutasi memungkinkan peningkatan aktivitas ensim-ensim yang terlibat invasi sel kanker (MMPs).<br />-Mutasi juga memungkinkan berkurangnya atau hilangnya adesi antar sel oleh molekul-molekul adisi sel, meningkatnya attachment, degragasi dan migrasi.<br /><br />Menurut Vinay Kumar, et, al (2005), pada percobaan skala in vitro, perbedaan karakter antara sel normal dan kanker adalah sebagai berikut :<br /><br />Sel normal akan tumbuh sebagai selapis sel (monolayer) jika dibiakan dalam petridish, semua ini karena adanya kepekaan terhadap contact inhibition dengan sel-sel tetangganya (bila sel normal sudah menyentuh sel tetangganya maka pertumbuhannya akan berhenti).<br /><br />Transformed cells (sel kanker) memiliki fenotipe sebagai berikut :<br /><br />-Tumbuh terus tanpa mengenal contact inhibitory signals, tumbuh menumpuk ke atas bukan sebgai monolayer.<br />-Dapat tumbuh dalam kondisi minim serum (serum / FBS (fetal bovine serum) berisi banyak Growth factor, sel kanker mampu memenuhi kebutuhan Growth factors sendiri.<br />-Morfologi sel kanker lebih membulat dengan inti yang relatif lebih besar (karena aktif membelah).<br /><br />Beberapa obat antikanker yang telah dikembangkan saat ini antara lain berupa obat yang merangsang diferensiasi sel sehingga akan terjadi perubahan sifat dari sel kanker yang ganas menjadi sel jinak, obat yang dapat meningkatkan efektivitas radiasi dan obat yang mengubah respon imun sel kanker dengan sel sehat. Selain itu, telah banyak obat-obatan yang dikembangkan berdasarkan aktivitas molekuler dari sel kanker. Namun, obat-obatan tersebut mengalami permasalahan dalam hal resistensi dan toleransi obat serta selektivitas obat itu sendiri disamping dari berbagai efek samping yang dapat ditimbulkan .<br /><br />NB. Dari banyak sumber.<br /><br /></span><div class="blogger-post-footer">MEMUSNAHKAN TANDA TANYA ANDA. THANKS BRO !</div>Thailand aik aikhttp://www.blogger.com/profile/10964108109700651247noreply@blogger.com0tag:blogger.com,1999:blog-2030866544649181977.post-24264429936448288202009-12-24T00:42:00.003+07:002009-12-28T23:03:21.462+07:00(Brine Shrimp Lethality Test)<a onblur="try {parent.deselectBloggerImageGracefully();} catch(e) {}" href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEida6kxgO9nAnX4gAlkYMRphNZrn0typKdPiQqH3cyJBbQymBCzMPvpdDdmxf3FR7FkBjmckY-uZzWXwniBNb2tWk8u5-IO9r4-1KxgowulpPBHrWM9blYiKlcFjXkO6CNEzGS8bkh3GUc/s1600-h/uji+toksisitas+antitumor2.JPG"><img style="float:right; margin:0 0 10px 10px;cursor:pointer; cursor:hand;width: 200px; height: 139px;" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEida6kxgO9nAnX4gAlkYMRphNZrn0typKdPiQqH3cyJBbQymBCzMPvpdDdmxf3FR7FkBjmckY-uZzWXwniBNb2tWk8u5-IO9r4-1KxgowulpPBHrWM9blYiKlcFjXkO6CNEzGS8bkh3GUc/s200/uji+toksisitas+antitumor2.JPG" border="0" alt=""id="BLOGGER_PHOTO_ID_5420318192877576322" /></a><br />by Muhammad Fahri.<br /><br /><b>Uji Toksisitas (Brine Shrimp Lethality Test)</b><br /><br />Senyawa yang diduga memiliki aktifitas anti kanker, harus di ujikan terlebih dahulu pada hewan percobaan. Metode Brine Shrimp Lethality Test (BST) dengan menggunakan larva udang Artemia salina Leach sebagai hewan uji merupakan salah satu metode yang banyak digunakan untuk pencarian senyawa antikanker baru yang berasal dari tanaman. Hasil uji toksisitas dengan metode ini telah terbukti memiliki korelasi dengan daya sitotoksis senyawa anti kanker. Selain itu, metode ini juga mudah dikerjakan, murah, cepat dan cukup akurat (Meyer, 1982). Lebih dari itu uji larva udang ini juga digunakan untuk praskrining terhadap senyawa-senyawa yang diduga berkhasiat sebagai antitumor. Dengan kata lain, uji ini mempunyai korelasi yang positif dengan potensinya sebagai antikanker (Anderson, 1991).<br /><br /><span class="fullpost"><br />Artemia salina Leach merupakan komponen dari invertebrata dari fauna pada ekosistem perairan laut. Udang renik ini mempunyai peranan yang penting dalam aliran energi dan rantai makanan. Spesies invertebrata ini umumnya digunakan sebagai organisme sentinel sejati berdasarkan pada penyebaran, fasilitas sampling, dan luasnya karakteristik ekologi dan sensifitasnya terhadap bahan kimia (Calleja M.C, Persoone G, 1992).<br />Pengujian Lethalitas telah digunakan dengan sukses untuk isolasi biomonitor dari cytotoxic (Siqueira, M. J et. al., 1998), antimalaria (Perez, H, et.al., 1997), insektisida (Oberlies, N. H.,et.al., 1998), dan antifeedent (Labbe, C., et.al., 1993) campuran dari ektrak tumbuhan. Hasil dari skrening dari air, hydroalcoholic dan ekstrak alkohol dari beberapa tumbuhan obat penting yang digunakan dalam pengobatan tradisional untuk lethalitas merujuk pada larva Artemia salina yang diperkenalkan.<br />Suatu konsentrasi mematikan (Lethal Concentration) adalah analisa secara statistik yang menggunakan uji Whole Effluent Toxicity (WET) untuk menaksir lethalitas sampel effluen. Test akut digunakan di Wisconsin untuk menaksir kondisi "akhir dari pipa" (yaitu, effluent yang tidak dilemahkan, sebagai adanya dibebaskan pada lingkungan).<br /><br />Konsentrasi effluen dimana 50% dari organisme mati selama test (LC50) digunakan sebagai pemenuhan titik akhir (endpoint) untuk Test Whole Effluent Toxicity (WET) akut. Dalam rangka mengkalkulasi LC50, salah satu dari konsentrasi test harus menyebabkan > 50% kematian. LC50, yang lebih rendah berarti semakin beracun effluent tersebut. Sebagai contoh, LC50 > 100% berarti kekuatan penuh effluent tersebut tidak membunuh lebih dari separuh organisme. LC50 sama dengan 50% berarti separuh effluent mempunyai kekuatan membunuh 50% dari organisme tersebut.<br /><br />Menurut Meyer dkk. (1982) tingkat toksisitas dari ekstrak tanaman dapat ditentukan dengan melihat harga LC50-nya. Apabila harga LC50 lebih kecil dari 1000 μg/ml dikatakan toksik, sebaliknya apabila harga LC50 lebih besar dari 1000 μg/ml dikatakan tidak toksik. Tingkat toksisitas tersebut akan memberi makna terhadap potensi aktivitasnya sebagai antitumor. Semakin kecil harga LC50 semakin toksik suatu senyawa.<br /><br /></span><div class="blogger-post-footer">MEMUSNAHKAN TANDA TANYA ANDA. THANKS BRO !</div>Thailand aik aikhttp://www.blogger.com/profile/10964108109700651247noreply@blogger.com1tag:blogger.com,1999:blog-2030866544649181977.post-89607678801827576532009-12-24T00:13:00.010+07:002009-12-24T00:36:30.479+07:00Alga Coklat Sargassum duplicatum<a onblur="try {parent.deselectBloggerImageGracefully();} catch(e) {}" href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEifhI_d7tOPRWz6eVMJR28ccVuleKBYRApw_Tr50AmiGZzZMtxuZiWcu__q4smDM9mLogGoIi8BSCVCA6YFYPXftrgJ5-DNYrv0nvPirRhATVvboVdk9GjFCyUkjCEZi_jqWnPLejYffi4/s1600-h/Sargassum_cristaefolium2.jpg"><img style="float:right; margin:0 0 10px 10px;cursor:pointer; cursor:hand;width: 96px; height: 150px;" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEifhI_d7tOPRWz6eVMJR28ccVuleKBYRApw_Tr50AmiGZzZMtxuZiWcu__q4smDM9mLogGoIi8BSCVCA6YFYPXftrgJ5-DNYrv0nvPirRhATVvboVdk9GjFCyUkjCEZi_jqWnPLejYffi4/s320/Sargassum_cristaefolium2.jpg" border="0" alt="" id="BLOGGER_PHOTO_ID_5418485988937154322" /></a>by. Muhammad Fahri*<br /><br /><br />Alga Sargassum merupakan salah satu marga Sargassum termasuk dalam kelas Phaeophyceae. Ada 150 jenis Marga Sargassum yang dijumpai di daerah perairan tropis, subtropis dan daerah bermusim dingin (Nizamuddin, 1970). Habitat alga Sargassum tumbuh diperairan pada kedalaman 0,5–10 m, ada arus dan ombak. Pertumbuhan alga ini sebagai makro alga bentik melekat pada substrat dasar perairan. Di daerah tubir tumbuh membentuk rumpun besar, panjang thalli utama mencapai 0,5-3 m dengan untaian cabang thalli terdapat kantong udara (bladder), selalu muncul di permukaan air. <div><br />Di Indonesia diperkirakan terdapat lebih dari 15 jenis alga Sargassum dan yang telah dikenal mencapai 12 jenis. Sedangkan di perairan Indo-Pasifik tercatat 58 jenis (Bosse, 1928). Alga Sargassum tumbuh sepanjang tahun, alga ini bersifat “perenial” atau setiap musim barat maupun timur dapat dijumpai di berbagai perairan.<br /><span class="fullpost"><br />Sargassum secara ekologis ikut andil dalam pembentukan ekosistem terumbu karang dan merupakan tempat asuhan bagi biota kecil, termasuk untuk perlindungan benih ikan dan benur udang serta sarang melekatnya telur cumi-cumi. Jenis Sargassum yang telah dipasarkan di daerah Jawa Barat dari jenis Sargassum polycystum, Sargassum binderi dan Sargassum duplicatum. Marga Sargassum mengandung bahan alginat dan iodin, bermanfaat sebagai bahan industri makanan, farmasi, kosmetik dan tekstil.<br /><br />Morfologi dan Penyebaran S. duplicatum<br /><br />Di dunia Sargassum spp. ada sekitar 400 spesies, sedangkan di Indonesia dikenal ada 12 jenis, yaitu : Sargassum duplicatum, S. hitrix, S. echinocarpum, S. gracilinum, S. obtuspfolium, S. binderi, S. polyceystum, S. microphylum, S. crassifolium, S. aquafolium, S. vulgare, dan S. polyceratium. Hormophysa di Indonesia dijumpai satu jenis yaitu H. tricuetra dan Turbinaria spp. ada 4 jenis yaitu T. conoides, T. conoides, T. ornata, T. murrayana dan T. deccurens (DirJen Perikanan Budidaya DKP RI, 2009).<br /><br />Alga coklat Sargassum spp. termasuk tumbuhan kosmopolitan, tersebar hampir diseluruh perairan Indonesia. Penyebaran Sargassum spp. di alam sangat luas terutama di daerah rataan terumbu karang di semua wilayah perairan pantai.<br /><br />Lingkungan tempat tumbuh alga Sargassum terutama di daerah perairan yang jernih yang mempunyai substrat dasar batu karang, karang mati, batuan vulkanik dan benda-benda yang bersifat massif yang berada di dasar perairan. Alga Sargassum tumbuh dari daerah intertidal, subtidal sampai daerah tubir dengan ombak besar dan arus deras. Kedalaman untuk pertumbuhan dari 0,5–10 m. Marga Sargassum termasuk dalam kelas Phaeophyceae tumbuh subur pada daerah tropis, suhu perairan 27,25 – 29,30 oC dan salinitas 32–33,5 %o. Kebutuhan intensitas cahaya matahari marga Sargassum lebih tinggi dari pada marga alga merah. Boney (1965) menyatakan pertumbuhan Sargassum membutuhkan intensitas cahaya matahari berkisar 6500–7500 lux. Alga Sargassum tumbuh berumpun dengan untaian cabang-cabang. Panjang thalli utama mencapai 1–3 m dan tiap-tiap percabangan terdapat gelembung udara berbentuk bulat yang disebut “Bladder,” berguna untuk menopang cabang-cabang thalli terapung ke arah permukaan air untuk mendapatkan intensitas cahaya matahari.<br /><br />Taksonomi Sargassum duplicatum<br /><br />Berdasarkan hirarki taksonomi Sargassum duplicatum menurut NODC Taxonomic Code, database (version 8.0) (1996) adalah sebagai berikut :<br />Kingdom : Plantae -- Planta, plantes, plants, Vegetal<br />Division : Phaeophyta -- algues brunes, brown algae<br />Class : Phaeophyceae<br />Order : Fucales<br />Family : Sargassaceae<br />Genus : Sargassum C. Agardh<br />Species : Sargassum duplicatum J. Ag.<br />Variety : Sargassum duplicatum duplicatum J. Ag.<br />Sumber : NODC Taxonomic Code, database (version 8.0)<br />Acquired : 1996<br /><br />Kandungan S. duplicatum<br /><br />Rumput laut mengandung komponen penting yang dibutuhkan dalam proses fisiologis hewan dan manusia. Rumput laut kaya akan karbohidrat, protein, lipid dan mineral dan tidak menyebabkan kerusakan pada paru-paru, ginjal, perut dan usus (Katheresan, 1992). Sehingga dapat digunakan sebagai suatu sumber potensi pangan fungsional.<br /><br />Secara umum, rumput laut mempunyai kandungan nutrisi cukup lengkap. Secara kimia rumput laut terdiri dari air (27,8%), protein (5,4%), karbohidrat (33,3%), lemak (8,6%) serat kasar (3%) dan abu (22,25%). Selain karbohidrat, protein, lemak dan serat, rumput laut juga mengandung enzim, asam nukleat, asam amino, vitamin (A, B, C, D, E dan K) dan makro mineral seperti nitrogen, oksigen, kalsium dan selenium serta mikro mineral seperti zat besi, magnesium dan natrium. Kandungan asam amino, vitamin dan mineral rumput laut mencapai 10 -20 kali lipat dibandingkan dengan tanaman darat (Anonim, 2009).<br /><br />Rumput laut telah banyak digunakan sebagai bahan pembuatan obat-obatan dan suplemen makanan serta difortifikasi ke produk pangan untuk meningkatkan nilai jual produk tersebut. Jenis rumput laut yang banyak digunakan untuk pembuatan obat adalah alga coklat khususnya Sargasum dan Turbinaria. Pengolahan rumput laut jenis tersebut menghasilkan ekstrak berupa senyawa natrium alginat. Senyawa alginat inilah yang dimanfaatkan dalam pembuatan obat antibakteri, anti tumor, penurunan darah tinggi dan mengatasi gangguan kelenjar.<br /><br />Alga coklat ini adalah anggota Pheophyta, alga khas daerah tropik, mengandung pigmen klorofil a dan c, alfa dan beta karoten, alginat dan lain-lain. Alginat diduga dapat menurunkan kadar gula darah, kolesterol dan dapat mengabsorbsi logam berat dalam tubuh, atau dapat menyembuhkan penyakit degeneratif organ-organ tubuh, misalnya hepar, ren, dan cerebellum. Alga coklat dapat tumbuh subur disebagian besar pantai perairan laut Indonesia. Sargassum, terutama Sargassum duplicatum mengandung protein 2,97%, lemak 0,26%, zat anti tumor, algin, mineral (Ca, K, Na, Cu, Zn, Mg, I, S dan P, Fenol). Alga ini juga mengandung zat anti bakteri dan anti virus. Kandungan nutrien dan potensi zat-zat yang terdapat dalam alga laut, khususnya Sargassum belum banyak diteliti (Mulyo A.U, 2009)<br /><br />Senyawa Aktif Antitumor dari S. duplicatum<br /><br />Menurut Atmadja produk alam makroalga yang telah teruji aktivitas antikankernya yaitu polisakarida alga antara lain : polisakarida sulfat, sodium alginat fraksi G dan fraksi M, karagenan iota, karagenan kappa, karagenan lambda dan porphyran. Mortalitas Artemia pada larutan ekstrak E. alvarezii yang terlarut pada metanol dan kloroform, membuktikan adanya metabolisme sekunder yang bersifat polar dan nonpolar. Senyawa metabolit sekunder dari alga yang bersifat polar adalah flavonoid dan alkaloid, sedangkan senyawa yang bersifat nonpolar adalah terpenoid dan steroid (Sastrohamidjojo, 1985).<br /><br />Alginat memiliki campuran struktural yang dominan dari dinding sel dan intercellular matriks pada rumput laut alga coklat (Kloareg & Quatrano, 1988). Secara luas digunakan dalam makanan, farmasi dan industri kosmetik, alginat juga dominan pada pemanfaatan industri dari rumput laut coklat. Produksi alginat secara global diperkirakan sebesar 27.000 ton per tahun, mendekati nilai sebesar US$ 230 juta (Indergaard & Ø Stgaard, 1991).<br /><br />Alginat adalah garam dari asam alginic, suatu co-polymer linier dari b-1, asam 4-D-mannuronic dan a-1, asam 4-L-guluronic, dengan residu diorganisir dari kelompok asam polyguluronic dan polymannuronic, seperti sequens heteropolymeric dari asam guluronic dan mannuronic. Alginat dilaporkan dapat merangsang produksi cytokines, tumour necrosis factor-a, interleukin-1 dan interleukin-6 dari monocytes manusia (Otterlei et Al., 1991; Espevik et Al., 1993), dan tidak bisa dipisahkan dari aktivitas perlawanan antitumour terhadap model tumour murine secara in-vivo (Fujihara et al., 1984; Fujihara & Nagumo, 1992). Suntikan Intraperitoneal tunggal dari derivat alginat seperti alginate-DNM (daunomycin) pada tikus B16 menekan tumours subcutaneous yang dihasilkan kecil, tetapi secara signifikan menghalangi pertumbuhan tumor (Al-Shamkhani & Duncan, 1995).<br /><br />Depolymerisasi secara biologi dari alginat adalah mengkatalisasi dengan alginate lyases (EC 4.2.2.3) melalui reaksi β-elimination, membelah rantai molekular dan menciptakan asam uronic yang tak terbungkus pada akhir tanpa pengurangan yang baru (Haugen et al., 1990). Produk akhir adalah campuran dari oligosaccharides pendek, yang menjadi bioaktif dan mempunyai aktivitas antitumour dan antivirus (Boyd & Turvey, 1978; Currie, 1983).<br /><br />Adanya flavonoid dalam lingkungan sel, menyebabkan gugus OH- pada flavonoid berikatan dengan protein integral membran sel. Hal ini menyebabkan terbendungnya transpor aktif Na+ - K+. Transpor aktif yang berhenti menyebabkan pemasukan ion Na+ yang tidak terkendali ke dalam sel, hal ini menyebabkan pecahnya membran sel. (Scheuer, 1994). Pecahnya membran sel inilah yang menyebabkan kematian sel.<br /><br />1. Flavonoids<br /> <br />Flavonoid merupakan salah satu golongan fenol alam terbesar yang terdapat dalam semua tumbuhan berpembuluh. Semua flavonoid, menurut strukturnya merupakan turunan senyawa induk flavon yang mempunyai sejumlah sifat yang sama. Dalam tumbuhan, aglikon flavonoid terdapat dalam berbagai bentuk struktur. Semuanya mengandung atom karbon dalam inti dasarnya yang tersusun dalam konfigurasi C6-C3-C6, yaitu dua cincin aromatik yang dihubungkan oleh satuan tiga karbon yang dapat atau tidak dapat membentuk cincin ketiga. Semua varian flavonoid saling berkaitan karena alur biosintesis yang sama, yang memasukkan pra zat dari alur sikimat dan alur asetat-malonat. Flavonoid dalam tumbuhan umumnya terikat sebagai glikosida, baik O-glikosida maupun C-glikosida (Markham. K.R., 1988).<br /><br />2. Steroid dan Triterpenoid<br /><br />Triterpenoid adalah senyawa yang kerangka karbonnya berasal dari enam satuan isoprena dan secara biosintesis dirumuskan dari hidrokarbon C30 asiklin, yaitu skualena. Senyawa ini berstruktur siklin dan nisbi rumit, kebanyakan berupa alcohol, aldehida atau asam karbohidrat. Senyawa ini tidak berwarna, berbentuk kristal, sering bertitik leleh tinggi dan aktif optik pada umumnya sukar dicirikan karena tak ada kereaktifan kimianya. Uji yang banyak digunakan adalah reaksi Lieberman-Burchard yang dengan kebanyakan triterpena dan sterol memberikan warna hijau-biru. Triterpena dapat dipilih menjadi sekurang-kurangnya empat golongan senyawa: triterpena sebenarnya, steroid, saiconon dan glikosida jantung. Kedua golongan terakhir sebenarnya triterpena atau seteroid yang terdapat sebagai glikosida (J.B. Harborne, 1987).<br /><br />3. Alkaloids<br /><br />Tidak ada istilah alkaloid yang memuaskan, tetapi umumnya alkaloid ini mencakup senyawa bersifat basa yang mengandung satu atau lebih atom nitrogen, biasanya dalam gabungan sebagai bagian dari sistem siklik. Alkaloid sering kali beracun bagi manusia dengan bahaya yang mempunyai aktivitas fisiologi yang menonjol sehingga digunakan secara luas dalam pengobatan. Alkaloid biasanya tak berwarna, seringkali bersifat aktif optik kebanyakan berbentuk kristal pada suhu kamar. Prazat alkaloid yang paling umum adalah asam amino, meskipun sebenarnya biosintesis kebanyakan asam amino lebih rumit. Secara kimia alkaloid merupakan suatu golongan heterogen. Banyak alkaloid bersifat terpenoid dan beberapa diantaranya dari segi biosintesis merupakan terpenoid termodifikasi alkaloid lain terutama berupa senyawa atomatik dengan gugus basa sebagai rantai samping (Harborne J.B, 1987).<br /><br />NB. Dari Berbagai sumber.<br /><br /></span></div><div class="blogger-post-footer">MEMUSNAHKAN TANDA TANYA ANDA. THANKS BRO !</div>Thailand aik aikhttp://www.blogger.com/profile/10964108109700651247noreply@blogger.com2tag:blogger.com,1999:blog-2030866544649181977.post-685833694464882162009-12-13T20:40:00.006+07:002010-01-08T21:42:36.921+07:00Methods Cell Culture<a onblur="try {parent.deselectBloggerImageGracefully();} catch(e) {}" href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEhqsBes6uSaqA40l1VkP_L4Pe-LnDsxY244neH9VTpSxUZsAqYIHyoDWdfGEhycTmObyyqgBbiLF7pIt6OuGBImKk7-EdchvmwH7rAv3a1n0a_rUvSC0t_jr4NNNU4mkioxltW1tAh5g9A/s1600-h/culture+cell.jpeg"><img style="float:left; margin:0 10px 10px 0;cursor:pointer; cursor:hand;width: 136px; height: 79px;" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEhqsBes6uSaqA40l1VkP_L4Pe-LnDsxY244neH9VTpSxUZsAqYIHyoDWdfGEhycTmObyyqgBbiLF7pIt6OuGBImKk7-EdchvmwH7rAv3a1n0a_rUvSC0t_jr4NNNU4mkioxltW1tAh5g9A/s200/culture+cell.jpeg" border="0" alt=""id="BLOGGER_PHOTO_ID_5424379196822608898" /></a>
<br /><b>Muhammad Fahri*</b>
<br />Dari berbagai sumber bacaan.
<br />
<br />Methods
<br />Culture
<br />
<br />The HeLa cell line (Scherer et al., 1953) and its derivates, were cultured at 37°C with 5% C02 in Dulbecco’s Modified Eagle's Medium (DMEM) containing 10% heat inactivated fetal calf serum (FCS), 2 mM L-glutamine, 50 μg/ml penicillin and 50 μg/ml streptomycin. Cultures at ~80% confluence were routinely split 1:5 in 10 cm culture dishes as follows. The cells were washed twice in prewarmed PBS. 1 ml PBS containing 0.25% (w/v) Trypsin was added to the dishes and placed at 37°C for 5-10 minutes. After the cells were detached from the dishes, 1 ml prewarmed culture medium was added and the cells transferred to a 50 ml falcon tube. Cells were spun down at 150 g and plated in new dishes with fresh culture medium.
<br />
<br /><span class="fullpost">
<br />
<br />Insects cells were cultured at 26°C in Grace’s medium (for Sf9 cells) or TMN-FH medium (for Hi-5 cells) containing 10% heat inactivated FCS, 2 mM L- glutamine, 50 μg/ml penicillin, 50 μg/ml streptomycin, 0.1% Pluronic F-68 and 1x Yeastolate. The Sf9 cells grew well as suspension culture and Hi-5 cells as loosely adhered cultures in Petri dishes. For Sf9 cells, 50 ml suspension cultures were maintained in 250 ml glass bottle, with shaking at 110 rpm in the 26°C incubator. For Hi-5 cells, 15 cm dishes are used to infect cells. Starting culture always had
<br />the cell density of 0.5 million cells per ml. Cells were split twice in a week and care was taken for the cell density to never exceeded 3 million cells per ml. Human cell line transfection method Roti Fect reagent from Roth was used to make all transfections. Cells were grown to 60 – 80 % confluence. 10ug of qiagen purified DNA was used for a typical 10cm dish transfection. In tube A, 500ul of optimem (serum free medium) is added to DNA. In tube B, 500ul of optimem (serum free medium) is added to 30ul of Roti Fect reagent. Now contents of both tubes are mixed gently. The DNA – Lipid complex is allowed to form by incubating the transfection reaction for 30 minutes at room temperature. While complex is forming rinse the cells with PBS
<br />and refill the dish with fresh serum free medium. Add DNA – Lipid complex on the cells and mix gently. Incubate for 4-6 hours. Remove the transfection medium and add complete medium to cells.
<br />
<br />Generating stable cell lines
<br />
<br />The HeLa cells were used to generate stable cell lines with constitutive expression of recombinant protein. A new technique of sorting sub cloning
<br />
<br />Flow cytometry
<br />
<br />Flow cytometry, or fluorescence-activated cell scanning or sorting (FACS analysis), is the measurement of characteristics of single cells suspended in a flowing saline stream when they flow past a series of detectors. The fundamental concept is the cells flow one at a time through a region of integration where multiple biophysical properties of each cell can be measured at rates of over 1000 cells per second. These biophysical properties are then correlated with
<br />biological and biochemical properties of interest.
<br />
<br />Cells subjected for FACS analysis in this study were either expressing fluorescent protein EGFP or stained with propidiumiodide (PI) as described. Cells grown on 6-well plates were harvested by centrifuging at 1200 g for 3 min as described, and then suspended in 400 μl of PBS with 0.1% EDTA in Falcon tube 2054. The cells were scanned on the FACSCalibur station (Becton Dickinson Inc.) using proper laser settings according to the suggested manufacture protocols. In order to keep the resolution as accurate as possible, the acquisition flow rate was controlled around 200 events per second by choosing proper scanning speed on the FACScalibur or diluting the cells with PBS. Dead cells and cell debris were excluded by gating the cells with a FSC threshold of 200. Doublet discrimination (DMM) to distinguish between clumped and mitotic cells was set for FL2. One negative cell line was included as autofluorescence control in each FACS analysis in order to adjust the instrumental setting properly for the positive fluorescent samples. The instrumental settings were kept consistent for all batches of samples during the time course. 10,000 cells were set as the defined scanning events for every sample. Data acquisition and control of the flow cytometer was performed with the CellQuest program (BD Biosciences, Heidelberg, Germany).
<br />
<br />FACSorting in this study was set for collecting EGFP positive or negative cell populations. Cells grown in T25 flasks were harvested and counted. The cells were diluted with PBS at a concentration of 2X 10E6 cells per ml. The cell suspension was pipetted into 5 ml Falcon round bottom tubes (Falcon tube 35-2235) through cell-strainer cap to break up any clumped cells. The cells were sorted on FACSVantage (Becton Dickinson Inc.) and the subpopulations were
<br />collected into 15 ml Falcon tubes with 3 ml complete medium.
<br />
<br />Transfection of Sf9 cells with bacmid for baculoviruses preparation
<br />
<br />Two ml of Sf9 cells with a density of 0.5 million cells per ml were put in each well of a 6-well plate. The cells were let to stand for one hour at RT. In the mean time a mixture 200 μl Grace’s media (without FCS), 15 μl DAC-30 (a kind gift from the Rezka lab, MDC, Berlin) and 10 μl Bacmid DNA (10 μg) were made and incubated at RT for 30 min. After 30 min 800 μl Grace’s media (without FCS) was added to this mixture and the mix was added to Sf9 cells in the six well plates. The Sf9 cells were washed once with Grace’s media (without FCS) before adding
<br />the transfection mix. The cells were incubated with 1 ml transfection mix at 26°C for 4 hours. The transfection mix was removed and 2 ml of fresh Grace’s complete media was added to the culture. Cells were further grown for at 26°C for 72 hours.
<br />
<br />After 72 hours the culture supernatant was collected and one ml of this supernatant (containing baculoviruses) was added to a 60 mm dish containing 5 ml culture volume (2.5 million cells), for further amplification of the baculovirus. </span><div><span class="fullpost">
<br />Recombinant DNA techniques
<br />
<br />Conventional DNA preparation protocols
<br />
<br />All standard methods like plasmid preparation, cloning methods, electrophoresis on agarose gels in TBE or TAE etc were done according to methods provided by Molecular cloning book (Sambrook and Russel, 2001) or according to the manufacturer’s instructions. Modifications of any of these protocols are indicated where necessary.
<br />
<br />Elution of DNA from agarose gel pieces
<br />
<br />A homemade electrophoresis device (‘salt trap’) was used for elution of DNA fragments from agarose gel pieces. The apparatus was filled with 0.5 X TBE and agarose gel pieces with DNA was placed in the slots. Any air bubbles in the passages of the apparatus were carefully removed. 80 μl of salt trap solution (3 M Sodium Acetate, 0.025% w/v Bromophenol blue dye, pH 7) was loaded in the salt trap passage. The apparatus was connected to power pack and run at constant 150 Volts for 30 minutes. Then, the blue colored salt trap solution was collected in 1.5 ml tubes and equal volume of isopropanol was added to the tube. The precipitated DNA was immediately centrifuged at 4°C, 20000 g for 20 min. The pellet was washed once in 70% ethanol dried and re-dissolved in desired volume of double distilled water.
<br />
<br />Biochemical methods of protein purification
<br />
<br />Cell lysis and nuclear salt extraction method
<br />
<br />HeLa cells and insect cells were both lysed using the same protocol. Cells were harvested and washed twice in ice cold PBS. Cells were then either lysed immediately or snap frozen in freezing buffer (PBS, 2 mM MgCl2 and 10% glycerol). For lysis, ice-cold lysis buffer (PBS, 2 mM MgCl2, 0.1% NP40, 10% glycerol and 1 mM PMSF) was added to the cells. All further steps were done at 4°C. Cell were uniformly mixed and incubated for 5 min. The nuclei were pelleted by spinning the lysate at 1500 g for 4 min. The nuclei pellet was washed once in lysis buffer and salt extracted in lysis buffer with 300 mM KCl for 1 hour. The soluble proteins were collected by spinning at 20000 g for 20 min. The nuclear salt extract was used for ORC immunoprecipitations and HA affinity purification experiments.
<br />
<br />A typical experiment with Sf9 cultures, used cells from 50 ml baculovirus infected cells (pre infection cell count of 0.5 million cells per ml). The cell pellet was lysed in 8 ml lyisis buffer. Isolated nuclei were extracted in 2 ml of lysis buffer with 300 mM salt.
<br />
<br />SDS-gel electrophoresis and Immunoblotting
<br />
<br />Polyacrylamide Gel Electrophoresis (PAGE)
<br />
<br />Polyacrylamide gels used in this work were 1 mm thick, 8 cm wide and 9.2 cm long. The gels were poured in Hoefer mini VE Basic gel frames. The electrophoresis tank and upper chamber of the gel container were filled with 1x SDS running buffer (25 mM Tris-HCl, 192 mM glycin, 0.1% SDS). Proteins were separated through 10% or 12% polyacrylamide minigels, followed by coomassie staining, silver staining or immunoblotting for protein detection. The gels were electrophoresed at 150 V for first half an hour and then at 200 V till the bromophenol dye reached the bottom. Power was supplied from a BioRad PowerPac 400 (Pharmacia).
<br />
<br />Transfer of proteins to PVDF membranes
<br />
<br />Before use PVDF membranes (Immobilon P, Millipore) were treated as follows: membranes were placed in 100% methanol for 1 minute, transferred into 60% methanol. The membranes were soaked in 1x transfer buffer (25 mM Tris, 192 mM Glycin) for at least 5 minutes. Polyacrylamide gels containing separated proteins were placed on PVDF membranes sandwiched between, 2 mm whatmann paper, 1mm whatmann paper presoaked in 1x transfer buffer and placed in a semi-dry blotter (Bio-Rad). The proteins were transferred at 15V for
<br />60 minutes. Power was supplied from a BioRad Power Pac 200 (Pharmacia). The efficiency of the transfer was confirmed by staining the PVDF membrane with Poncue-S.
<br />
<br />Immunoblotting
<br />
<br />PVDF membranes containing bound proteins were blocked with super blotto solution (10 mM Tris pH 8.0, 150 mM NaCl, 0.1% Tween 20, 0.5% NP40, 0.5% BSA, Fraction V, 2.5% non-fat dried milk) for one hour at RT or overnight at 4°C. The membranes were incubated with primary antibodies diluted in super blotto for 1-2 hour at RT or overnight at 4°C. The membranes were washed twice in 1x TBST (100 mM Tris-Hcl, pH 8.0, 1.54 M NaCl, 1% V/V Tween 20) for 5 minutes and incubated for one hour at RT in super blotto containing a 1:5000 dilution of horseradish peroxidase (HRP) conjugated secondary antibody. The membranes
<br />were washed three times, for 10 minutes each in 1x TBST and the bound antibodies were visualized by chemiluminescence. </span></div><div><span class="fullpost">
<br />Chemiluminescence
<br />
<br />Immunoreacted proteins were detected using the SuperSignal Pico West (Pierce). Equal volumes of the Luminol/Enhancer and Stable Peroxide solutions were mixed, poured onto the immunoblotted PVDF membranes and incubated for 2 minutes at RT. Excess solution was drained away, the blot placed in clear plastic folder and exposed to Biomax MR film (Kodak). The film was developed through an AGFA Curix 60 machine (AGFA, Germany).
<br />
<br />Immunoprecipitation (IP)
<br />
<br />All immunoprecipitations were done using nuclear extracts prepared by the method described earlier. When using anti-serum for IPs, the nuclear extract was pre cleared with pre immune serum from the same rabbit. 10 μl of preimmune serum and 7.5 μl protein A coupled sepharose beads (Pharmacia) was added to 400 μl of nuclear extract (from 1 million cells) and incubated at 4°C on shaker for 2 hours. The beads were then spun down (1000 rpm, 4°C, 4 min) and 10 μl of
<br />anit-serum was added to the supernatant. The anti-serum was incubated with cleared nuclear extract overnight at 4°C on shaker. Next day, 7.5 μl Protein A coupled beads were added to the tube and incubated further for 2 hours at 4°C. The IP beads were spun down (150 g, 4°C, 4 min) and washed 5 times with total of 5 ml lysis buffer (0.1% NP40, 1X PBS, 2mM MgCl2, 1mM DTT, 10% Glycerol).
<br />
<br />When using a monoclonal antibody for immunoprecipitation, either antibody coupled to beads was purchased or covalently coupled. 2.5 μl of the antibodycoupled beads were added to 200 μl of nuclear extract (from 2-3 million cells) and incubated overnight at 4°C on shaker. The beads were washed with lysis buffer next day, 5 times with a total of 5 ml buffer. Then the beads were boiled in 1X SDS loading buffer and separated on SDS-PAGE. The proteins were transferred on PVDF membrane and detected by immunoblotting.
<br />
<br />HA-affinity purification of recombinant protein complex
<br />
<br />Sf9 cells were infected with baculoviruses coding for different HsOrc proteins and were harvested 60 hours post infection. Cells were lysed and nuclear extract was made following the method described before. 25 μl of 50% HA ab-agarose slurry was added to 1 ml of nuclear extract (corresponding to 1.25 X 107 infected Sf9 cells) and incubated overnight at 4°C on an overhead rotor. The antibody binding was done in siliconized 1.5 ml eppendorf tubes. The beads were washed 5 times with a total of 5 ml ice cold lysis buffer. The proteins bound to the antibody beads were eluted by cleaving off the tag on Orc, using TEV protease enzyme (Invitrogen). For TEV digestions, 1X TEV protease enzyme buffer and 1 μl of TEV protease enzyme (10 units) was added to the washed beads in a total volume of 100 μl. The beads were incubated at 16°C for 2 hours for TEV digestion. The eluate was collected by spinning the tubes and taking the
<br />supernatant without disturbing the beads pellet. ORC complex from 12.5 million cells were eluted in 140 μl 1X TEV buffer. Care was taken not to let the antibody coupled agarose beads to dry at any step of the experiment.
<br />
<br />TCA precipitation of protein
<br />
<br />100% Trichloro acetic acid (TCA) solution was mixed with 1/10 volume of 10% Sodium deoxycholate (DOC) solution before use. The mixing was done at room temperature, on shaker for half an hour. 1/4 volume of TCA/DOC mixture was added to the protein solution, and was incubated on ice for 40 min after a quick vortex. The samples were centrifuged at 20000 g for 20 min at 4°C. The supernatant was poured off and 100 μl ice cold Acetone was added to the pellet. The samples were centrifuged again at 20000 g for 20 min at 4°C. The pellet was
<br />air dried at RT for 30 min to 1 hour. The pellet was dissolved in minimal volume of SDS-sample loading buffer. The presence of trace amounts of acetone sometimes gave yellow color to the sample and it was titrated with 1 M Tris HCl pH 8.5 to get the normal blue color (color is indicative of the sample pH).
<br />
<br />In vivo DNA binding assay
<br />
<br />All transfections were made in HeLa cells by Roti fect transfection method. The expression vector TO4/LacZ has 2xtetO sequences surrounding the TATA box of the CMV promoter (i.e. a “repression reporter”). Tet repressors (TR6) or Tettransactivators in the cell switch the expression of ß-galactosidase OFF and ON in absence and presence of Dox, respectively. In contrast, the pTRE/LacZ plasmid has a Tet responsive promoter (TRE, containing multimerized tet operators in front of minimal CMV promoter i.e. an “activation reporter”). Here, the Tet transactivator switches the expression of ß-galactosidase ON and OFF in absence and presence of Dox, respectively. Tet repressor should not induce expression of ß- galactosidase. After 3 days incubation, cells were harvested and ß-galactosidase activity is measure by Galacto-Light Kit (Applied biosystems) as per manufacturer’s protocol. As an internal control 10ng firefly luciferase expressing plasmid is co-transfected with all expression vectors. Relative intensity of luciferase is used to normalize the ß-galactosidase activity.
<br />
<br />Electrophorectic mobility shift Assay
<br />
<br />EMSAs were performed as described previously (Baron et al., 1997). Breifly, HEK 293 cells were grown in 10 cm dishes to 50-60% confluency and transfected via the Lipofectamine procedure with 10 ug of plasmid DNA encoding the various Orc fusions. 72 hours post-transfection total cell extracts were prepared as described before. Aliquots of the extracts (10 ul) were mixed with 10 ul of binding buffer (20 mM MgCl2, 20 mM Tris, pH 7.5, 10% glycerol, 2 mg/ml herring sperm
<br />DNA and 1 mg/ml bovine serum albumin, 2X protease inhibitor cocktail, 2mM ATP) and 2fmol 32P-end labeled tetO DNA (34 bp synthesized oligos). After 25 min, the reaction mixture was loaded onto a 5% polyacrylamide/0.13% bisacrylamide gel containing 5% glycerol. Electrophoresis was carried out in 0.5x TBE (45 mM Tris base, 45 mM boric acid and 1 mM EDTA) at 10 V/cm.
<br />
<br />Short term plasmid Replication assay
<br />
<br />Plasmids are transfected into HEK 293 cells with Roti Fect transfection as described before. Cells are harvested 72 hours post transfection. Plasmid is extracted by method of Hirt (Hirt) as follows. Cells were washed twice with PBS and lysed with 1% SDS in 1X TE (Tris 8.0, EDTA 10mM) on the plate itself. 5M NaCl is added to the final concentration of 1M. Lysate is incubated in 4°C overnight and centrifuged at 15000 xg for 30 min at 4°C. Supernatant is incubated with 200ug/ml of RNAase for 1 hour at 37°C. Subsequently, 100ug/ml of Proteinase K is added at 37°C for 1 hour. After phenol:choloroform extraction DNA is ethanol precipitated in suspended in TE buffer or autoclaved water. To analyze the replication, extracted plasmids are linearized and digested with DpnI together a unique cutter for 3 hour to overnight. The DpnI resistant bands are analyzed by southern hybridization using appropriate radiolabeled DNA probes. Efficiency of DpnI digestion is tested by spiking 1ug of bacterial plasmid from DH5α or GM47 (Dam - strain) into Hirt extracts from untransfected cells.
<br />
<br />Southern Hybridization
<br />
<br />Digested DNA is resolved on 1% agarose gel. After analyzing the gel under UV, it’s incubated with denaturation buffer for 30 minutes to get appropriate target for the radiolabeled probe. Overnight capillary transfer is used to transfer DNA to charged nylon membrane. After UV cross-linking, membrane is incubated with pre hybridization buffer at 65°C for 2 - 4 hours. In the mean time, probe is radiolabeled with [α-P32] CTP using NEblot kit. For SV40 replication
<br />experiments, AgeI/BsrGI digested fragment of pEGFP-C1 (Clontech) was used as probe. For tetO dependent experiments, XcmI/BglII fragment cut out from scTet plasmid was used as probe. Overnight incubation with radiolabeled probe allows hybridization of probe with specific target DNA on nylon membrane.Membrane is exposed to phosphor plate after three washes and analyzed with phosphor imager.
<br />
<br />Biotin-streptavidin coupling
<br />
<br />For a standard coupling reaction, either 100pmol of 77bp biotinylated annealed tetO or 150pmol of 34bp biotinylated annealed tetO is used per mg of streptavidin coated paramagnetic beads. Beads are suspended in 100 ul of high salt binding buffer after two washes in the same buffer. Afterwards biotinylated DNA is incubated with the beads for 1-2 hours at 25°C with gentle shaking. The magnet is applied to collect the bound DNA. After three stringent washes with
<br />binding buffer. DNA coupled beads are resuspended in 100 ul of same buffer and stored in 4°C
<br />
<br />Biotin DNA- Protein interaction
<br />
<br />10pmol of streptavidin coupled DNA is used in a standard binding reaction. Final binding reaction contains 1x binding buffer, 60mM NaCl, 1mM ATP, 2x protease inhibitor cocktail, 1mg/ml ssDNA, 2mg/ml BSA and 10 fold excess of Poly (dA). Poly (dT). Purified ORC is incubated with the binding reaction for 10 minutes at 4°C. Then tetO is added to the reaction. After 30 minutes incubation at 4°C, magnet is applied to collect the bound protein. Beads are boiled with 10ul of 1x SDS buffer after three stringent washes with 1x binding buffer. Protein is loaded on 10% SDS gel and silver stained.
<br />
<br />Purification of recombinant ORC using Talon beads
<br />
<br />In parallel to HA antibody purification, ORC is also purified through His-tag using talon beads (Clontech). Protein was expressed in 15 cm dishes with Hi-5 cells at a density of one million cells/ ml. Cells were harvested and washed twice with PBS. lysis buffer. Nuclear extract is made as described before. Typical volume of nuclear extracts obtained from a 15cm dish is 1ml. To this, 50 -60ul of talon beads is added. Beads have to be washed twice in the lysis buffer before adding to nuclear extracts. After incubation at 4°C for 2 h, bound protein is spun down at
<br />700g for 2 minutes. 4-5 washes with Lysis buffer (without 300mM KCl), Histagged protein is eluated batch-wise in lysis buffer with 400mM imidazole, pH 5.0. Two rounds of elution at 4°C incubation for 30 min each, generally gives more than 80% of bound protein. Eluted protein is snap frozen and stored in -80°C.
<br />
<br /></span></div></div><div class="blogger-post-footer">MEMUSNAHKAN TANDA TANYA ANDA. THANKS BRO !</div>Thailand aik aikhttp://www.blogger.com/profile/10964108109700651247noreply@blogger.com0tag:blogger.com,1999:blog-2030866544649181977.post-12485117800857365002009-12-13T20:09:00.005+07:002010-01-08T21:39:39.921+07:00New The Mechanisms Of Gene Regulation<a onblur="try {parent.deselectBloggerImageGracefully();} catch(e) {}" href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEjxglnW_mLsdgQbv9wgNiySWbXaM2xnALM1CIZ5Q5kk4JKlInGLE3DHTxq-Uhu4FA7lI57MKAjArHFF1VLXWHh-Av7farNFh33Rq29YktT0KKPI1BfGbjzww_CE7Yp0Nor2f3kzlzfC_sE/s1600-h/GeneRegulation.jpg"><img style="float:right; margin:0 0 10px 10px;cursor:pointer; cursor:hand;width: 200px; height: 146px;" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEjxglnW_mLsdgQbv9wgNiySWbXaM2xnALM1CIZ5Q5kk4JKlInGLE3DHTxq-Uhu4FA7lI57MKAjArHFF1VLXWHh-Av7farNFh33Rq29YktT0KKPI1BfGbjzww_CE7Yp0Nor2f3kzlzfC_sE/s200/GeneRegulation.jpg" border="0" alt=""id="BLOGGER_PHOTO_ID_5424378622014148274" /></a><br />Muhammad Fahri*<br />Mahasiswa Pasca Biotek Perikanan UB malang<br /><br /><span style="font-weight:bold;">New Research Into The Mechanisms Of Gene Regulation<br />Source: Penn State</span><br /><br />A team led by Penn State's Ross Hardison, T. Ming Chu Professor of Biochemistry and Molecular Biology, has taken a large step toward unraveling how regulatory proteins control the production of gene products during development and growth. Working with collaborators including Drs. Mitchell Weiss and Gerd Blobel at Children's Hospital of Philadelphia, they focused specifically on the complex process of producing red blood cells (erythrocytes). These cells contain large amounts of hemoglobin, a molecule essential for transporting oxygen throughout the body. Abnormalities in hemoglobin figure in many serious diseases, such as sickle-cell disease, and abnormalities in producing blood cells can lead to leukemias. The work will be published in the December 2009 issue of the journal Genome Research.<br /><span class="fullpost"> <br />As erythroid cells mature into red blood cells, the transcription factor, GATA-1, turns the genes responsible for making different proteins on and off. Hardison's team worked with a special strain of mouse erythroid cells that lack the gene gata-1. These cells could not mature into red blood cells unless the researchers added the protein GATA-1 experimentally. This procedure allows the investigators to monitor how the genes respond to GATA-1.<br /><br />GATA-1 binds to special sites on the cell's DNA. The first step of the project was to locate the genes that are affected by GATA-1, so the researchers conducted a genome-wide search after adding GATA-1 to the cells. Using microarrays developed by newer methods of manufacturing which allow for a much higher density of probes, the team examined 19,000 mouse genes using 45,000 probe sets, many more than previous researchers had been able to study.<br /><br />They found that adding GATA-1 affected 2,616 genes significantly, which was defined as showing at least a twofold change in the amount of the gene's product. Substantially more genes (1,568) were turned down or off by GATA-1 than were turned on (1,048) by GATA-1. The rest showed little or no response to the addition of GATA-1.<br /><br />Could the differences in gene response and expression be explained by the spatial patterning of GATA-1 binding? The team used two independent methods of mapping where the GATA-1 binding sites lay on the DNA, and how far those binding sites were from the responsive genes. The two methods yielded strikingly similar information. In all, they found 15,360 DNA segments occupied by GATA-1.<br /><br />Genes responsive to GATA-1 tend to occur in clusters on the DNA, with each cluster being separated from the next by long regions without any responsive genes. <br /><br />"We think each cluster of responsive genes may represent a regulatory domain," says Hardison. "This work also highlights the importance of local regulation by transcription factors."<br /><br />One of the fascinating discoveries of this research is how the genes that are enhanced by GATA-1 differ from those that are repressed. Nearly all responsive genes (more than 88%) lie within 100 kilobase pairs (kb) of a GATA-1 site and more than 60% of those that are up-regulated are less than 5 kb away from the closest GATA-1 site. In contrast, 60% of repressed genes are up to 33 kb away from the closest DNA sites occupied by GATA-1. Enhanced genes also have more nearby GATA-1 sites than repressed genes do. <br /><br />The team also found evidence that the specific motif on the DNA sites to which the GATA-1 binds when it enhances genes is strongly conserved evolutionarily, while the binding motifs for repressed genes are not so strongly conserved across different species. This suggests that the selective pressure to increase gene expression is stronger than that to decrease gene expression. <br /><br />Another issue is whether or not GATA-1 forms a complex with TAL1 (T-cell acute lymphocytic leukemia protein 1) at the binding sites. Almost all (at least 83%) of the activated genes have one or more complexes of GATA-1 and TAL1 nearby. A substantial fraction (38%) of the repressed genes lack or have decreased amounts of TAL1 after GATA-1 is added. Thus for many genes, the presence of TAL1 at the GATA-1 binding sites distinguishes activation from repression. However, another class of repressed genes, comprising 62% of the total, have complexes of GATA-1 and TAL1 in their vicinity. <br /><br />"It is not a simple relationship," explains Hardison. "Genes that are activated almost invariably have complexes of GATA-1 and TAL1 at the binding sites, and genes lacking TAL1 at the GATA1-binding sites are almost always down-regulated. This suggests a model in which the GATA-1/TAL1 complex is involved in gene activation. However, we also see a large number of repressed genes with both proteins at the binding sites. These data indicate that there must be at least two mechanisms for repressing genes in these red blood cells, and only one of those mechanisms involves a loss of TAL1," concludes Hardison.<br /><br />Another factor involved in regulating the expression of genes responsive to GATA-1 is the modification of histone H3, a protein that coils and compresses DNA inside the nucleus. Overall, Hardison's team found that histone modification is common in the large regions of the DNA that contain the GATA-1 responsive genes and the GATA-1 binding sites, but histone modification does not occur in the adjacent "dead zones" that lack genes responsive to GATA-1. <br /><br />One particular histone modification, the trimethylation of amino acid lysine at position 27 of histone H3 -- or H3K27me3 -- is well-known to be associated with repression of some genes. By analyzing the location and amount of H3K27me3 around GATA1-responsive genes, the team gained new insights into how this modification influences the expression of genes. As expected, genes enhanced by GATA-1 have very little H3K27me3. However, the two classes of repressed genes differ in the level of H3K27me3. Like enhanced genes, the repressed genes that retain TAL1 after the addition of GATA-1 have low levels of H3K27me3. Those genes that lose some or all of their TAL1 after adding GATA-1 have relatively high levels of H3K27me3. <br /><br />One class of down-regulated genes, perhaps the one with low TAL1 and increased H3K27me3, may be directly repressed by GATA-1. Possibly GATA-1 recruits other proteins that help reduce the level of expression. This repressed state appears to be indicated by the presence of H3K27me3. <br /><br />In addition, the team hypothesizes that there is another, indirect mechanism for repressing genes. They suggest that the capacity for a cell to transcribe genes and manufacture their products is limited. In effect, if the cell has a series of transcription factories -- each of which has particular favored "customers" (genes) -- then placing a big order for one set of customers (the genes promoted by GATA-1) will indirectly cause the gene products for other customers (those not being promoted by GATA-1) to be diminished. This scenario implies that all the GATA-1 responsive genes are served by a limited number of local transcription factories with limited capacities. <br /><br />"Though we developed this hypothesis about gene regulation by studying erythrocytes," comments Hardison, "it could obviously apply to the more general function of many different types of gene regulation. Since almost every disease is related in some way to gene expression, this could provide a powerful new model for thinking about many different diseases and their treatment. <br /><br />"For example," Hardison continues, "sickle-cell disease is a devastating illness affecting more than 70,000 Americans1. It is caused by mutations in hemoglobin genes. All adults still produce some amount of fetal hemoglobin, and that amount differs among individuals. Some sickle-cell patients produce relatively high levels of it, and these patients have much milder symptoms. If we could learn how to repress the genes that produce the defective hemoglobin and promote those that produce the fetal hemoglobin, we may be able to develop an important new therapy to combat this disease." <br /><br />Other collaborators in the research are graduate students and research associates at Penn State (Yong Cheng, Weishing Wu, Swathi Ashok Kumar, David C. King, Kuan-Bei Chen, Ying Zhang, Daniela Drautz, Belinda Giardine), faculty at Penn State (Stephan A. Schuster, professor of biochemistry and molecular biology; Webb Miller, professor of biology and computer science and engineering; Francesca Chiaromonte, associate professor of statistics and health evaluation sciences; and Yu Zhang, assistant professor of statistics), and students and post-doctoral fellows at Children's Hospital of Philadelphia (Duonan Yu, Wulan Deng, Tamara Tripic). <br /><br />This research was supported by funding from the National Institutes of Health, the Gordon and Betty Moore Foundation, and the Leukemia and Lymphoma Society.<br /><br />http://www.cdc.gov/Features/SickleCell/ accessed Nov. 8, 2009<br />http://news.biocompare.com/News/NewsStory/300296/NewsStory.html<br /><br />CONTACTS <br />Ross Hardison: (+1)814-863-0113, rch8@psu.edu <br />Barbara Kennedy (PIO): 814-863-4682, science@psu.edu <br /><br /><span style="font-weight:bold;">Researchers Identify Role of Gene in Tumor Development, Growth and Progression<br />Source: Virginia Commonwealth University</span><br /><br />Virginia Commonwealth University Massey Cancer Center and VCU Institute of Molecular Medicine researchers have identified a gene that may play a pivotal role in two processes that are essential for tumor development, growth and progression to metastasis. Scientists hope the finding could lead to an effective therapy to target and inhibit the expression of this gene resulting in inhibition of cancer growth.<br /><br />According to Paul B. Fisher, M.Ph., Ph.D., professor and chair of the Department of Human and Molecular Genetics, director of the VCU Institute of Molecular Medicine in the VCU School of Medicine, and program leader of Cancer Molecular Genetics at the Massey Cancer Center, the team has shown that astrocyte elevated gene-1, AEG-1, a cancer promoting gene, is involved in both oncogenic transformation, which is the conversion of a normal cell to a cancer cell, and angiogenesis, which is the formation of new blood cells. Oncogenic transformation and angiogenesis are critical for tumor development, growth and progression to metastasis.<br /><br />In the study published online the week of Nov. 16 in the Early Edition of the journal Proceedings of the National Academy of Sciences, researchers employing a series of molecular studies reported that the elevated expression of AEG-1 is involved with turning normal cells into cancer cells.<br /><br />According to Fisher, when AEG-1 was expressed in normal immortal rat embryo fibroblast cells it converted these cells into transformed cells that induced rapidly growing aggressive cancers when injected into animals. AEG-1 expressing cells displayed enhanced expression of genes regulating blood vessel formation, thereby contributing to tumorigenicity. The team has further defined the pathways in target cells that are activated by AEG-1 and mediate its oncogenic and angiogenic inducing properties.<br /><br />“Our goal is to understand the functions of a novel gene AEG-1 that plays an essential role in tumor progression, with potential to develop effective therapeutic approaches for multiple cancers through targeted inhibition of this novel molecule or its downstream regulated processes,” said Fisher, who is the first incumbent of the Thelma Newmeyer Corman Endowed Chair in Cancer Research with the VCU Massey Cancer Center.<br /><br />“We believe it will pave the way for ameliorating the sufferings of scores of cancer patients by uncovering new and effective avenues for treatment,” he said.<br /><br />To expand the work on AEG-1, the VCU Department of Human and Molecular Genetics, Institute of Molecular Medicine and Massey Cancer Center recently received a National Cancer Institute grant totaling $1.6 million to study the AEG-1 gene in the context of malignant brain tumors such as glioblastoma multiforme, or GBM. According to Fisher, who is the primary investigator for the study, the work will extend the understanding of this gene and how it may serve as an oncogenic, or transforming gene.<br /><br />“Cancer development and progression are multi-factor and multi-step processes that occur in a temporal manner. As mentioned above AEG-1 clearly has multiple roles in various steps of tumor progression, including tumor cell growth, insensitivity to growth-inhibitory signals, including chemotherapeutic agents, invasion, angiogenesis and metastasis,” explained Fisher.<br /> “In addition, AEG-1 has been known to have oncogenic roles in various cancers including glioma (CNS tumor), neuroblastoma, liver cancer, breast cancer, prostate cancer, lung cancer, and esophageal squamous cell carcinoma. These important correlations make this gene an intriguing molecule to study with potential to serve as a direct target for cancer therapy,” he said.<br /><br />The gene was discovered in 2002 in Fisher’s laboratory while he was at the Columbia University College of Physicians and Surgeons in New York.<br /><br />Fisher worked with a team that included VCU School of Medicine researchers Zao-zhong Su, Ph.D., associate professor in the VCU Department of Human and Molecular Genetics; Devanand Sarkar, M.B.B.S., Ph.D., assistant professor and Harrison Endowed Scholar in Cancer Research at the VCU Massey Cancer Center, the VCU Institute of Molecular Medicine and the Department of Human and Molecular Genetics; Hyun Yong Jeon, M.S., research assistant with the VCU Department of Human and Molecular Genetics; Luni Emdad, M.D., Ph.D., with the Mount Sinai School of Medicine in New York; and Habib Boukerche, Ph.D., a senior scientist with the University Lyon 1 in France.<br /><br />EDITOR’S NOTE: A copy of the study is available for reporters by email request from pnasnews@nas.edu. <br /><br />About VCU and the VCU Medical Center: <br /><br />Virginia Commonwealth University is a major, urban public research university with national and international rankings in sponsored research. Located on two downtown campuses in Richmond, VCU enrolls more than 32,000 students in 205 certificate and degree programs in the arts, sciences and humanities. Sixty-five of the programs are unique in Virginia, many of them crossing the disciplines of VCU’s 15 schools and one college. MCV Hospitals and the health sciences schools of Virginia Commonwealth University compose the VCU Medical Center, one of the nation’s leading academic medical centers. For more, see www.vcu.edu. <br /><br />About the VCU Massey Cancer Center: <br /><br />The VCU Massey CancerCenter is one of 63 National Cancer Institute-designated institutions that leads and shapes America’s cancer research efforts. Working with all kinds of cancers, the Center conducts basic, translational and clinical cancer research, provides state-of-the-art treatments and promotes cancer prevention and education. Since 1974, Massey has served as an internationally recognized center of excellence. It offers more clinical trials than any other institution in Virginia, serving patients in Richmond and in four satellite locations. Treating all kinds of cancers, its 1,000 researchers, clinicians and staff members are dedicated to improving the quality of human life by developing and delivering effective means to prevent, control and, ultimately, to cure cancer. Visit Massey online at www.massey.vcu.edu or call 1-877-4-MASSEY<br /><br /><br /><span style="font-weight:bold;">Paradoxical Protein Might Prevent Cancer<br />Source: Karolinska Institutet</span><br /><br />One difficulty with fighting cancer cells is that they are similar in many respects to the body's stem cells. By focusing on the differences, researchers at Karolinska Institutet have found a new way of tackling colon cancer. The study is presented in the prestigious journal Cell<br /><br />Molecular signal pathways that stimulate the division of stem cells are generally the same as those active in tumour growth. This limits the possibility of treating cancer as the drugs that kill cancer cells also often adversely affect the body's healthy cells, particularly stem cells. A new study from Karolinska Institutet, conducted in collaboration with an international team of scientists led by Professor Jonas Frisén, is now focusing on an exception that can make it possible to treat a form of colon cancer. <br /><br />The results concern a group of signal proteins called EphB receptors. These proteins stimulate the division of stem cells in the intestine and can contribute to the formation of adenoma (polyps), which are known to carry a risk of cancer. Paradoxically, these same proteins also prevent the adenoma from growing unchecked and becoming cancerous. <br /><br />The new results show that EphB controls two separate signal pathways, one of which stimulates cell division and the other that curbs the cells' ability to become cancerous. Using this knowledge, the scientists have identified a drug substance called imatinib, which can inhibit the first signal pathway without affecting the other, protective, pathway. <br />"Imatinib or a similar substance could possibly be used for preventing the development of cancer in people who are in the risk zone for colon cancer instead of intestinal resection," says Maria Genander, one of the researchers involved in the study. <br /><br />Imatinib has so far proved to inhibit cell division in intestinal tumour cells in vitro and in mice. The substance is a component of the drug Glivec, which is used, amongst other things, in the treatment of certain forms of leukaemia. Whether it can also be used against adenoma and colon cancer in humans remains to be seen. The company that manufactures the drug did not fund the study. <br /><br /></span><div class="blogger-post-footer">MEMUSNAHKAN TANDA TANYA ANDA. THANKS BRO !</div>Thailand aik aikhttp://www.blogger.com/profile/10964108109700651247noreply@blogger.com2